摘要

本研究的目的是探討骨肉瘤的愈合潛力木香之後大鼠皮膚傷口的莖汁液。25隻成年雌性白化大鼠，體重在243-320g之間。他們被平均分為5組。氯胺酮麻醉大鼠背部無菌損傷。立即止血，按大鼠分組治療。A組傷口不予處理，B組隻在第1天加碘治療，C組用碘軟膏治療7天，D組隻在第1天加碘治療木香之後E組患者治療7 d木香之後莖汁提取。觀察35d，觀察完全愈合。每隻動物傷口愈合所需的時間以天為單位記錄，並使用SPSS . 20進行方差分析。完全愈合後，取愈合組織切片進行H&E染色。在愈合過程中，觀察到用木香之後莖汁液雖然對外界環境開放，但仍能保持傷口環境的濕潤而無感染。D組僅治療第1天愈合時間明顯縮短(p<0.05)木香之後莖汁提取。D組和E組的H&E切片顯示真皮纖維隨機排列木香之後莖汁提取。D組在治療第一天也有毛囊生長的跡象木香之後閥杆。總之,木香之後與碘治療相比，莖汁液能保持傷口環境的濕潤，愈合效果更好。

關鍵字

潮濕的傷口愈合;木香之後閥杆;皮膚的再生;真皮組織

簡介

傷口愈合過程涉及複雜的細胞和生化機製，旨在恢複結構和功能的完整性，恢複受傷組織或器官的力量。它是由細胞-細胞和細胞基質相互作用引起的，這種相互作用通過炎症、增殖和組織重塑三個重疊階段發出信號[1,2]。

與幹燥的傷口相比，濕潤的傷口愈合過程明顯增強。在潮濕的傷口中，生長因子的可用性得到了提高，細胞遷移的速度也增強了[3-6]。濕潤的傷口環境通過隔離和保護神經末梢，加強了傷口的無痛清創。此外，它還提供了減少疤痕形成的生理環境，有利於組織再生[4,7]。因此，有人建議，理想的傷口處理應旨在保持濕潤的傷口環境，同時限製液體流失，保護傷口免受進一步損傷，清除壞死碎片，促進肉芽組織形成，緩解疼痛，保護傷口免受細菌汙染[3,6,7]。

開放性濕性傷口的主要問題是周圍組織的脫水和傷口微生物汙染的可能性。這導致使用閉塞和半閉塞敷料來保持傷口的水分，同時限製組織液的蒸發[3,7,8]。然而，閉塞性敷料已被發現會積聚液體並促進傷口部位的細菌生長。封閉敷料的去除對新生表皮的損傷和屏障功能恢複無效。另一方麵，半閉塞敷料已被發現可為愈合過程的正常進行提供所需的水分，而無需微生物生長[9,10]。根據Korting和他的同事[6]，保持傷口環境濕潤的局部治療可能為輕微皮膚傷口提供最理想的治療方法。這些治療方法可以定期評估傷口，而不會損害傷口床的風險，這是正確的傷口管理所需要的[3,11]。一些凝膠化合物，如水膠體敷料和海藻酸鈣已成功用於傷口管理，以保持濕潤的傷口環境[7,9]。然而，這些產品在當地衛生設施中既昂貴又稀缺。

研究表明，植物在傷口處理方麵有巨大的潛力。它們已被證明可以抗感染、加速愈合和誘導受損組織再生。木香之後莖是傳統上用來治療傷口[13]。科學研究表明，它含有生物分子和礦物質，已被發現能顯著促進傷口愈合[14,15]。因此，本研究的目的是為了研究其傷口愈合效果木香之後白化病成年大鼠皮膚傷口的莖汁液提取。

方法

研究設計和倫理批準

本研究在尼日利亞烏約大學解剖係實驗實驗室進行。實驗共分為5組:對照組、2個實驗組和2個標準組。所有動物均采用背側傷，建立切除創麵模型。對照組不進行任何治療，試驗組隻在第一天進行治療木香之後對照組為枸杞莖汁液提取物，對照組為枸杞莖汁液提取物木香之後莖汁提取。標準組給予碘軟膏治療，1組僅治療1天，另1組治療7天。該研究獲得了尼日利亞烏約大學基礎醫學院倫理委員會的倫理批準。

植物提取物的收集和製備

的木香之後該植物在宇代大學藥學院生藥學係植物標本室進行鑒定和注冊，編號為UUPH26(a)，由植物分類學家識別。這種野生植物於2017年2月從尼日利亞阿卡瓦伊博姆州烏約的灌木叢中收集到。植物莖用流水洗淨，切成片，用攪拌機碾碎(NAKAI-Japan;人力資源- 2818)。將混合後的產品在棋盤布中擠壓得到果汁，濾液在置於40°C水浴中的燒杯中濃縮。

試驗協議

共25隻成年雌性白化大鼠，體重在243-320g之間，用於[17]研究。設備和實驗室房間在消毒溶液中浸泡一夜，並用肥皂水進行無菌清洗。老鼠是在殺菌蒸汽從房間的空氣中完全消散後才被帶進來的。將大鼠平均分為A、B、C、D、E 5組(表1)。將大鼠單獨飼養在溫度22-26℃、濕度50-60%、光照12小時/暗12小時的橡膠籠中，喂食標準大鼠顆粒飼料(Vital Feed Growers, Green Cereals Nigeria Ltd.)和自由取水。適應一周後，所有大鼠均采用背傷治療，按組治療。根據國家更換、改良和減少研究動物中心[18]，以及國家衛生研究所(NIH) 1996年修訂的第85(23)號出版物頒布和通過的國際公認的護理和使用實驗動物標準指南以及相關的倫理和條例，對它們的體重和壓力指標進行定期評估，以密切監測它們的健康狀況。大鼠受傷後進行相應的治療(表1)，觀察35天，期間所有傷口完全愈合。

集團	數量	治療
一個	5	控製
B	5	碘軟膏1天
C	5	碘軟膏7天
D	5	Costusafer粘貼1天
E	5	Costusafer粘貼7天

表1:實驗小組。

中位致死劑量(LD₅₀)在莖汁液提取後

LD的₅₀根據OECD[19]，采用上下法計算。試驗使用健康成年雌性白化小鼠。小鼠被安置在室溫22-26°C、濕度50-60%、光照12小時、光照12小時的籠子裏。它們被喂食傳統的齧齒類實驗室飼料(Vital Feed Growers, Green cereal Nigeria Ltd.)，並無限製地提供水。適應5 d後，退飼4 h，測定禁食體重。以5000mg/kg體重為限劑量灌胃小鼠，觀察48h。由於未觀察到副作用，另外4隻小鼠按順序給藥，並觀察48小時。LD的₅₀被認為高於5000mg/kg體重，因為研究動物沒有死亡或副作用的記錄。

植物化學的分析

對提取液的一部分進行植物成分分析。根據Ekwueme et al.[20]的程序對皂苷、生物堿、三萜、單寧、黃酮、酚和氰化物進行定性分析。火焰光度法用於測定鉀的存在，而鈣、鎂、銅、錳和磷則采用Vogel[21]描述的原子吸收光譜法(AAS)進行檢測。

傷口創造

創麵手術過程采用高無菌技術。所有手術器械在138°C高壓滅菌30分鍾。在整個損傷過程中，使用鹽酸氯胺酮(由Jawa國際尼日利亞有限公司生產的Ketanir)以120mg/kg b.w.i.p麻醉大鼠。使用電動剪刀(型號GM-3005)刮背。用殺菌劑和甲基化靈清潔剃須部位後，1.5 × 1.5cm²用亞甲藍標記為損傷部位，手術部位覆蓋。用手術刀片、剪刀和鑷子從靶區切除全層方形創麵，用無菌紗布對創麵加壓止血。

治療傷口

A組傷口自然愈合，無需治療。B組和C組大鼠分別於第1天和第7天給予0.2ml 5%w/w濃度的聚維酮碘定軟膏(Jawa International Nigeria Limited)。半液體濃度的4g/ml溶液木香之後D組和E組創麵均用水提液處理，每次0.2ml。D組創麵第1天僅用膏體浸膏治療，E組創麵第1天用膏體治療木香之後每天粘貼，持續7天(表1)。

恢複時間

記錄每隻動物傷口完全愈合所需的時間，並對每組進行統計分析。

組織學研究

當創麵未見明顯血管時，認為創麵已完全愈合。在完整的愈合;每隻大鼠在幹燥器罐中吸入氯仿進行安樂死。從傷口部位收集組織樣本，按照Bancroft和Layton[22]中描述的方法進行蘇木精和伊紅染色。

數據分析

從不同組動物收集的數據用均數±標準差表示。采用SPSS(20版)分析，采用方差分析與Tukey’s和Dunnett’s事後檢驗(p<0.05)的顯著性水平。

結果

的中位致死劑量(LD50)木香之後莖汁提取

LD的₅₀的提取物被發現高於5000mg/kg體重。

植物化學的分析

植物化學分析表明木香之後莖汁提取物中含有促進傷口愈合的生物分子，如生物堿、皂苷、黃酮類、三萜、醌類、木酚素和二苯乙烯(表2)。生物礦物質包括鉀、鈉、鈣、鎂、銅、錳、磷和鉀(表3)。

測試	強度
皂苷	+++
生物堿	+++
丹寧酸	-
類黃酮	++
苯酚	-
萜烯(三萜烯)	++
醌類	+
木酚素	+++
對稱二苯代乙烯	++

表2:植物成份的木香之後莖汁提取。

礦物	檢測
鈉	+
鈣	+++
鎂	+++
銅	+
錳	+
磷	++
鉀	+++

表3:礦物含量木香之後莖汁提取。

傷口網站外觀

研究結果表明木香之後莖汁液增強了愈合過程。研究還發現，盡管傷口暴露在大氣中，提取液仍能保持濕潤的愈合環境，沒有任何感染的臨床跡象(圖1-3)。然而，E組用果汁提取物治療7天的傷口形成了一個厚而硬的結痂，結痂下的傷口部位形成了纖維組織(圖1,2)。痂脫落後，纖維組織被吸收，在潮濕的環境中愈合過程有效進行(圖3)木香之後莖果汁提取物的體重增加最高，但各組之間沒有顯著差異(表4)。

圖1:結痂脫落後，E組創麵形成一個開放的濕創麵。紅色箭頭顯示結痂下形成的纖維組織。

圖2:敷於傷口部位後，從傷口處形成厚痂(紅色箭頭)。

圖3:答:傷口未治療的第5天顯示傷口表麵幹燥。

圖3:B:第5天，隻在第一天用碘藥膏治療，顯示傷口表麵幹燥。

圖3:C:用碘藥膏治療7天的傷口第5天，傷口表麵幹燥。

圖3:D:第一天治療的瘡痂脫落後第5天木香之後莖汁提取。傷口表麵是濕潤的，已經愈合。

圖3:E:第5天，第一天治療的瘡痂脫落後木香之後莖汁提取。傷口表麵濕潤，上皮組織從邊緣向前推進。

組	數量	最初的重量 (g)	最終的重量 (g)	改變重量 （％）
一個	5	280±4.9	313±8.7	18.4±4.03
B	5	278±14.1	307±18.2	16.6±2.79
C	5	268±21.6	294±24.1	16.0±4.06
D	5	288±9.6	325±11.2	20.0±2.00
E	5	272±13.4	304±21.0	18.8±4.81
假定值				0.991

表4:大鼠體重變化百分比。

恢複時間

傷口完全愈合所需的時間木香之後治療組在痂痂脫落後計算。當與其他組進行分析時，發現愈合時間明顯縮短木香之後處理過的傷口(圖4和表5)。

圖4:每個實驗組的傷口完全愈合所需的時間。a,b:不同標注的條形圖差異顯著(方差分析采用SPSS . 20;p = 0.00)。

集團	不。	天±SD
一個	5	22.4±2.07
B	5	17.4±2.60
C	5	21.2±3.89
D	5	9.4±2.30
E	5	18.0±4.74

表5:各組間傷口愈合時間。

組織學研究

紅細胞切片和伊紅切片顯示真皮纖維組織緊密而隨機木香之後治療組組織結構與正常未損傷組織相似(圖5-7)。D組毛囊發育明顯木香之後隻在第一天提取幹汁。A組、B組和C組表皮平麵內纖維呈籃狀組織(圖8-10)。

圖5:正常的真皮組織，膠原纖維(黑色箭頭)從正常的未受傷的皮膚隨機組織。毛發纖維清晰可見(藍色箭頭)(H&E × 100)。

圖6:D組真皮組織愈合，用木香之後隻在第一天提取。束粗，緊，隨機組織(黑色箭頭)。還有生長的毛囊(藍色箭頭)。(圓)×100)。

圖7:E組真皮組織愈合，用木香之後提取七天。纖維粗大且組織隨機(箭頭)(H&E × 100)。

圖8:愈合真皮組織，膠原纖維呈平麵方向(箭頭)，來自對照組(A組)。纖維薄，平行排列，交聯少(H&E × 100)。

圖9:B組真皮組織愈合，膠原纖維呈籃狀，第一天僅用碘軟膏治療。纖維很薄(黑色箭頭)，有交聯(紅色箭頭)，鬆散地與寬闊的空間交錯(藍色箭頭)(H&E × 100)。

圖10:C組真皮組織愈合，用碘軟膏治療7 d。纖維很輕，並且在平行方向上緊密排列(黑色箭頭)。交聯更少(藍色箭頭)(H&E × 100)。

討論

木香之後莖傳統上被用於治療一些疾病，包括皮膚病，性病和絞痛。其莖煎劑被廣泛用於治療各種眼病、風濕、咳嗽、咽痛和其他呼吸係統疾病。樹液可用於治療瘧疾、黃疸和防止流產[13,24,25]。當用於治療傷口時，據說樹液在開放的傷口上燃燒，具有鎮痛和愈合作用[13,23]。科學調查表明，莖提取物木香之後具有顯著的體外抗菌、抗真菌和殺阿米巴活性[24,26,27]。它的抗接種和抗氧化性能也有報道[14,28]。據報道，莖提取物還可以調節血脂，逆轉酒精誘導的肝硬化，緩解肝髒氧化應激和毒性[29,30]。由於其抑製α-澱粉酶和α-葡萄糖苷酶活性[31]的能力，它也被報道為一種有前途的治療糖尿病的藥物。

LD的結果₅₀這項研究表明木香之後按照研究中使用的劑量，莖汁液可以被認為是安全的。這與之前的研究一致，報告LD₅₀木香莖提取物的含量大於5000mg/kg體重，長期食用對人體主要組織器官無明顯毒性作用[16,32]。

的能力木香之後莖汁提取物能排出豐富的滲出物，保持傷口表麵開放濕潤，這可能歸功於它的生物分子和礦物成分。植物提取物中富含的生物堿和類黃酮被發現是有效的血管擴張劑[33]。這一特性可能有助於在新鮮塗抹時大量提取組織液，並在大部分愈合過程中保持傷口環境濕潤。木酚素是已知的血小板抑製劑，它的存在可能也有助於這一過程，通過抑製血栓形成[34]。這可以通過觀察到最初的結痂似乎是幹燥的殘留物來進一步解釋木香之後莖汁提取液，隨著提取液的增加而變稠。

此外，提取物的礦物成分可能提供了有利於提取組織液和維持濕潤傷口環境的離子環境。鈉可能增加了傷口環境的滲透壓，從而從周圍組織吸取液體。滲出液的流動可能被限製在通過鉀和磷調節液體和酸堿平衡的作用來維持濕潤的傷口環境[36,37]。用鎂控製血壓和血管收縮可以抵消木酚素和生物堿的可能作用，提供最佳的濕潤傷口環境，促進傷口愈合[38,39]。

開放性濕性創麵無感染可能是由於生物堿、類黃酮、木酚素、二苯乙烯、醌類和三萜的活性。據報道，這些分子中的每一個都對傷口具有抗炎、抗菌和抗氧化的特性[34,40-42]。這些特性也可能是由於附著的厚痂和結痂脫落後形成的纖維組織吸收而導致炎症減少的原因。據報道，銅在免疫反應和吞噬過程中發揮作用，這可能也暗示了這一過程[43]。

潮濕的傷口環境已被證明是理想傷口管理的最佳要求。研究發現，與幹燥的創麵相比，它可以通過保存創麵部位的生長因子和酶，並加快細胞遷移速度，從而顯著促進愈合過程[3,4,6]。這一過程可能導致D組觀察到的愈合時間明顯較低，僅在第一天治療木香之後粘貼。即使有纖維組織形成的並發症，E組治療7 d木香之後貼敷後，愈合時間不顯著高於其他組。由於對環境開放，大氣中的氧氣被吸收到潮濕的傷口表麵。從而為傷口細胞提供額外的氧氣來源，特別是成纖維細胞和中性粒細胞，它們的活動高度依賴氧氣[8,10,44]。開放的潮濕傷口提供的高氧張力可能通過促進中性粒細胞和巨噬細胞的活性，同時抑製成纖維細胞的活性和增殖，增強了完整痂下形成的初始纖維組織的吸收，使其達到不完全損害愈合過程的水平[2,45]。這可能有利於促進動脈供氧受損傷口的愈合，如糖尿病足潰瘍[8,10]。

第一次使用提取物時，傷口滲出液的大量流動有助於縮短愈合時間，將傷口細胞和分子帶到傷口部位，從而繞過細胞的遷移時間，啟動立即的愈合活動[4,10]。而且，開放潮濕的傷口從木香之後治療似乎已經控製了脫水，因為兩組之間的體重變化百分比沒有顯著差異，傷口周圍的組織似乎是活的，大鼠在整個實驗過程中都保持活躍。據我們所知，這是唯一一項報告用植物材料處理傷口時潮濕傷口環境發生率的研究。

的再生效果木香之後莖汁液的治療結果證明。D組和E組給予木香之後與正常無損傷組織一樣，莖提取物具有隨機組織的真皮纖維，這是真皮再生的一個特征。另外，出現毛囊的D組，隻在治療第一天用木香之後糊狀，也表明了木香樹在榨汁後的再生能力[47,48]。

然而，濕的傷口環境對愈合過程的影響可能是由於提取物中促進愈合的分子和礦物質的存在而增強的。有研究表明，生物堿和醌類藥物可增加再生上皮化率，從而縮短愈合時間。在用這些分子處理的傷口和用三萜處理的傷口中，也觀察到真皮中膠原纖維的高度沉積和組織[40,41,49-52]。的presence of calcium, magnesium, copper, potassium, phosphorus and manganese in the extract may act to regulate the activities of enzymes and growth factors in the wound environment. Copper has been reported to significantly enhance angiogenesis, re-epithelialization, and collagen organization [38,43,53- 56]. However, its effectiveness in enhancing the healing process may also be due to its effects at the nuclear or molecular level which is not investigated in this study.

建議E組治療7 d後愈合時間延遲木香之後莖汁液的提取是由於侵入性纖維組織的發展，加深了損傷程度。因此，在結痂脫落和停止治療時，愈合過程必須從纖維組織的吸收和浸潤組織的再生開始，從而延長愈合時間。E組中導致侵入性纖維組織形成的並發症，可能是由於提取物的化學成分的過度活性，而這些化學成分可能是在每日使用提取物時過量提供的。假設是，提取液對組織液的持續提取對周圍的細胞和組織造成了傷害，這些細胞和組織試圖通過形成劃界的纖維組織來保護自己，以修複和封閉損傷。具有諷刺意味的是，提取物還含有分子和礦物質，如銅、生物堿、醌、木酚素和錳，它們促進纖維組織的形成，從而加強侵入深層組織的過程。這一假設是根據觀察得出的:纖維性侵襲的過程在治療停止後消退，當結痂脫落，留下一個開放的濕潤傷口時，愈合過程逐漸從皮膚的修複轉移到再生。此外，D組未觀察到這種纖維組織，僅在第一天治療木香之後粘貼。因此，用一點點的精煉來木香之後莖汁液，它可能是一個理想的外用治療管理皮膚傷口[6]。

結論

這項研究的結果表明，用木香之後在大部分的愈合過程中，莖汁液提供了一個開放潮濕的傷口環境。這種成分，再加上其分子和礦物成分的傷口愈合特性，推動愈合過程朝著皮膚組織更快再生的方向發展，這體現在愈合時間的縮短、愈合組織中的真皮組織和毛囊的發育。莖汁液提取後的Costus能夠保持開放濕潤的傷口而不感染，這是值得注意的，因為它可以為傷口愈合提供理想的局部治療。

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條信息

Aritcle類型:研究文章

引用:Udoh KP, Ekanem AU, Peter AI(2018)調查傷口愈合潛力木香之後(Ker Gawl)白化大鼠皮膚傷口的幹汁。細胞幹細胞再生醫學3(2):dx.doi。org/10.16966/2472 - 6990.118

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出版的曆史:

收到日期:2018年3月27日

接受日期:2018年6月26日

發表日期:2018年7月02