摘要

作品簡介:骨科文獻中有大量證據表明，長期使用非甾體抗炎藥(NSAIDs)會阻礙長骨骨折愈合和植入物周圍新骨的形成。本研究的目的是調查短期服用非甾體抗炎藥(如雙氯芬酸或塞來昔布)是否會幹擾拔牙後牙槽骨窩的愈合過程。

材料與方法:45隻大鼠(每組15隻)。拔除右上頜第一磨牙後，15隻大鼠給予雙氯芬酸5mg /kg/day, 15隻大鼠給予塞來昔布15mg /kg/day, 15隻大鼠給予生理鹽水。拔牙後7、14、21天處死動物。通過組織學分析測定破骨細胞、成骨細胞數量及新骨形成。數據采用單因素方差分析，然後進行Tukey事後檢驗(α=0.05)。

結果:在7號^th對照組成骨細胞數量高於雙氯芬酸組和塞來昔布組。對照組抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)免疫標記量高於雙氯芬酸組7^th比塞來昔布組多14天^th的一天。21號^聖天，三個研究組之間沒有顯著差異。14號^th和21^聖天，NSAID治療大鼠的新骨形成與對照組大鼠沒有顯著差異。

結論:雙氯芬酸或塞來昔布短期治療，雖然它們有抑製環加氧酶的能力，但在實驗期間沒有造成大鼠牙槽骨愈合的顯著延遲。

關鍵字

抗炎劑;塞來昔布;雙氯芬酸;非甾體抗炎藥;牙槽骨;療愈

簡介

花生四烯酸轉化為前列腺素是由環加氧酶COX-1和COX-2催化的，它們調節成骨細胞和破骨細胞的功能，並在愈合過程中對骨產生合成代謝作用[1]。非甾體抗炎藥(NSAIDs)抑製COX-1和COX-2活性，從而抑製前列腺素合成[2]。非甾體抗炎藥常用於控製發熱、疼痛、水腫、急性手術後或創傷後疼痛，以及緩解與肌韌帶疾病相關的慢性疼痛。非甾體抗炎藥是治療拔牙後疼痛的常用藥物。NSAIDs可能會延遲受損組織的修複，如拔牙後骨折的骨、軟骨、皮膚和新骨的形成[4,5]。

齧齒類動物研究表明，非甾體抗炎藥不僅會幹擾骨愈合，還會幹擾正常骨生長[6,7]。盡管有明確的證據表明非甾體抗炎藥可能會延遲受損組織的恢複，但這種作用的確切機製尚不完全清楚。目前，有許多非甾體抗炎藥可用，從傳統的非選擇性非甾體抗炎藥(非選擇性抑製COX-1/ COX-2酶)，到一類新的高選擇性COX-2抑製劑，coxibs。雙氯芬酸(非選擇性抑製COX1和COX-2酶)和塞來昔布(選擇性抑製COX-2)是具有顯著鎮痛和抗炎活性的非甾體抗炎藥[3,8]。

在骨科，長期使用非選擇性和選擇性非甾體抗炎藥會阻礙長骨形成的修複[8]。盡管傳統的非甾體抗炎藥通常用於牙科治療疼痛和腫脹，但很少有評估評估其對牙槽骨窩愈合的有害影響[9]。

關於非甾體抗炎藥對口腔手術後傷口愈合影響的數據有限。本研究旨在探討雙氯芬酸和塞來昔布是否對牙槽骨愈合有不良影響，以新形成的骨填充拔牙窩作為牙槽骨形成的實驗模型。

材料與方法

本研究選用45隻8-10周齡、體重200±25 g的雄性Wistar大鼠。在研究期間，動物被安置在類似的條件下(22°C室溫，40%濕度，12小時光照/12小時黑暗循環，免費獲得水和鼠糧)。本研究由伊朗伊斯法罕醫學科學大學動物研究倫理委員會評估並批準，本研究遵循實驗動物護理原則和國家動物使用法律[10]。

肌肉注射10%氯胺酮(Alfasan International, Woerden，荷蘭，80 mg/kg)和木拉辛(Neurotranq, Alfasan, Woerden，荷蘭，8 mg/kg)誘導全身麻醉，用錐體器械脫除右上磨牙，用改良的止血鉗取出右上磨牙(每個喙上造兩個腔)。采用非創傷性手術技術拔牙。這些動物被觀察到完全康複;沒有使用抗生素或其他藥物。

這些動物被隨機分為三組。塞來昔布組給予每天15 mg/kg體重塞來昔布(Daroupakhsh Co，德黑蘭，伊朗)灌胃;雙氯芬酸組給予5 mg/kg體重的雙氯芬酸鈉(Daroupakhsh Co)，用無菌蒸餾水稀釋後皮下注射。對照組每天隻注射生理鹽水。從拔牙當天開始，所有組的藥物治療為期七天。所有藥物的劑量都是根據先前的研究和藥代動力學數據來選擇的，以模擬用於治療人類的類似劑量，同時考慮到物種之間代謝的差異[3,11,12]。

每組5隻動物於7日處死^th, 14^th和21^聖過量吸入乙醚後抽吸一天。去除下頜骨，上頜固定在4%多聚甲醛溶液中(SRPC，德黑蘭，伊朗)，用10%乙二胺四乙酸(EDTA)脫礦(Merck，達姆施塔特，德國)，石蠟包埋(Merck)。使用切片機(Accu-Cut SRM, SAKURA, USA)垂直於牙槽突長軸進行切片，以獲得5微米厚的切片，並將其安裝在先前的聚賴胺載玻片中。

每個標本用蘇木精-伊紅(H&E)染色製備玻片。用數碼相機(Axio Cam MRc5;Carl Zeiss do Brasil Ltda，裏約熱內盧de Janeiro, RJ, Brazil)與光學顯微鏡(Olympus CX21FS, Olympus Corporation, Tokyo, Japan)連接，放大倍率為1:100。對於免疫組化反應，用0.03%雙氧水阻斷，然後用一抗抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)(山羊抗陷阱polyclone - santa Cruz, CA, USA)和生物素化驢抗山羊抗體(BiotinSP-AffiniPure驢抗山羊IgG-Jackson免疫研究實驗室，West Grove, PA, USA)作為二抗;免疫組化反應信號用Avidin-Biotin係統(Kit ABC Vectastain Elite ABC, Vector實驗室，Burlingame, CA, USA)進行擴增，反應使用二氨基聯苯胺(da - sigma，聖路易斯，MO, USA)作為顯色劑。

另取切片進行免疫組化染色，檢測拔牙愈合過程中牙槽組織中TRAP蛋白的表達，再用Harris蘇木精反染。在常規光學顯微鏡下采用免疫染色法對牙槽骨進行評價。除一抗外，各標本均采用相同方法製備陰性對照。利用數碼相機(Axio Cam MRc5;卡爾蔡司巴西有限公司。，裏約熱內盧de Janeiro, RJ, Brazil)連接到光學顯微鏡(Olympus CX21FS, Olympus Corporation, Tokyo, Japan)，放大倍率為1:400。玻片由一位盲眼病理學家檢查。

結果以均數±標準差表示，研究組之間的統計學差異采用單因素方差分析(one-way ANOVA)，然後采用Tukey事後檢驗(post - hoc test)進行評估。所有分析均采用SPSS-20 (SPSS Inc.， Chicago, IL, USA)， P值小於0.05為顯著性。

結果

在整個研究期間，所有動物都能忍受實驗。各組間行為、體重差異無統計學意義(P>0.05)。

各組成骨細胞數量、破骨細胞數量及牙槽新骨形成的比較結果如圖1、2所示。結果顯示，對照組第7天成骨細胞數量顯著高於雙氯芬酸組和塞來昔布組(P<0.05);但在第14天和第21天，各組間差異無統計學意義(P>0.05)(圖1)。第7天和第14天，各組間trap陽性破骨細胞數量差異有統計學意義(P<0.05)。對照組14 d TRAP數量顯著高於雙氯芬酸組和塞來昔布組(P<0.05)。雖然對照組在第21天觀察到的破骨細胞數量比雙氯芬酸組和塞來昔布組多，但差異無統計學意義(P>0.05)(圖3)。在第7天，各組間新骨形成差異有統計學意義。雙氯芬酸組和塞來昔布組在7 d時新骨生長顯著低於對照組(P<0.05)，但雙氯芬酸組和塞來昔布組之間差異不顯著(P>0.05)。第14、21天，各組新骨形成情況相似，各組間差異無統計學意義(P>0.05)(圖3、4)。

圖1:三組成骨細胞數量。

圖2:三組均有新骨形成。

圖3:三組中trap陽性破骨細胞數量。

圖4:7歲時新骨形成^th, 14^th和21^聖對照組、雙氯芬酸組和塞來昔布組拔牙後天數。

討論

牙槽愈合為研究骨形成提供了合適的模型，可視為骨損傷和修複的敏感指標[13,14]。在不同的動物種類中，肺泡內愈合的過程是確定的[15,16]。簡而言之，拔牙後，牙槽內充滿了血凝塊，血凝塊逐漸被來自牙周韌帶殘餘物的毛細血管發芽和成纖維細胞侵入。依次為炎性細胞和血管數量減少，成骨細胞明顯，凝血逐漸被未成熟結締組織吸收取代。一種未成熟的骨基質，最初由成骨細胞合成，經鈣沉積進一步礦化為羥基磷灰石晶體牙槽骨從新側壁和根尖壁向中心方向形成，愈合過程以小梁骨填充牙槽為高潮[17,18]。

在這項研究中，觀察了對照組和用兩種不同類型的非甾體抗炎藥(雙氯芬酸和塞來昔布)治療的動物的肺泡窩愈合的組織學特征，並隨訪了21天。以往的大鼠研究表明，拔牙後第二周結束時礦物骨密度最大，骨形成比例最大[19,20]。本研究驗證了非甾體抗炎藥可能阻礙牙槽骨愈合的假說。我們的結果顯示，雙氯芬酸組和塞來昔布組第一周成骨細胞、trap陽性破骨細胞和新骨形成均低於對照組。對照組與研究組在成骨細胞、破骨細胞和骨形成方麵的差異在第一周有顯著性，到第三周結束時，三組在這些標準上無顯著性差異。結果表明，拔牙後短時間使用低劑量非甾體抗炎藥緩解疼痛可能會導致最初的愈合延遲，但對長期的骨愈合沒有重要的負麵影響。體內研究發現NSAIDs對骨折愈合有類似的損害，主要是在愈合的早期[21,22]。

破骨細胞與巨噬細胞的區別在於其細胞質中存在TRAP。這種v型酸性磷酸酶同工酶在破骨細胞中表現出強烈的活性，被認為是破骨細胞的特定標記物。組織學分析是鑒別破骨細胞和分析破骨細胞動態的有效方法。TRAP是破骨細胞的細胞化學標誌物[23]。在我們的研究中，雙氯芬酸鈉的碎屑活性較低，TRAP表達較低。該藥還導致提取後3周TRAP表達降低;尤其是頭七天。組織學觀察也證實了碎屑細胞的存在。塞來昔布降低了碎屑活性，尤其是在第二周。其他研究表明塞來昔布和雙氯芬酸可減少破骨細胞的形成在體外(11日,24日,25)。他們還表明，非甾體抗炎藥在早期階段就抑製了大鼠成骨細胞的數量[26,27]。

傳統非甾體抗炎藥對COX-1和COX-2酶的非選擇性抑製已證明幹擾長骨骨折愈合和脊柱融合率，但也觀察到沒有這種有害影響。幾項研究評估了非甾體抗炎藥選擇性抑製COX-2的效果，但結果是模棱兩可的，盡管COX-2和前列腺素E2對骨形成的重要性是眾所周知的。

COX抑製對牙槽骨愈合的影響很小。也有報道稱，雙氯芬酸在大鼠體內的短期治療(4天)延緩了牙槽骨愈合[28]，而其他研究表明非甾體抗炎藥不會阻礙牙槽骨愈合[27]。很少有研究使用非甾體抗炎藥來控製移除阻生第三磨牙後的水腫和疼痛，通常是指短期給藥。一些作者報道，服用阿司匹林、雙氯芬酸、布洛芬和氟比洛芬後，骨愈合率無顯著差異[9,29,30]。

雙氯芬酸和塞來昔布對牙槽骨窩愈合的不利影響在本研究中尚未建立。COX抑製劑對骨愈合影響的實驗結果存在差異，原因可能有治療時間和劑量，年齡、對藥物敏感性的種內和種間差異、藥物的藥代動力學、代償性局部和全身因素、骨重塑率等[319,32]。

結論

目前的結果證明雙氯芬酸和塞來昔布對牙槽骨愈合沒有明顯的幹擾。此外，在多種實驗模型中進行的額外研究明確證實或解除了該藥物在治療持續時間和劑量方麵對新骨形成的幹擾。

鳴謝

我們感謝口腔頜麵醫學係和Torabinejad牙科研究中心，伊斯法罕醫學科學大學牙科學院，伊斯法罕對本研究的財政支持

利益衝突

作者與其他個人或組織沒有財務或個人關係，可能不恰當地影響或偏向這篇論文。

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條信息

文章類型:研究文章

引用:Hajisadeghi S, Sardari F, Sadeghi M, Razavi SM, Roberts MW(2018)雙氯芬酸鈉和塞來昔布對牙槽愈合的影響比較。對老鼠的研究。中國外科雜誌4(2):dx.doi.org/10.16966/2470-0991.170

版權:©2018 Hajisadeghi S, et al。這是一篇開放獲取的文章，根據創作共用署名許可的條款發布，允許在任何媒介上不受限製地使用、分發和複製，前提是要注明原作者和來源。

出版的曆史:

收到日期:2018年6月26日

接受日期:2018年7月4日

發表日期:2018年7月10日