摘要

背景/目的:肉製品是人類消費中最有價值的食品之一。然而，肉製品也可能成為食源性病原體的來源，包括對公共衛生問題造成嚴重威脅的氣單胞菌。本研究旨在研究從埃及肉製品分離的氣單胞菌的流行情況和毒力特征。

方法:從El Menofiya省和開羅省的不同商店和超市收集了180個肉糜、牛肉漢堡、肉丸和香腸(各45個)的肉製品隨機樣本，以檢測航空單胞酶的流行情況，並進行細菌學和生物化學檢查。采用多重PCR方法對嗜水氣單胞菌分離株中的毒力相關基因進行檢測。

結果:結果顯示，肉糜、牛肉漢堡、肉丸和香腸中氣單胞菌的感染率分別為26.6%(12)、15.5%(7)、24.4%(11)和17.5%(8)。最常見的氣單胞酶可鑒定為A. hydroic,A. alcaligenes,A。豚鼠、豚鼠和維羅尼豚鼠。嗜水弧菌16S rRNA基因特異性分離菌株38株，其中溶血素(aerA)陽性菌株24株，溶血素(ahhl)陽性菌株21株，陽性率分別為63.1%和55.2%。

結論:由於氣單胞菌具有產生毒素的能力、低溫下的生存能力和廣泛的生長環境，因此有必要給予更多的關注。因此，應采取衛生措施控製細菌汙染。

簡介

肉糜、牛肉漢堡、肉丸和香腸等肉製品因其營養價值高、價格公道、味道好、烹調方便、上菜方便，被認為比鮮肉更吸引消費者。有人擔心肉製品對消費者的重要性，但肉製品可能被幾種食源微生物汙染，由於濕度高，含氮化合物比例高，礦物質供應充足，一些可發酵的碳水化合物(糖原)和對大多數微生物有利的pH值，它們被視為許多微生物生長的完美培養基[1]。

氣單胞菌被認為是免疫正常人和免疫障礙者的主要病原和條件致病菌[2]。氣單胞菌是腸道和腸道外感染的原因[3]。五個氣單胞菌屬代表為嗜水氣單胞菌，豚鼠氣單胞菌，維羅納氣單胞菌，簡代氣單胞菌,氣單胞菌屬schubertii通常與人類腸道感染有關[2]。

氣單胞菌感染的發病機製是多因素的，尚未完全了解。在各種氣單胞菌中已分離出一係列在感染發展中起關鍵作用的毒力因子，如腸毒素、溶血素、細胞毒素和溶血素[4]。

這些細菌能夠在5°C的環境下很好地生存，這可以表明它們對公眾健康有潛在的風險。空氣溶菌素已被測試為一種毒力因子，涉及的發病機製答:Hydrophila[5]，在這種溫度下，對於冷藏並有較長有效期的生食品可能是必要的。還應持續監測食品中的氣單胞菌種，因為它們可能是食源性感染[6]的來源。

考慮到所有這些危害，本研究計劃檢查一些肉製品氣單胞菌的流行和特性。

材料和方法

收集的樣本

用無菌塑料袋從Menofiya省和開羅省不同時期的不同商店和超市收集了共180個肉糜、牛肉漢堡、肉丸和香腸等肉製品樣品(各45個)。所有收集的樣品均以最快的速度進行細菌學檢測，以確定其是否受氣單胞菌汙染，並使用PCR技術[7]檢測其毒力因子。

細菌檢驗

樣品製備[8]:在完全無菌條件下，稱量25克樣品，並將其轉移到裝有225毫升無菌蛋白腖水(0.1%)的無菌勻漿瓶中。燒瓶的內容均質在14000 rpm下3分鍾，然後在室溫下靜置5分鍾。從勻漿中取一毫升轉移到另一個裝有9毫升無菌蛋白腖水(0.1%)的單獨試管中，從中製備10倍連續稀釋劑。製備的樣品進行了下列檢查。

氣單胞菌計數[9]的測定

氣單胞菌瓊脂培養基強烈推薦用於氣單胞菌種的選擇性分離。從原來的稀釋液中取0.1 ml，在添加氨苄西林的氣單胞菌瓊脂(Oxoid)上條帶，在35°C孵育24小時。疑似菌落為深綠色，不透明，中心較暗，直徑0.5-1.5 mm。根據菌落形態和氧化酶試驗(Oxoid)對氣單胞菌進行初步鑒定。氣單胞菌的顯微和生化鑒定[10]。

聚合酶鏈式反應(PCR)

基因組DNA提取:使用基因JET基因組DNA純化試劑盒。DNA擴增產物“PCR主混合”(Fermentis)。

凝膠Elecrophoresis:Sambrook J，等。[11]。

目標基因	引物	寡核苷酸序列(5 '→3 ')	產品尺寸(bp)	參考
aerA	AH-aerA (F)	5 ' CAAGAACAAGTTCAAGTGGCCA 3 '	309	策略D等。[12]
	AH-aerA(右)	5 'acgaaggtgtggttccagt 3 '
ahh1	AHH1 (F)	5 'gccgagcgcccagaaggtgagtt 3 '	130
	AHH1 (右)	5 'gagcggctggatgcggttgt 3 '

引物序列答:hydrophila用於聚合酶鏈反應(PCR)係統的分子鑒定:菌的溶血素(aerA)和溶血素(ahh1)毒力基因答:hydrophila主要通過使用以下引物來完成。

結果與討論

肉糜、牛肉漢堡、肉丸和香腸等肉製品因其營養價值高、價格合理、口感好、製備快、食用方便等優點，比鮮肉需求量大，但在加工、製備和加工過程中，它們可能受到來自不同來源的幾種食源性微生物的汙染。

氣單胞菌被認為是潛在的食源性病原體已超過20年。這種細菌可以引起自限性腹瀉，主要發生在兒童身上。氣單胞菌對食品加工沒有抵抗力，很容易通過[13]熱處理殺死。

表1的結果顯示，檢測的肉糜中氣單胞菌的發生率為(26.6%)，Yucel N等[14]分離出的氣單胞菌的發生率為40% (67.7%)，Neyts K等[15]分離出的氣單胞菌的發生率為(70%)，而檢測的牛肉漢堡中為(15.5%)。相比而言，Kingombe CIB等人的[16]分離出的Aeromonase的百分比為(32.3%)。Rather MA等人的[17]分離出的Aeromonase的百分比為(19.3%)，而在檢測的kofta中，Villari分離出的Aeromonase spp的百分比為(14.4%)，其分離率較低(24.4%)。Elmanama AA等人報告的最後一根被檢測的香腸的檢出率較低(17.5%)。[18]分離出航空單胞酶的百分率為(48.9%)，並與Fontes MC等人一致。[19]檢測出84株Aeromonase spp．在32個香腸樣本中。

肉類產品	不。倉庫的樣品	沒有	％
切碎的肉	45	12	26.6
牛肉漢堡	45	7	15.5
肉丸	45	11	24.4
香腸	45	8	17.7
總計	180	38	21.1

表1:肉製品檢驗樣品中氣單胞菌的發生率(n=45)。

結果表明，作為假單胞菌、氣單胞菌等多種微生物理想生長培養基的香腸汙染最嚴重，導致其變質、經濟損失、食源性感染和健康風險[20]。

肉類產品可能受到來自肉類加工人員的微生物汙染，這些微生物在生產、包裝和銷售過程中攜帶致病微生物。食源性病原體是發展中國家疾病和死亡的主要原因，造成數十億美元的醫療保健、醫療和社會成本[21]。

表2的結果顯示，檢測的肉末樣品中鑒定出的氣單胞酶種類的發生率為答:hydrophila13.3%,答:產堿杆菌屬4.4%,豚鼠4.4%,答:sobria2.2%,答:Veronii2.2%這些結果與Neyts K等人[15]分離的結果一致嗜水藻，嗜酒藻而且豚鼠．Yucel N，等人[14]誰孤立(嗜水蟲，豚鼠而且答:sobria)，而被檢測的牛肉漢堡樣品中含有答:hydrophila8.8%,答:產堿杆菌屬2.2%,豚鼠2.2%,答:sobria2.2%這些結果較低，與Manna SK等分離的[22]一致氣單胞菌屬hydrophila(43.2%),氣單胞菌屬caviae(12.2%)和氣單胞菌屬sobria(12.2%)，而在檢查的肉丸答:hydrophila15.5%,答:alcaligenese2.2%,豚鼠4.4%,答:sobria2.2%這些結果與stratv D等[23,12]分離的結果一致嗜水氣單胞菌，空腔氣單胞菌而且氣單胞菌屬sobria．最後一根檢查過的香腸答:hydrophila6.6%,答:產堿杆菌屬4.4%,豚鼠2.2%,答:sobria2.2%,答:veronii2.2%。這些結果與Elmanama AA等人[18]分離的結果一致答:hydrophila與食物樣品中的發病率(48.9%)一致，與Osman K等人[24]分離的結果一致。氣單胞菌屬Hydrophila被隔離為最流行的物種，其次是氣單胞菌屬caviae而且氣單胞菌屬sobria．

肉類產品Areomonas菌株	切碎的肉		牛肉漢堡		牛肉丸		牛肉香腸
	不。	％	不。	％	不。	％	不。	％
答:hydrophila	6	13.3	4	8.8	7	15.5	3.	6.6
答:產堿杆菌屬	2	4.4	1	2．2	1	2．2	2	4.4
豚鼠	2	4.4	1	2．2	2	4.4	1	2．2
答:sobria	1	2．2	1	2．2	1	2．2	1	2．2
答:veronii	1	2．2	0	0	0	0	1	2．2
總計	12	26.6	7	15.5	11	24.4	8	17.7

表2:肉製品檢驗樣品中鑒定的氣單胞菌的發生率(n=45)。

表3和圖1的結果顯示答:hydrophila從肉製品檢驗樣品中分離出菌株。經PCR分析，溶氣素基因(aerA)陽性率為63.1%，溶血素基因(ahhl)陽性率為55.2%，溶氣素基因(aerA)與溶血素基因(ahhl)陽性率為50%，結果與Yucel N等[14]的研究結果一致答:hydrophila有溶血素、氣溶素、蛋白酶、脂肪酶、脫氧核糖核酸酶等毒力因子，不同意Galindo CL等[25]檢測嗜水氣單胞杆菌中細胞毒性腸毒素、Act基因。Osman K等人[24]在3/17菌株中檢測到溶氣素毒素基因(aerA)答:hydrophila和Praveen PK等人[5]，他們檢測到aerolysin是一種致病的毒力因子，有助於發病氣單胞菌屬hydrophila感染。目前的研究結果表明，結合使用基於pcr的毒力標記檢測、PCR-RFLP和PCR-ASA提供了一種快速、靈敏和特異的係統來評估病毒的存在和流行氣單胞菌屬spp．食物樣本中含有毒力標記[16]。

圖1:瓊脂糖凝膠電泳對aerA (309 bp)和ahhl (13 bp)基因進行多重PCR鑒定氣單胞菌屬hydrophila．
M道:100 bp階梯作為分子大小DNA標記。
Lane C:對照陽性嗜水菌a和ahhlgenes。
C道:控製陰性。
巷1、巷2、巷3、巷5:aera和ahhlgenes嗜水氣單胞菌陽性菌株。
Lane 4: ahhlgenes嗜水弧菌陽性菌株。

基因型	不。測試的壓力	積極的壓力
		沒有	％
aerA	38	24	63.1
Ahhl	38	21	55.2
aerA和Ahhl	38	19	50

表3:毒力基因的發生氣單胞菌屬hydrophila從肉製品檢驗樣品中分離出(n=38)。

結論

本研究結果表明，氣單胞菌在肉糜和肉丸中汙染最高，在香腸和漢堡中汙染最低，這可能是氣單胞菌從動物向人類傳播的主要來源。從食用受汙染的食物，另一種可能的食源性感染可能發生在攝入含有預先形成的外毒素的食物。隔離的答:hydrophilavirulence-associated基因。氣單胞菌可產生毒素，在低溫和廣譜環境下生長，應引起重視，在肉製品加工中應采取衛生措施控製微生物汙染。本研究的結果強調了在肉製品生產中需要有效的衛生和環境衛生程序，以減少氣單胞菌汙染的風險。

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條信息

文章類型:研究文章

引用:Elbayoumi ZH, Zahran RN, Shawish RR(2021)埃及部分肉製品中分離的氣單胞菌的流行和特征。Nutr Food technology開放訪問7(1):dx.doi.org/10.16966/2470-6086.170

版權:©2021 Elbayoumi ZH等人。這是一篇開放獲取的文章，根據創作共用署名許可協議(Creative Commons Attribution License)發布，該協議允許在任何媒體上不受限製地使用、分發和複製，前提是注明原作者和來源。

出版的曆史:

收到日期:08年3月2021

接受日期:2021年3月31日

發表日期:2021年4月16日,