摘要

禽肉經常被汙染彎曲杆菌菌株和被認為是引起人類的主要生物來源彎曲杆菌腸胃炎．進行這項研究是為了檢測彎曲杆菌spp．來自孟加拉國達卡市不同地區超市的生冷藏雞肉、雞腸、預熟冷凍雞塊和雞香腸。采用常規方法分離彎曲杆菌，每個樣品10g(雞腸除外)與90ml富集肉液均質，42℃微嗜氧條件下培養48小時。然後將樣品劃到Campylobacter木炭差異瓊脂基礎上，補充CCDA選擇性補充，在42°C的微嗜氧條件下孵育48小時。對於雞腸，從腸道內壁取棉簽，並直接在CCDA板上劃線。鏡檢，革蘭氏染色，生化試驗進行推定鑒定彎曲杆菌spp．結果顯示彎曲杆菌spp．可以在生雞肉、雞香腸和雞腸的各個部位找到，而雞塊則沒有彎曲杆菌spp．這一發現反映了在我們廚房準備食物時處理家禽時的交叉汙染風險。

關鍵字

食品安全;食品衛生;彎曲杆菌病;家禽;家禽產品

簡介

人類腸炎在發達國家和發展中國家主要是由彎曲杆菌spp．與c .空腸，屬於耐熱類群的最重要的致病菌株，被認為是全球食源性和水源性胃腸炎的主要原因[1]。空腸彎曲杆菌常被認為是彎曲杆菌病的病原體，通常從雞和牛中分離出來，雞被認為是主要的感染源之一。

全球禽肉和禽肉產品的消費和生產呈上升趨勢，原因有很多，包括其在食品製劑中的使用增加，強烈的消費者偏好，以及對成本合理的豐富蛋白質來源(20-23%)的巨大需求[2-4]。

彎曲杆菌作為一種共生微生物出現在家禽胃腸道的微生物區係中，因此它很可能發生在鳥類的外部以及來自生長環境的汙染。家禽的正常體溫會促進該微生物在胃腸道的建立，從而支持其較高的最佳生長溫度[5]。據報道彎曲杆菌人類感染通常與攝入處理不當或未煮熟的食物有關，主要是家禽產品[6]。

作為彎曲杆菌作為家禽胃腸道中的天然微生物菌群存在，屠宰後有可能傳播到家禽的屍體、部位和產品上。此外,c .空腸在改良氣氛和真空包裝中存活良好，在冷藏溫度下也能存活，這使得在處理和加工不良的包裝雞肉產品中可能發生這種情況。流行彎曲杆菌spp．在生家禽產品上的含量從0到100%不等，平均為62%。

這項研究的目的是評估的患病率彎曲杆菌。在冷凍條件下儲存的生雞肉(冷藏)、雞腸和包裝好的雞肉製品中。

材料與方法

樣品收集

在屠宰時:從廚房收集了一份雞腸，裝在無菌塑料袋裏，並盡快提交給實驗室。

在超級市場:從超市買了三包完整的不同品牌的冷凍預熟雞塊和雞肉香腸，並提交給實驗室。生的冷凍的碎雞肉被買回來，完好無損地裝在塑料袋裏送到實驗室。3.

媒體的準備

彎曲杆菌濃縮肉湯:25克在1升水中充分混合。在121°C下(在螺旋蓋瓶中)進行旋轉和高壓滅菌15分鍾。

濃縮和分離的程序

雞塊、雞腸及碎雞肉:取稱重後的樣品10克與90 ml彎曲杆菌富集肉液均質，42℃微嗜氧條件下孵育24小時。然後在CCDA(彎曲杆菌木炭差異瓊脂)上進行劃線，這對彎曲杆菌屬有選擇性，並在42°C的微嗜氧條件下培養48小時。觀察了板塊。對於雞腸，從結腸內壁取棉簽，直接在CCDA板上劃線。

試劑使用

使用的試劑列在附錄I和II中。

觀察與結果

培養48小時後觀察平板(圖1)。

圖1:彎曲杆菌菌落在CCDA板塊上

群體特征彎曲杆菌。在CCDA板上

對於雞肉香腸和生的冷凍肉末，發現有大量或中度的生長。菌落呈灰色，有光澤，呈圓形，呈隆起狀，質地呈乳白色。對於雞塊樣本，沒有發現生長。

形態和運動的顯微檢查

來自可疑菌落的物質懸浮在鹽水中，並通過光學顯微鏡評估其特征。螺旋或彎曲的細長杆與軟木塞一樣的運動被觀察到，但不是很清楚。較古老的文化表現出較少運動的球蟲形式。

革蘭氏染色法

對可疑菌落進行革蘭氏染色。都是革蘭氏陰性。

氧化酶試驗

氧化酶試劑(四甲基-對苯二胺二鹽酸鹽)取在濾紙上，放在培養皿中。濾紙用蒸餾水浸濕。在牙簽的幫助下從CCDA瓊脂上采摘菌落，並浸泡在氧化酶溶液區域。在10秒內出現藍色表示陽性結果。

過氧化氫酶試驗

從CCDA平板上取少量生長物(單個、離散菌落)置於幹淨的顯微鏡載玻片上。滴幾滴H₂O₂被添加到塗片中。它和一根牙簽混合在一起。結果表明，O₂氣泡就是明證。

海馬酸水解試驗

本試驗用於測定微生物在hippurate水解酶的作用下，是否能將hippurate鈉水解為苯甲酸和甘氨酸。用重接種劑(單菌落)接種0.4 ml海馬酸鈉溶液。它被旋渦震動了。37°C有氧孵育2小時。將0.2 ml茚三酮溶液沿側麵緩慢加入，形成覆蓋層。它不能被動搖。試管在37°C下孵育，並在10至20分鍾後檢查顏色變化。

出現深藍色或紫色表示積極的反應。無色的試管在hippurate水解試驗中顯示為陰性(表1)。

樣本	生長在42°C	氧化酶試驗	過氧化氫酶試驗	海馬酸水解試驗
雞塊
示例1	-	-	-	-
示例2	-	-	-	-
示例3	-	-	-	-
雞肉香腸
示例1	+	+	+	+
示例2	+	+	+	+
示例3	+	+	+	+
生的冷凍的碎雞肉	+	+	+	-
雞腸	+	+	+	+

表1:CCDA板菌落生化檢測結果

討論

在這項研究中，彎曲杆菌spp．從家禽和家禽產品中分離出來。在分離之前，對雞塊樣品、雞肉香腸樣品和冷藏生肉末樣品進行了富集，因為微生物可能由於冷藏而處於應激狀態。以雞腸道為例，從腸道內壁取下棉簽(因為它們是微嗜氧的，棉簽棒被推入內部)，並直接在選擇性介質上劃線。結果顯示，雞肉香腸、冷凍生肉末和雞腸含有彎曲杆菌spp．彎曲杆菌在雞塊樣品中不存在。所有的培養都在42°C進行，因為大多數病原體不能在這個溫度下生長，因此這裏的汙染風險很低。

的存在彎曲杆菌spp．在預先煮熟的冷凍家禽產品(雞香腸)表明處理不當。因為事實是彎曲杆菌在改良氣氛和真空包裝以及冷藏溫度下也能很好地存活，有可能發生在處理和加工不良的包裝雞肉產品中。食用未充分煮熟的冷凍家禽產品可能是引起食源性感染的原因。離開屠宰場的雞內髒被控製住了彎曲杆菌這表示在廚房處理家禽時存在交叉汙染的風險。由於雞的腸道，特別是盲腸和結腸可以容納大量的細菌彎曲杆菌作為共生菌群，在加工過程中，腸道可能泄漏或破裂，內容物轉移到胴體皮膚。因此，它很可能被發現彎曲杆菌如果發生汙染，在肉類(家禽胴體)中使用。不過，超級市場提供生雞肉儲存設施，並在冷藏或冷凍狀態下展示。這證明他們正在努力控製在這些場所出售的生雞肉的質量和安全。但通常情況下，如果雞肉的一部分受到了汙染，這種微生物就有可能蔓延到其他部位。因此，即使是雞肉的內部部分也受到了汙染，這並不令人驚訝，很可能是由於加工過程中的交叉汙染。

冰鮮肉樣本取自各超市，這些超市的雞肉都是在冷藏狀態下儲存和展示的。超市提供的雞肉通常在比菜市場更衛生的條件下出售，菜市場對儲存溫度有更好的控製。盡管超市裏的食品看起來更衛生，但包裝前的準備工作可能不衛生，包裝設施本身的條件也可能很差。

雞塊的缺失顯示彎曲杆菌微生物分離失敗可能是由於產品中含有高濃度的鹽和其他成分，或者雞塊經過了適當的處理過程。彎曲杆菌通常能在2.0%的鹽下存活。所以在這種情況下，樣本有可能被c .空腸但後來被鹽和香料的使用殺死了。另一個原因可能是它們在冷凍之前經曆了最少的烹飪過程。這可能降低了疾病發生的風險彎曲杆菌．

顯微鏡檢查和生化試驗進行推定鑒定彎曲杆菌海馬酸水解試驗，以區分c .空腸還有其他物種。除生冰鮮肉外，其餘樣品均為海馬酸鹽水解試驗陽性結果，可推斷c .空腸可能存在於香腸和雞腸中。其他物種如C. coli, C. lari, C. fetal, C. upsaliensis可能存在於生冰鮮肉中，因為它們不能水解hippurate。我們應該再次記住彎曲杆菌當物種鑒定是基於一個單一的表型性狀時，如hippurate的水解，有時可能會被錯誤分類。應進行分子分析以確認物種水平的鑒定。在一項研究中，有報道稱c .空腸在新鮮和冷藏生雞肉的各個部位都發現了c .空腸報告了對醃製生雞肉和冷凍雞肉製品[7]的分析。

結論

食用未完全煮熟的冷凍家禽產品，有可能感染由彎曲杆菌超市提供比菜市場更健康的環境存放冰鮮生雞肉，但包裝本身可能是汙染源。在廚房不當處理家禽可能導致交叉汙染Campylobcater作為家禽胃腸道的正常菌群存在。

參考文獻

1. 李誌強，李誌強，李誌強，李誌強(2008)空腸彎曲杆菌參與酸性pH和胃轉運反應的基因。應用環境微生物學74:1583-1598。［Ref。］
2. Sampers I, Habib I, Berkvens D, Dumoulin A, De Zutter L，等(2008)彎曲杆菌比利時雞肉製劑中的汙染。中國食品微生物學雜誌128:297-303。［Ref。］
3. 王曉燕，王曉燕，王曉燕，等(2008)。人類病原體對家禽的汙染彎曲杆菌在農場一級減少其流行的方法和策略。生物技術，農學，社會等環境3:317-334。［Ref。］
4. Al-Dughaym AM, Al-Tabari GF(2010)沙特阿拉伯Al-Ahsa市場部分雞肉產品的安全性和質量。中國生物醫學雜誌，17:37-42。［Ref。］
5. Rob L, Andrew H, Peter C, Gerhard S(2003)風險概況:空腸彎曲杆菌/大腸杆菌家禽(整隻和一塊塊)。新西蘭食品安全局的報告。［Ref。］
6. Ruberg F, Steinbrueckner B, Kist M(1998)同時檢測不同彎曲杆菌在人類感染期間的菌株是罕見的。九大會議記錄^th國際講習班，南非開普敦，65-68。
7. Ilida, MN, Faridah MS (2012)空腸彎曲杆菌在雞肉和雞肉製品中。熱帶農業雜誌，植物科學40:63-69。［Ref。］

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條信息

文章類型:研究文章

引用:Sultana S(2017)孟加拉國達卡家禽和家禽產品中彎曲杆菌的檢測。J Network Med Target Ther 1(1): dx.doi.org/10.16966/2577-1906.101

版權:©2017 Sultana S.這是一篇根據創作共用署名許可條款發布的開放獲取文章，允許在任何媒介上不受限製地使用、分發和複製，前提是注明原作者和來源。

出版的曆史:

收到日期:2017年11月6日

接受日期:2017年12月1日

發表日期:2017年12月8日