摘要

目前的研究檢查了吸煙習慣對口腔中念珠菌存在的影響。研究組包括50名健康吸煙者(年齡20-50歲，平均26.78歲，中位25歲，SD±6.9)。作為參考，我們研究了一組50名年齡和性別相似的健康非吸煙者。本研究首次使用了Diaslide設備，該設備經過了改進，可對念珠菌菌落進行定量評估。

在評估吸煙對念珠菌影響的所有參數中，吸煙者唾液中的菌落數量是唯一顯著高於非吸煙者的參數(p=0.037)。

目前的研究表明，與其他已知因素如口幹、免疫缺陷疾病或抗生素治療相比，吸煙似乎對念珠菌菌落生長的影響很小。建議在不同年齡和吸煙習慣組合的參與者中重複這項研究，並可能研究口腔中與吸煙有關的不同念珠菌種類之間的差異。

關鍵字

念珠菌屬;吸煙;Diaslide

簡介

白色念珠菌是從口腔[1]分離出來的最常見的真菌種類，很容易從舌頭的後背培養。這種二態真菌可能呈現兩個階段:芽孢階段和菌絲階段。後者可以滲透到更深的組織，特別是當宿主防禦機製受到損害時。

多項研究發現，吸煙單獨或與其他因素聯合可能是口腔念珠菌病的重要誘發因素，盡管這種關係或其對口腔念珠菌病的致病影響還遠未解決[2]。雖然一些研究表明吸煙不會顯著影響念珠菌的攜帶[3-8]，但其他研究報告稱吸煙顯著增加了其患病率[9-11]。吸煙似乎對免疫功能低下個體[12]中假膜性念珠菌病的發病率有促進作用。

卷煙或雪茄煙霧影響念珠菌攜帶的確切機製尚未確定。有研究表明，吸煙可能導致局部上皮細胞改變，允許念珠菌定植[9]。香煙煙霧也可能為白色念珠菌[13]提供營養。這一假設具有重要意義，因為香煙煙霧中所含的芳香烴也可能通過念珠菌中存在的誘導酶係統轉化為致癌物最終產物[14,15]。這些理論部分解釋了為什麼吸煙者比其他類型的白斑更容易發生念珠菌性白斑，且惡性變化的可能性更高[16,17]。

Diaslide裝置是一種用於鑒定尿菌落[18]的臨床工具。目前的研究是第一個使用Diaslide裝置的研究，該裝置通過將原始的Diaslide (MacConkey瓊脂)的生長介質替換為Sabouraud瓊脂，一種念珠菌選擇性培養基[19]，含有氯黴素以抑製細菌的存在。在本研究中，它被用作臨床工具，以提供念珠菌菌落的定量評估(圖1)。

本研究的主要目的是驗證吸煙與口腔假絲酵母菌菌落定量評估之間的關係，使用改良的Diaslide作為臨床定量工具。

材料與方法

研究組由50名健康吸煙者(25男25女)組成，年齡20-50歲(平均26.78歲)。匹配的對照組包括50名健康的非吸煙者(27名男性，23名女性)，年齡20-50歲(平均25.94歲)。

“吸煙者”一詞定義的是每天吸煙超過10支，至少3年的參與者。計算“包年”參數(每天吸煙數乘以吸煙年限)。

“非吸煙者”一詞定義的是從未吸煙或至少五年不吸煙的參與者。

“健康”一詞定義的是沒有任何不良醫療狀況的參與者，沒有接受任何促進口腔念珠菌病的治療(抗生素、類固醇、高血壓藥物、缺鐵引起的貧血、糖尿病、艾滋病等)。

從舌背和唾液中獲得念珠菌培養的樣本。為了盡量減少對口腔中念珠菌存在的影響，在進食、飲水和任何口腔衛生程序後至少兩小時采集樣本。

采樣方法:念珠菌定量評價工具包括改良的Diaslide儀。最初的裝置是指尿液中的細菌菌落[18]。

改良的設備平台為Sabouraud葡萄糖瓊脂，它是念珠菌選擇性的，含有氯黴素來抑製細菌的存在。在Sabouraud培養基中添加抗生素、染色劑和一些鹽，用於抑菌和作為酵母指標[19]。

該設備由一個鉸接的箱子組成，裏麵有兩個相對的瓊脂Sabouraud培養基，由一端有手柄的采樣器和另一端有兩個彎曲的采樣器尖端分開。尖端首先浸入樣品中。然後將取樣器從套管中抽出，同時接種兩個瓊脂表麵。

接種白色念珠菌主要是為了介紹念珠菌菌落特征的參考圖。根據已知念珠菌濃度(CFU/mL)進行儀器校準，以便能夠比較不同培養物(圖1)。基於這些校準，分離菌上獲得的菌落數量可以轉化為念珠菌生長的數值定量程度。

• 結果如下(CFU/mL);
• 10²/ml -一個菌落
• 10^3./ml -兩個菌落
• 10⁴/ml - 20個菌落
• 10⁵/ml -超過20個菌落

培養取自後舌(盲腸孔前)，這是念珠菌最常生長的區域(1)和唾液(收集2毫升放入試管)。含有樣品的設備已在37攝氏度下孵育48小時，陽性念珠菌載體是基於培養[4]中的一個或多個菌落生長。

采用統計學評價分析結果:卡方檢驗評價念珠菌攜帶率與吸煙之間的相關性。采用t檢驗評價念珠菌攜帶與吸煙量及吸煙時間的關係。Mann-Whitney檢驗用於評估研究組與對照組念珠菌菌落計數之間的相關性。采用Spearman相關性評價研究組念珠菌菌落數與吸煙量、吸煙時間的相關性。P < 0.05才有統計學意義。

結果

吸煙與念珠菌攜帶之間的關係見表1。雖然吸煙者唾液和/或舌頭中念珠菌陽性培養的患病率較高(56%和50%)，但沒有發現統計學意義。

圖1:最初的Diaslide裝置是一種臨床鑒定尿液細菌菌落的工具，因此使用麥康基瓊脂作為培養基。Diaslide裝置，通過將生長培養基替換為Sabouraud瓊脂，被用作臨床工具，以提供念珠菌菌落的定量評估。在已知念珠菌濃度的基礎上進行儀器校準，以便能夠比較不同培養物。

研究了吸煙時間和每日吸煙量對念珠菌攜帶流行率的影響。研究結果未能顯示在念珠菌攜帶的這兩個參數中的每一個都有任何顯著的趨勢。

研究人員檢查了吸煙者念珠菌菌落數量與吸煙量和持續時間的關係，其中3和5個菌落的濃度分別超過103(3個菌落)和接近104(5個菌落)。唾液和舌頭菌落的數量與吸煙年限或香煙消費量之間沒有明顯的相關性。

研究組與對照組念珠菌菌落數的相關性見表2。唾液菌落數量是唯一表明50名吸煙者(平均1.04個菌落)的念珠菌患病率高於50名非吸煙者(p=0.037)的顯著發現。當這些發現轉化為CFU/mL時，研究組唾液中的平均菌落計數為100 CFU/mL，而非吸煙者的唾液菌落計數小於100 CFU/mL。

討論

關於吸煙習慣與口腔念珠菌之間可能存在的聯係，文獻中提出了幾種假設:影響念珠菌[9]定植的粘膜變化，煙草[13]中發現的促念珠菌因子，唾液酸化(部分由吸煙引起)與念珠菌[20]攜帶狀態之間的相關性。盡管有這些證據，但關於吸煙與口腔念珠菌的相關性文獻報道並不統一[3-11]。

本研究測試了各種參數，以描述吸煙和口腔念珠菌之間的關係。研究了吸煙時間和吸煙量對假絲酵母菌流行的影響。研究人員還對從舌頭後部開始的文化與從唾液開始的文化進行了比較。我們使用改型的分離細胞儀[18]來提供念珠菌菌落的定量評估。1894年提出的Sabouraud葡萄糖瓊脂仍然是病原真菌[19]初次分離中最常用的培養基，並在本研究中用作改進裝置的培養基。目前的研究過程類似於Oliver和他的合作夥伴[4]提出的過程，因為他們的研究也包括100名參與者(其中37人是吸煙者)，並證明念珠菌菌落數量與吸煙之間存在關聯，而念珠菌攜帶與吸煙習慣[4]之間沒有顯著相關性。

集團	n	馬車——唾液 樣品(%)	馬車舌 樣品(%)	馬車, 總額(%)
研究	50	27 (54%)	(42%) 21	28 (56%)
控製	50	22 (44%)	14 (28%)	25 (50%)

表1:吸煙者攜帶念珠菌與非吸煙者比較，即吸煙與念珠菌攜帶之間的關聯。

集團	菌落總數 來源於唾液	菌落總數 源自舌頭
研究	52	26
複樣	25	16
P值	0.037	0.132

表2:吸煙者與非吸煙者念珠菌菌落數的比較，即研究組與對照組念珠菌菌落數的相關性，按指數(CFU/ mL)讀取。

10²/ml -一個菌落

10^3./ml -兩個菌落

10⁴/ml - 20個菌落

10⁵/ml -超過20個菌落

目前的研究以及奧利弗和他的合作夥伴[4]提出的研究可能表明念珠菌與吸煙之間的聯係，而念珠菌在開始吸煙之前就已經存在，煙草僅通過誘導粘膜變化來增加酵母濃度，釋放煙草[13]中發現的前念珠菌因子和酸化唾液pH值，就像念珠菌物種[20]所支持的那樣。

這項研究表明，與其他已知因素如口幹、免疫缺陷疾病或抗生素治療相比，吸煙對念珠菌菌落生長的影響很小。

該裝置操作方便，但作為念珠菌的定量測量工具可能存在局限性。該裝置由一個鉸接的箱子組成，裏麵有兩個相對的瓊脂培養基，由一端有手柄的取樣器和另一端有兩個彎曲的取樣器尖端分開。取樣器的尖端首先浸入樣品中。然後將取樣器從套管中抽出，同時接種兩個瓊脂表麵。因此，即使細菌濃度超過10 CFU/mL[6]，也可以觀察到單個菌落。分離菌菌落數量與每毫升CFU呈線性相關，由稀釋鍍[18]確定。它的主要缺點是結果被限製在數量級上。此外，它狹窄的尖端可能會限製在舌頭上取樣的預期結果(在以前的研究中[4,9]，從舌頭上取樣的數量更高)。然而，進一步的技術改進可能會提高其效力。例如，將采樣器尖端修改為寬而平，類似於舌刮刀。

研究組中吸煙者的平均年齡相對較低。年齡越多樣化，念珠菌攜帶者的表達可能越高，但年齡越大，可能表現出多種因素，如健康受損、處方藥等。

這項研究的另一個局限性是，相對少數參與者吸煙幾十年，每天吸幾十支煙(研究中的大多數吸煙者吸煙不到10年，每天吸不到20支煙)，以及可能更不同的吸煙者群體，就吸煙的持續時間和數量而言，會對念珠菌菌落數量產生不同的影響。本研究的另一個局限性是在檢查念珠菌菌落時沒有分離不同的念珠菌種。吸煙的時間和數量可能對某些菌種的影響比對其他菌種的影響更大，研究念珠菌與吸煙之間這方麵的聯係可能會得出有價值的結果。

參考文獻

1. 史考利C, El-Kabir M, Samaranayake LP(1994)念珠菌與口腔念珠菌病:綜述。口腔生物醫學5:125-157。[Ref。］
2. Soysa N, Ellepola A(2005)吸煙對口腔念珠菌病的影響:綜述。口腔疾病11:268-273。［Ref。］
3. Bastiaan RJ, Reade PC(1982)有和沒有口腔粘膜角化病的吸煙者口腔中白色念珠菌的患病率。口腔外科口腔醫學口腔病理53,148 -151。［Ref。］
4. 陳誌強，陳誌強(1984)吸煙對口腔內白色念珠菌感染的影響。《口腔疾病雜誌》13:265-270。
5. 杜誌偉，王誌偉，王誌偉，等(2010)煙草與念珠菌口腔定植的關係。《當代醫學實踐》1:017-24。［Ref。］
6. Kadir T, Pisiriciler R, Akyüz S, Yarat A, Emekli N，等。(2002)糖尿病患者和非糖尿病對照組口腔念珠菌攜帶的真菌學和細胞學檢查:局部病因和全身因素的深入分析。口腔康複雜誌29:452-457。［Ref。］
7. 李誌強，李誌強(1996)口腔真菌菌群的逐日變化。Arch口腔生物學11:15 - 19。［Ref。］
8. Colman G, Beighton D, Chalk AJ, Wake S(1976)吸煙與口腔微生物菌群。大屠殺J 21: 111-118。［Ref。］
9. Arendorf TM, Walker DM(1980)男性白色念珠菌的患病率和口腔內分布。《拱門口腔生物學》1980;25: 1 - 10。［Ref。］
10. 李誌剛，李誌剛，李誌剛等(1997)吸煙對HIV-1感染的臨床進展的影響。《獲得性免疫缺陷綜合征》雜誌14:451-458。［Ref。］
11. Abu-Elteen KH, Abu-Elteen RM(1998)全口義齒佩戴者口腔中白色念珠菌的流行情況。新微生物21:41-48。［Ref。］
12. Willis AM, Coulter WA, Fulton CR, Hayes JR, Bell PM，等(1999)胰島素治療糖尿病患者口腔念珠菌攜帶與感染。糖尿病醫學16:675-679。［Ref。］
13. 高木明，楊誌剛，楊野等(1979)石油同化酵母細胞色素P450的誘導ⅰ。細胞色素P450誘導菌株的篩選及基本特性。細胞分子生物學包括細胞酶。25:363-9。［Ref。］
14. 夏春林，孫濤，王雲雲，楊誌明，等。(1981)白色念珠菌促進食道致癌物甲基亞硝基胺前體形成的研究。美國國家科學院學報78:1878-1881。［Ref。］
15. 郭誌強，王誌強，王誌強，等(1987)口腔黏膜癌的真菌學病原學研究:感染白色念珠菌和其他酵母對n -亞硝基苄基甲胺生產的催化作用。癌變8:1543-1548 .[Ref。］
16. 陳誌偉，陳誌偉，陳誌偉(1980)白斑念珠菌與癌的關係。口服初癌。第一次道斯研討會論文集59-66。
17. 趙婷婷，李芳芳，李俊榮，王娟，莊春春，等。(2010)吸煙合並多發性口腔白斑患者念珠菌侵襲及影響的回顧性研究。真菌54:e377-83。［Ref。］
18. Rosenberg M, Berger SA, Barki M, Goldberg S, Fink A, Miskin A(1992)一種新型尿培養裝置的初步測試。臨床微生物學雜誌30:2686- 2691。［Ref。］
19. Silva JO, Franceschini SA, Lavrador MA, Candido RC(2004)從不同生物樣品中初次分離酵母的選擇性和差異介質的性能。真菌病理學雜誌157:29-36。［Ref。］
20. Arendorf TM, Walker DM(1979)口腔念珠菌在健康和疾病中的作用。Br Dent, J, 47(1): 1 - 4。［Ref。］

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條信息

文章類型:研究文章

引用:Becker T, Porat D, Meir Gorsky(2015)吸煙習慣與口腔念珠菌的關係。國際牙醫口腔健康卷1.2:http://dx.doi.org/10.16966/2378-7090.107

版權:©2015 Becker T et al.。這是一篇開放獲取的文章，根據創作共用署名許可的條款發布，允許在任何媒介上不受限製地使用、分發和複製，前提是要注明原作者和來源

出版的曆史:

收到日期:2015年2月2日

接受日期:2015年3月25日

發表日期:4月30日