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Maryam造成損失Farkhondeh Pouresmaeili＊
伊朗德黑蘭Shahid Beheshti醫科大學醫學院醫學遺傳學係*通訊作者:伊朗德黑蘭Shahid Beheshti醫科大學醫學院醫學遺傳學係Farkhondeh Pouresmaeili電話:+ 98 23872572;電子郵件:pouresfar@gmail.com
像我這樣的科研人員，從國外買了一個生物試劑盒，等了好幾個月才收到，想要得到好處，卻沒有任何積極的結果，肯定會寫信給相關公司的技術服務，希望得到一個好的結果。這是我去年購買NucleoSpin Plasma XS從血漿[1]中提取循環DNA時的故事。
我們遇到了一個問題，當我們完成整個步驟，測量光密度(OD)並安排實時PCR時，我們沒有得到信號和峰值，這意味著我們在提取液中沒有DNA。因此，我要求公司指導我如何使用試劑盒，以獲得一個實際良好的DNA恢複結果。技術服務部門建議我們;由於患者血漿中DNA含量的差異很大，我們將用穗狀DNA檢測樣品的製備效率。他們補充說，DNA含量的高度變化使得不可能說製備是否有效。此外，他們說，已知數量的加標DNA，我們可以清楚地將輸入與DNA提取的產量聯係起來。但是，我們在觀察過量物質，但用引物實時沒有信號。我們沒有這樣的峰值來做比較，所以我們想，如果我們可以減少加入裂解緩衝液後的第一次離心，以保留更多的核酸在柱中，並在洗脫樣品時增加離心力，以清空柱中的DNA物質，這可能是可行的。此外，另一個建議是在使用洗脫緩衝液之前對其進行加熱，以獲得更多的DNA回收。
在此基礎上，對提取工藝步驟進行了多次修改，得到了較好的提取效果和較高的循環細胞遊離DNA (ccfDNA)提取率。當然，為了這一成就，我們犧牲了一個套件。
我們決定公布我們的成功，以造福世界各地的同事，他們計劃使用相同的試劑盒，更便宜和高純度，但通過我們在發表的文章[2]中建議的協議。
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文章類型:信編輯器
引用:Khani M, Pouresmaeili F(2017)當你購買一個有缺陷的試劑盒:你是應該更換它還是按照製造商描述的正確方法?腎衰竭3(2):doi http://dx.doi.org/10.16966/2380-5498.148
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