摘要

COVID-19是一種繼發於SARS-CoV-2病毒感染的病毒性疾病，可導致嚴重的呼吸窘迫。COVID-19的診斷是一項重大挑戰。目前，鼻咽拭子或咽拭子通過聚合酶鏈式反應(PCR)檢測SARS-CoV-2 RNA被認為是確認SARS-CoV-2感染的唯一有效方法。然而，這種檢測有一些局限性，它用於篩查陰性、無症狀人群仍有爭議。血清學論文是一種可能的替代方法，當與臨床和流行病學特征相關聯時，也可用於人群和高危人群的持續篩查。我們觀察到在初級保健環境中進行了快速血清學檢測，快速檢測與早期發現SARS-CoV-2感染可能存在良好的相關性。因此，我們設計了本文中提出的臨床方案[clinicaltrials.gov ID號NCT04316728]，以評估在初級保健環境中篩查和監測Covid-19的陰性無症狀高危人群中的血清學快速檢測的臨床表現和實際有效性。

關鍵字

COVID-19;快速測試;血清學試驗;免疫球蛋白抗體;IgM抗體;初級保健;篩選

簡介

COVID-19是一種繼發於SARS-CoV-2感染的病毒性疾病，可導致嚴重的呼吸窘迫[1]。COVID-19的早期診斷是一項重大挑戰，特別是在初級保健環境中，患者通常因為出現輕微症狀而要求就醫或進行常規檢查。鼻咽拭子是常用的聚合酶鏈式反應(PCR)檢測SARS-Cov-2 RNA的標本，盡管目前將這種檢測技術作為新冠肺炎診斷的金標準存在很大爭議[2,3]。支氣管肺泡灌洗液的RT-PCR陽性率最高，為93%，其次為痰液，陽性率為72%[4,5]。

雖然PCR具有較高的特異性和敏感性，但同時可檢測的患者數量和從采樣到應答的時間有一定的局限性。此外，與其他采樣技術相比，在緊急情況下使用棉簽使衛生工作者更容易受到感染。

此外，這是一個依賴於操作者的過程:如果樣本沒有正確收集，可能會導致大量假陰性。這是在發生重大疫情時的緊急篩查，一個操作員在一個班次可以進行數百次拭子[6,7]。

基於所有這些原因，世界衛生組織(世衛組織)鼓勵製定新的方案，使[8]的診斷和治療標準化。

最近的文獻[9,10]表明，需要開發一種針對當前和未來疫情的快速檢測方法。事實上，使用性能更好的檢測方法可能會縮短從臨床懷疑COVID-19到診斷的時間跨度，並可能增加在給定時間段內可接受檢測的人數。

這有兩個主要的相關後果:

a .作出快速診斷，幫助醫生作出臨床決定，作出預後，並采取公共衛生行動，遏製和隔離病例和接觸者[11]。

B.更準確地描繪疾病的傳播情況，從而產生更準確的流行病學數據，從而觸發針對性的公共衛生應對措施和措施[12,13]。

C.顯示RNA確認的患者[14]的特異性免疫反應。

VivaDiag^™COVID-19 IgM/IgG快速檢測是一種快速檢測方法在體外新型冠狀病毒病IgM、IgG抗體定性診斷試驗。它可以在初級保健設施或二級和三級衛生設施中使用，可以對患者連續使用，而可以同時檢測的患者數量完全取決於組織限製(如進行檢測的衛生工作者的數量，以及衛生設施的物理限製，這可能會減少等待檢測或已檢測並等待響應的人在該部門的數量)。

基於公共衛生和臨床原因，我們對一組患者進行了Covid-19血清學論文和RT-PCR檢測，隨後我們設計了一套早期診斷和篩查SARS-CoV-2感染的研究方案。

因此，這項研究的目的是了解VivaDiag的有效性^™COVID-19疫情期間篩查患者的檢測方法，以及該檢測在監測疾病的臨床進展、恢複和複發方麵的有效性。

測試驗證與RT-PCR:觀察和工作室假設

根據增加人群中COVID-19感染檢測數量的建議，我們建議對前往初級保健機構進行常規檢查或隨訪的無症狀患者和在門診工作的醫護人員進行血清學檢測。從檢測結果出發，將出現症狀或因流行病學標準而進行分子檢測並同時進行血清學檢測的患者的COVID-19 RT-PCR檢測結果進行匹配，我們觀察到來自不同檢測技術的結果具有相當的一致性，這促使了我們的研究假設。

如圖1所示，我們在門診觀察的受試者為30人(56%男性，44%女性;總體年齡60歲，9+2歲，71歲;x±SEM)。作為covid - 19症狀攜帶者(n=15)或作為高危醫務人員(n=15)，所有受試者均進行了RT-PCR檢測(經口咽拭子拭子)。

圖1:病例係列的人口學特征:左性別年齡分布(男性和女性);按群體(醫務人員和患者)分列的正確年齡分布。

根據世衛組織建議的方法和意大利衛生當局的指示進行RT-PCR。當日進行PCR檢測，用VivaDiag進行快速免疫層析檢測^™是執行。由於緊急情況和專業實驗室難以進行PCR檢測，4名患者的RT-PCR結果尚未提供。因此，我們對26個可用結果進行了計算。

使用McNemar精確檢驗進行統計分析，然後計算Cohen’s k，這解釋了非偶然決定的一致性量[表1]。

		VivaDiag
		底片	陽性	Total
rt - pcr	底片	17	0	17
	陽性	0	9	9
	總計	17	9	26

表1:精確的McNemar檢驗表得到的p>0.9999，而科恩的k等於1 (CI95%從1.0到1.0)，例如，一致性完全不歸因於任何隨機原因。

根據我們的觀察，我們推測，在初級保健環境中使用血清學檢測可能有助於早期診斷和篩查可能感染SARS-CoV-2的患者和醫護人員。因此，我們設計了以下研究方案，旨在更好地評估血清學論文的臨床表現和血清學快速檢測在一組陰性無症狀高危人群中檢測和診斷Covid-19的有效性。

材料和方法

通過VivaDiag對定期到門診部或初級保健診所就診的患者和工作的衛生工作者進行SASR-CoV-2檢測^™COVID-19 IgM/IgG快速檢測。

根據clinicaltrial.gov[15]上公布的完整方案，我們的研究中包括了在一家醫療診所就診的成人患者，已知至少有兩種慢性疾病，以及在同一機構工作的醫護人員

本研究旨在評估陰性患者在COVID-19暴發期間的免疫反應、該檢測在早期發現感染方麵的臨床表現，以及該檢測在試驗期間出現COVID-19臨床症狀的患者中的可靠性。因此，在診所就診的患者將根據方案進行連續檢測，並記錄每次就診時的病史，以評估是否存在提示SARS-CoV-2感染的症狀，以及是否與其他被診斷為COVID-19的人有過可能的接觸。

排除標準為:患有慢性呼吸係統疾病、已知免疫抑製或正在接受可能降低免疫反應藥物治療的患者。

有COVID-19臨床症狀的患者將接受COVID-19 PCR RT檢測和VivaDiag檢測^™COVID-19 IgM/IgG快速檢測。

快速檢測陽性或無症狀的患者，將進行COVID-19 RT-PCR檢測，以評估兩種檢測的對應性。

的VivaDiag^™COVID-19 IgM/IgG快速檢測滿足以下條件為陽性:

1. 檢測到抗covid -19 IgM抗體;
2. 檢測抗covid -19 IgG抗體;
3. 檢測到抗covid -19抗體IgG和IgM。

如果未檢測到抗covid -19 IgG和IgM抗體，則認為檢測結果為陰性;如果質量控製帶C不著色，則認為檢測無效，無論IgG和IgM帶是否著色。

結果

預期成果

主要結果:為了更好地了解該檢測的臨床表現，我們將評估在試驗結束時沒有出現COVID-19臨床症狀(真陰性)的持續陰性結果患者的數量，以及在試驗期間在出現SARS-CoV-2感染臨床症狀之前對早期發現COVID-19的快速檢測呈陽性的患者的數量。

對於那些暴露於SARS-CoV-2並出現症狀的患者，我們的目標是在距離疑似感染時間多少天後檢測呈陽性。此外，我們將考慮在試驗過程中，有多少對快速檢測呈陽性的無症狀患者對PCR RT也呈陽性。

二次結果:本研究的次要目標是評估VivaDiag™快速檢測與PCR RT在快速檢測呈陽性的患者中的準確性和精密度。

此外，為了更好地了解在初級保健環境中接觸病毒的情況，我們將評估在試驗期間有多少患者和多少醫護人員呈陽性。

討論

盡管血清學檢測經常用於疑似病毒感染患者的篩查和診斷，但科學文獻中關於SARS-CoV-2的報道很少。VivaDiag^™COVID-19 IgM/IgG快速檢測是一種快速檢測方法在體外新型冠狀病毒病IgM和IgG抗體定性快速診斷試驗。我們設計的這項研究及其提出的方案旨在評估免疫係統對快速檢測在初級保健環境中早期檢測無COVID-19臨床症狀患者的SARS-CoV-2感染的臨床表現的反應。

這項研究的主要輸入來自我們對一組定期前往初級保健機構就診的患者進行的檢測結果的觀察，並將其與針對SARS-CoV-2的RT-PCR進行比較。這一觀察結果與李錚等[16]關於抗SARS-CoV-2特異性單克隆抗體IgM和IgG作用的標誌性研究相吻合。李的研究似乎證實了該檢測的有效性以及與RT-PCR相比的優勢。

Liu L等人[17]在一項對238名住院患者的研究中也報告了類似的結果。相反，Cassaniti I等人報告了在緊急情況下和在急性患者[18]中進行測試時，該測試的表現較差。然而，我們的研究設計旨在評估初級保健環境中的快速血清學檢測，主要用於篩查高危無症狀患者中的SARS-CoV-2感染。

根據之前的研究結果，我們推測血清學檢測可用於在臨床症狀出現前早期發現陽性患者。此外，除了RT-PCR檢測[14]外，抗體檢測也可以發揮重要作用。由於該檢測不需要特殊設備和培訓，而且可以使用基本的個人防護設備進行，因此它可能特別適用於初級保健環境和對大量患者和衛生工作者的快速篩查，從而改善衛生係統對當前大流行的反應。此外，隻要快速檢測可能是在低收入地區和發展中國家進行人口篩查的唯一可能策略，我們的研究結果可能對這些地區更好地設計和實施未來的幹預措施至關重要。

我們的協議有一些局限性。由於本研究的主要目的不是評估血清學快速檢測與RT-PCR相比的特異性和敏感性，我們隻能依靠以往出版物的結果來評估兩種檢測的對應性。這也意味著我們的研究結果可能隻適用於VivaDiag™快速檢測;盡管我們可以推測，當在相同的環境中使用其他血清學快速檢測時，我們的研究結果將是相似的。此外，由於研究將在初級保健部門進行，我們無法隨訪因Covid-19診斷而入院的患者，來自這些患者的數據缺失可能會影響未來試驗的結果。盡管如此，我們相信這項研究將提供有價值的信息，對目前我們完全盲目行走的領域有所啟發。

結論

總之，考慮到對rt - pcr驗證試驗的有利結果——來自觸發我們研究方案的初步觀察，方法之間的確切一致性甚至排除了由於偶然的一致性(Cohen’s k=1;CI95%:從1到1)，基於上述考慮，我們認為迫切需要更好地了解快速檢測是否實際有效和可靠，特別是對於我們在方案中提出的篩查目的。我們認為，我們設計的方案可以提供相關信息，以建立快速血清學檢測在真實臨床環境中的有效性。因此，我們促進基於我們的研究方案的其他研究，以更好地了解該檢測的臨床性能。如果結果與我們的初步觀察一致，這種或類似的快速檢測可能廣泛用於Covid-19的臨床篩查，包括醫務人員和普通人群，改善預防策略和應對疫情，同時增加對有或無Covid-19症狀的患者的早期診斷機會。

的利益衝突

作者在報告中沒有利益衝突。

參考文獻

1. 王超，Horby PW, Hayden FG, Gao GF(2020)一種全球衛生關注的新型冠狀病毒爆發。柳葉刀》15:470 - 473。［Ref。］
2. 蘭麗，徐東，葉剛，夏晨，王鬆等。(2020)新冠肺炎康複患者RT-PCR檢測結果陽性。《美國醫學協會雜誌》上。［Ref。］
3. 張錦江，王樹生，薛永元(2020)糞便標本診斷2019年新型冠狀病毒感染的肺炎。《中華醫學雜誌》32(5):589 - 589。［Ref。］
4. 王偉，徐勇，高銳，陸銳，韓凱等。(2020)不同類型臨床標本SARSCoV- 2的檢測。《美國醫學協會雜誌》上。［Ref。］
5. Corman VM, Landt O, Kaiser M, Molenkamp R, Meijer A等(2020)用實時RT-PCR檢測2019- ncov。歐洲監測器25:1560-7917。
6. Winichakoon P, Chaiwarith R, Liwsrisakun C, Salee P, Goonna A，等人(2020)鼻咽和口咽拭子陰性不排除COVID-19。中華臨床微生物學雜誌23:e00297-e00320。［Ref。］
7. 於芳，閆玲，王楠，楊鬆，王玲等。(2020)SARS-CoV-2感染患者的定量檢測及病毒載量分析。臨床感染:ciaa345。［Ref。］
8. 世界衛生組織(2020年)《疑似人間病例中2019新型冠狀病毒(2019- ncov)的實驗室檢測:臨時指南》。［Ref。］
9. 肖永青，吳燕，劉輝(2020)2019年新型冠狀病毒感染的演變現狀:傳統血清學檢測方法在疾病診斷和感染監測中的建議。中華醫學病毒學雜誌92:464-467。［Ref。］
10. 希克·JL，比丁格·PD(2020年)《新型冠狀病毒與舊教訓——為衛生係統應對大流行做好準備》。N英語J醫學[Ref。］
11. (2020)新出現的2019年新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)具有獨特的流行病學和臨床特征，需要采取特殊的控製措施。中華醫學病毒學雜誌92:568-576。［Ref。］
12. 董旭，曹雲雲，呂曉霞，張建軍，杜輝，等。(2020)2019冠狀病毒病的11張麵孔。過敏。［Ref。］
13. 李強，關旭，吳萍，王旭，周磊等。(2020)新型冠狀病毒感染的肺炎在中國武漢的早期傳播動態。中華醫學雜誌382:1199-1207。［Ref。］
14. 趙健，袁強，王宏，劉偉，廖旭等。(2020)新型冠狀病毒感染的新型冠狀病毒患者對SARS-CoV-2抗體的應答。臨床感染:ciaa344。［Ref。］
15. Gaddi AV, Capello FV (2020) VivaDiag的臨床表現^™COVID-19 lgM/IgG快速檢測在早期檢測新型冠狀病毒感染中的應用ClinicalTrails.gov。［Ref。］
16. 李智，易勇，羅旭，熊楠，劉勇等。(2020)新型冠狀病毒感染IgM-IgG聯合抗體快速檢測方法的研製及臨床應用。J地中海。［Ref。］
17. 劉麗，劉偉，王鬆，鄭鬆(2020)238例住院患者SARS-CoV-2血清學檢測的初步研究。medRxiv。［Ref。］
18. Cassaniti I, Novazzi F, Giardina F, Salinaro F, Sachs M，等(2020)VivaDiag COVID-19 IgM/IgG快速檢測的性能不足以診斷急診科急症患者的COVID-19。J地中海。［Ref。］

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條信息

文章類型:研究文章

引用:Capello F, Cipolla M, Cosco L, Gnasso A, Mancini R，等(2020)VivaDiag COVID-19 lgM/IgG快速檢測用於篩查和早期診斷無臨床症狀的COVID-19患者。內分泌代謝紊亂雜誌(1):dx.doi.org/10.16966/2380- 548X.167

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出版的曆史:

收到日期:04年4月,2020

接受日期:2020年4月27日,

發表日期:2020年5月07