表1:鹽水蝦殺傷力生物測定c . infortunatum提取
全文
Talukdar穆罕默德Waliullah1 __ *一種蛋白激酶Mst Yeasmin1 __Md Ashraful阿拉姆2Md Wahedul伊斯蘭教3首腦哈桑3
1分子細胞生物學實驗室,生物科學部門,GSST靜岡縣大學836 -歐亞,Suruga-ku,日本靜岡縣2FIQC實驗室,漁業部門,Matshya Bhaban, Ramna,孟加拉國達卡- 1000
3生物科學研究所Rajshahi大學Rajshahi - 6205,孟加拉國
__作者同樣導致了這項工作
*通訊作者:Pragati Talukdar穆罕默德Waliullah、分子細胞生物學實驗室、生物科學部門,GSST,靜岡縣大學836 -歐亞,Suruga-ku,靜岡市422 - 8529年,日本,電話:+ 81-080-9486-2020;電子郵件:olymwt@live.com
學習科學知識,這項研究檢查以評估抗癌、抗菌和藥理活性的天然產物和細胞毒性的評估能力使用根、葉和莖的乙醇和乙酸乙酯提取物Clerodendrumin fortunatum(馬鞭草科)由於隨機使用習慣和傳統醫學治療常見疾病如腸紊亂、痢疾、結核和呼吸係統疾病等在體外應用程序是由台式生物測定使用鹽水蝦殺傷力生物測定方法。原油提取被發現是致命的,特別是信用證顯示顯著有效50根的乙醇的分數是20.845 ppm比較標準藥物四環素為14.675 ppm鹽水蝦無節幼蟲表明提取生物活性。半數致死濃度(LC的細胞毒性研究50)值顯示良好的相關性與抗生素四環素。比較相關誤差和呈現的根中提取乙醇比例分數是非常有效的以及莖和葉提取物的乙醇提取物的乙酸乙酯分數明顯也被物化。這項研究作為一個潛在的模板的影響這些結果的生物活性和藥物發現。
民族醫學;半數致死濃度;細胞毒性;Artemiasalina;標準偏差
原住民知識的使用傳統醫學從業者的領導提供了一個有用的路線在尋找新型藥物[1]。不同藥用植物的抗菌潛力正在被世界各地的廣泛研究,但是隻有少數的研究一直在進行一個係統的方式[2]。醫學知識來自傳統社會積極尋找新的生物活性分子來源於植物顯示有效的活動對細菌病原體[3]。現在,一些研究人員正在提供實驗室試驗證明使用的植物在民間醫藥治療各種傳染病[4]。
在目前的研究中,c . infortunatuml .(馬鞭草科)被選中來評估其民族植物學的重要性由於隨機使用傳統醫學治療常見疾病如腸紊亂,痢疾、結核和呼吸問題等。據報道,孟加拉國有超過5000醫用藥用植物,這些植物的使用顯著[5]。c . infortunatumis一般用於民間,山大港和農村貧民窟居民作為本土醫藥、保健品、裝飾的家電和柴火[6、7]。Clerodendrum是一個非常大的和多樣化的屬和五百八十年到現在已確認屬的品種,廣泛分布在亞洲、澳大利亞、非洲和美國[8]。根和葉中提取的c . indicum,c . phlomidis,c . serratumc, c . trichotomum研究方麵c . petasites已被用於治療風濕病、哮喘和其他炎性疾病[9]。它還報告說,部落使用c . inerme解毒劑的中毒魚、螃蟹和蟾蜍[10]。根、葉和葉的新鮮果汁c . infortunatum被用於消除蛔蟲和腫瘤,也作為瀉藥[11]。另一個研究c .摘要和c . splendens已經被報道,氯甲酸提取花和莖是活躍的反對惡性瘧原蟲和魯茲錐體表明葉提取物顯示承諾活動t . cruzi[12]。
探索科學的想法,本研究旨在在體外細胞毒性效能進行評價,鹵蟲鹽沼,鹽水蝦殺傷力生物測定識別和確定的生物活性化合物的化學結構。
工廠收集和識別
植物標本收集Rajshahi大學校園,孟加拉國。憑證標本確認的識別分類部分,孟加拉國Rajshahi大學植物學係。
準備的提取
根、葉和莖幹在陰影和存儲在棉袋,然後細粉(100通用)分別與磨床的幫助。每個地麵材料浸泡在500毫升乙醇和乙酸乙酯分別24 - 72 h和過濾(繪畫紙沒有1)。然後過濾是允許在旋轉蒸發器蒸發,直到完全幹燥和保存在冰箱裏。然後(100毫克,50毫克)幹的提取,在進一步的研究中,稱重和溶解在10毫升的受人尊敬的溶劑稀釋。最終的濃度提取100µg / 10µl和50µg / 10µl。
體外細胞毒性生物測定
鹽水蝦殺傷力生物測定是一個台式生物測定方法評估抗癌,抗菌和藥理活性的天然產物(13、14)。這裏體內殺傷力的簡單動物有機體(鹽水蝦無節幼蟲)是用來方便監控篩選分離的新生物活性天然產物的發現(15、16)。一般來說,半數有效量(ED50←)細胞毒性值是十分之一(1/10)的半數致死量(LD50)值的鹽水蝦testn [17]。因此,它是可能的檢測監控細胞毒素的分離,以及3 ps (P388)(體內小鼠白血病)活性提取物使用鹽水蝦殺傷力生物測定[18]。生物活性化合物在高劑量幾乎都是有毒的。根據美國國家癌症研究所(NCI),粗糙的植物提取物被認為是細胞毒性如果CC50價值在哺乳動物細胞是< 30µg /毫升[19]。另一方麵,分界點考慮原油植物提取物無毒的鹽水蝦毒性試驗是信用證50> 100µg /毫升(20、21)。之間存在著正相關關係對鹽水蝦毒性和細胞毒性9 kb(人類鼻咽癌)(P = 0.036和k = 0.56),以及半數致死濃度(LC50)急性口服毒性試驗的老鼠(r = 0.85;(22、23)P < 0.05)。
孵化的豐年蝦
少量的豐年蝦卵孵化在模擬海水。大約38通用純氯化鈉(也稱為海鹽)溶解在1 L的蒸餾水,使模擬海水。pH值應該在8.3 - -8.7。然後小數量的收集蝦雞蛋被解放到水和連續通風供氧在孵化的坦克。一個連續照明係統也保證。
準備測試樣品
乙醇和氯仿的一部分c . infortunatum根、葉和莖提取物對鹽水蝦無節幼蟲。最初,提取2毫克每一部分分別在100年解散µl純二甲亞碸(DMSO)親水之前添加19.98毫升的水得到的濃度200 ppm作為股票的解決方案。從股票的解決方案,10毫升(這是濃度200 ppm)和鹽水稀釋20毫升水獲得的濃度100 ppm,這是表明股票解決方案B和股票的解決方案B, 10毫升拍攝(這是濃度100 ppm)和鹽水稀釋20毫升水獲得50 ppm solution-C備貨的濃度。這被稱為連續稀釋法。然後下麵的濃度是200、100和50 ppm。在實驗期間根據dosemortality影響劑量範圍是不同的對於一些便利以來取得一個好的結果無節幼蟲提取物的活性的鹽水蝦。
製備的對照組
對於每個濃度,一個試管中含有同樣體積的DMSO溶液稀釋10毫升海水和30蝦無節幼蟲作為陰性對照組。這是用於驗證測試的有效性。當控製顯示快速的無節幼蟲死亡率,那麼測試被認為是無效的,無節幼蟲可能會死由於原因以外的細胞毒性的化合物。
應用程序的測試樣本和鹽水蝦無節幼蟲試管
在每個五個試管,10毫升(3.8%)被鹽水蝦解決方案,包含30鹽水蝦的幫助下無節幼蟲微量吸液管,具體的每個樣本從股票解決方案b轉移到各自的瓶,200年最終濃度,100和50µg /毫升。DMSO的卷在這些試管不應超過10µl /毫升的鹽水溶液,因為上麵這個毒性可能出現由於DMSO濃度。
計算的無節幼蟲
24小時後,試管被觀察到。無節幼蟲存活的數量在每個試管計算,結果指出。由此,鹽水蝦無節幼蟲死亡率的比例計算每個樣本在每個濃度和這項研究的結果發表在。
數據的統計分析
由概率單位劑量死亡率數據進行分析統計分析[24]。有效性或劑量死亡率關係(concentrationmortality關係)的植物產品通常表示為半數致死濃度(LC50)值。這是化學物質的濃度產生死亡後一半的測試對象特定的曝光時間。
鹽水蝦殺傷力生物測定的結果。根的乙醇和乙酸乙酯提取物,葉和莖c . infortunatum受到應用兌鹽水蝦(答:鹽水湖)無節幼蟲的生物活性的檢測。選擇了幾劑通過試點(臨時)實驗和最後一個實驗設置3複製和控製劑量。從實驗中,據透露,每個測試樣本顯示在不同濃度不同的死亡率。鹽水蝦無節幼蟲的死亡率增加了檢測的濃度的提高原油提取。LD的50值和95%可信限,回歸方程和卡方值的粗提取物(根、葉和莖)和24小時的四環素曝光測定,使用概率元分析。結果在表1中列出。回歸線由策劃日誌提取物的濃度c . infortunatum對probit死亡率揭示日誌劑量和實證probit死亡率之間線性相關(圖1 - 3)。
LC50價值的根、葉和莖20.845,24.017和31.379 ppm為酒精,33.448、48.083和24.882 ppm乙酸乙酯分別為14.675 ppm四環素(表1)。
95%的可信限根、葉和莖是5.335到81.447,6.361,90.675和11.543為酒精85.303,14.017,79.033,26.302,87.898和8.161分別為乙酸乙酯75.856和2.118到101.678四環素(圖1)。
回歸方程的根、葉和莖Y = 3.123247 + 1.445058 x, x和Y Y = 3.066222 + 1.395237 = 2.783323 + 1.461687 x酒精(圖2 - 2 c), Y = 2.335113 + 1.710795 x, Y = 2.121780 + 1.710795 x和Y = 2.760945 + 1.594544 x分別為乙酸乙酯(圖3 a-3c),而Y = 3.532138 + 1.278944 x四環素(圖1)。
χ2值(df)根、葉和莖0.111416,0.008432和0.008245為乙醇,乙酸乙酯的0.004743、0.064644和0.151739和0.021533分別為四環素1自由度(表1),半數致死濃度(LC50)的細胞毒性生物測定試驗相比,標準的抗生素四環素和相關誤差百分比(圖4)。
所有的原油提取被發現是致命的,無節幼蟲顯示顯著有效的鹽水蝦表明提取生物活性。
從目前研究鹽水蝦無節幼蟲的死亡率增加的提高粗提取物的濃度測試。LC50值的原油提取根、葉和莖被發現是20.845,24.017和31.379 ppm酒精;33.448、48.083和24.882 ppm的乙酸乙酯分別為四環素和14.675 ppm。95%置信區間、回歸方程和χ2值也顯著。一般協議[25,26]研究大戟屬植物的殺傷力考驗hirta。記錄細胞毒性觀察鹽水蝦無節幼蟲也支持我們先前的抗菌活動c . inforunatum(-),c . viscosum[30]。連續鏈的研究而且代表我們殺蟲的早期結果,排斥和死亡率的活動c . inforunatum(31、32)。
圖1:概率單位回歸Probit鹽水蝦無節幼蟲的死亡率和日誌之間的劑量(+ 1 mgcm2四環素的24 h後曝光
圖2:概率單位回歸Probit鹽水蝦無節幼蟲的死亡率和日誌之間的劑量(+ 1 mgcm2)的根乙醇提取物24 h後曝光
圖2 b:概率單位回歸Probit鹽水蝦無節幼蟲的死亡率和日誌之間的劑量(+ 1 mgcm2)葉乙醇提取物的24 h後曝光
圖2 c:概率單位回歸Probit鹽水蝦無節幼蟲的死亡率和日誌之間的劑量(+ 1 mgcm2)幹的乙醇提取後24小時曝光
圖3:概率單位回歸Probit鹽水蝦無節幼蟲的死亡率和日誌之間的劑量(+ 1 mgcm2)的根乙酸乙酯提取24 h後曝光
圖3 b:概率單位回歸Probit鹽水蝦的死亡率和日誌之間的劑量(+ 1 mgcm2)乙葉乙酸乙酯提取物的24 h後曝光
圖3 c:概率單位回歸Probit鹽水蝦無節幼蟲的死亡率和日誌之間的劑量(+ 1 mgcm2)的C幹的乙酸乙酯提取24 h後曝光
圖4:比較半數致死濃度(LC50)和相關誤差和百分比
半數致死濃度(LC的細胞毒性研究50)值顯示良好的相關性與抗生素四環素。最近我們證明了細胞毒性的相關性在乙醇和氯仿的一部分c . infortunatum與抗生素四環素[33]。從比較相關誤差和百分比,我們明白根提取的酒精分數是非常有效的。當然葉乙醇提取物和莖提取物的乙酸乙酯分數明顯也被物化。細胞毒性的證據自然提取物的生物活性c . infortunatum是出現在鹽水蝦殺傷力生物測定的結果。然而,這種植物的潛在化學成分顯示殺菌、抑菌或其他毒理學活動尚未確定。
上述發現指定c . infortunatum有前途的生物屬性和似乎是一個有效的材料抗菌藥物的發展和生態友好的生物防治。因此,本研究為進一步研究鉛化合物作為基礎是孤立的,這樣可能會作為模板的影響這些結果的生物活性和藥物發現草藥產品的潛力進行了討論。
Rajshahi大學生物科學學院提供了科技部支持的實驗室設施和信息和通信技術,孟加拉人民共和國政府項目的研究和開發(研發),批準號Bitojopromo / sha-12 / goupro-8/2008/268。
我們聲明我們沒有利益衝突。
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引用:阿拉姆Waliullah TM, Yeasmin媽,媽,伊斯蘭教兆瓦,哈桑P(2016)分析天然藥的毒性試驗;Clerodendrum infortunatum l . J藥物Res Dev 2 (2): doi 1009.116 http://dx.doi.org/10.16966/2470
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