摘要

目的:由於孟加拉國膽石症(即膽石病，GD)患者的血清載脂蛋白(ApoA1, ApoB100, ApoE)狀況報告很少，因此本研究對其進行了研究。

患者和方法:2016年10月至2018年3月開展的研究包括55例膽石症成年患者(Pts)和40例正常對照(NC)。血液樣本取自膽囊切除術前空腹患者(血清- i⁰)，膽囊膽汁在膽囊切除術(膽汁- i⁰2-3個月的隨訪(血清- ii⁰)和禁食NC受試者。使用市售研究/診斷試劑盒，用酶免疫分析法(EIA)測定血清和膽汁樣品中的ApoA1、ApoB100和ApoE水平。結果采用SPSS軟件進行t檢驗和卡方檢驗進行統計學比較。

結果:ApoA1水平(mg/dl)在腹腔鏡膽囊切除術後2-3個月明顯升高的患者中有所降低，但沒有達到與NCs (Mean±SD→Serum I⁰: 50.89±14.01，血清II⁰: 60.75±16.40)(p<0.001)ApoB100水平(mg/dl)在膽囊切除術後明顯降低，但沒有達到完全的NCs水平(Mean±SD→血清I⁰: 202.84±53.42，血清II⁰: 138.34±30.63)(p<0.001)。同樣，ApoE水平(mg/dl)在腹腔鏡膽囊切除術後顯著降低的患者中升高，但沒有達到與NCs相似的程度(Mean±SD→Serum I⁰69.97±13.50，血清II⁰57.13±17.38)(p< 0.001)。卡方(χ²)檢測顯示，與NCs相比，大部分患者的ApoA1水平較低，ApoB100水平較高，ApoE水平較高，且在腹腔鏡膽囊切除術後，患者的ApoA1、ApoB100和ApoE水平均有顯著改善，但改善程度未達到與NCs相似的程度(p<0.001)。

結論:膽石症GD對ApoA1、ApoB100和ApoE狀態有重要影響，提示它們可能在該病的發病機製中起著重要的病因和保護作用。在未來的研究中，我們需要進一步研究瘦素和載脂蛋白水平及其與GD代謝綜合征的關係。

短標題

載脂蛋白(A1, B100, E)在膽石症中的表達。

關鍵字

膽石病;ApoA1;ApoB100;載脂蛋白e;腹腔鏡膽囊切除術

簡介

脂蛋白是典型的球形顆粒，其核心是非極性中性脂類，即甘油三酯(TG)和膽固醇酯(CE)，其表麵是更極性的兩親性脂類，即磷脂(PL)和遊離膽固醇(C)。同樣重要的是，它們的表麵還含有一種或多種被稱為載脂蛋白的特殊蛋白質。每一類脂蛋白，即乳糜原、VLDL、IDL、LDL、HDL和Lp(a)，都攜帶幾種不同比例的載脂蛋白，如HDL和乳糜原中的ApoA1, LDL、VLDL、IDL和Lp(a)中的ApoB100，乳糜原中的ApoB48, VLDL和IDL中的ApoE。載脂蛋白的結構特征使它們能夠與脂質末端結合，並與周圍的水環境相互作用。它們促進脂蛋白代謝，參與正常生理[1,2]。在許多流行病學和臨床試驗研究中，乳糜原、VLDL、LDL- c和Lp(a)等脂蛋白已被報道與冠狀動脈疾病(CHD)有關[3-7]。這些研究報告暗示載脂蛋白與冠心病相關，事實上，許多研究報道了一些載脂蛋白與心肌梗死(MI)患者有關[3,4]。文獻綜述表明，一些載脂蛋白如ApoA1、ApoB100和ApoE也參與了膽石症即膽石病(GD)的過程[8-10]。GD是一種代謝問題，與脂質異常、肥胖、糖尿病、高血壓和代謝綜合征有關。有研究報道，GD患者血清中ApoA1、ApoB100和ApoE明顯高於無膽結石患者[11-13]。 Other factors such as cholesterol ester transfer protein (CETP) and mucin were also implicated in the aetiopathogenesis of GD. Suggestions were made that serum ApoA1, ApoB100 and ApoE levels would possibly be sensitive parameters as compared with serum lipids in distinguishing patients with gallstones from subjects without gallstones. The status of lipid profile, lipoprotein (a), mucin 1 and CETP in Bangladeshi patients with cholelithiasis i.e. GD had been published recently [13- 15]. However, literature survey indicated that various apolipoproteins status in Bangladeshi patients with GD is not known. In the present article, we have therefore reported effects of laparoscopic cholecystectomy on serum levels of ApoA1, ApoB100 and ApoE in Bangladeshi patients with cholelithiasis i.e. GD.

患者和方法

55例成年患者(性別:男性10例，女性45例;年齡:25-65歲，平均年齡±標準差:45.5±12.2歲)，膽囊結石患者和40例健康成人正常對照組(性別:男16例，女24例;年齡範圍:28-60歲;平均年齡±SD: 42.5+10.5歲)納入病例對照前瞻性介入研究。GD患者根據醫院標準的臨床和實驗室標準診斷為膽石症，不符合本研究標準的患者，即糖尿病、腎病、甲狀腺疾病、肝病、有服用降壓藥或降血脂藥史和吸煙習慣的患者排除在本研究之外[14-16]。在獲得同意後，患者的人口統計學細節和臨床表現，如疼痛(嚴重程度、持續時間、位置)、病灶征象、超聲圖(USG)等，在診斷時按“形式表”記錄。在確診膽囊切除術前采集空腹血，並進行常規實驗室檢查。分離出的血清進行混疊，在-80°C冷凍保存，作為一級血清樣本(I⁰)．在膽囊切除術時，也從同一患者中采集膽囊膽汁，離心、混疊並在-80°C冷凍保存為一級膽汁樣本(I⁰)．膽囊切除術後，患者按要求給予治療/藥物治療。隨訪2-3個月後，再次采集該患者的空腹血樣本，分離血清，alialic， -80°C冷凍保存為二級血清樣本(II⁰直到分析與我們研究興趣相關的脂質譜(即TG, TC, HDL-C, LDL-C)， Lp(a)和載脂蛋白(ApoA1, ApoB100, ApoE)。血清和膽汁中所有定量估計均采用標準的醫學實驗室方法，使用國際知名公司的研究/診斷試劑盒，LDL-C按Friedwald公式計算[14,16]。血清中ApoA1, ApoB100和ApoE水平通過酶聯免疫吸附試驗(ELISA)研究/診斷試劑盒，基於生物素雙抗體夾心技術，在Microplate EIA Reader(型號:RE-4.0 Microplate Reader, IDCS Ltd Briloner Landstrasse 4-6, 34497 KORBACH-Germany)中在450 nm處獲取光密度讀數。載脂蛋白試劑盒來自上海葉華生物科技有限公司(編號:ApoA1, Cat No.YHB3610Hu;ApoB100，貓號yhb0379hu;ApoE，貓號yhb0371hu)。患者生物標本的實驗室分析結果(I⁰第二,⁰)與對照組(nc)比較，采用Student 's t檢驗和χ 2 (χ 2²)在計算機[17]中使用SPSS程序進行測試。該研究於2016年10月至2018年3月在孟加拉國達卡-1230烏塔拉的醫療和衛生福利信托基金(MHWT)的醫學研究部(MRU)與孟加拉國達卡-1230烏塔拉的婦女醫學院和醫院(MCW和H)外科合作進行。

結果

本研究對象ApoA1、ApoB100和ApoE狀態的結果及統計分析見表1-4。在腹腔鏡膽囊切除術後2-3個月顯著升高的患者中，ApoA1水平明顯降低，但沒有達到與NCs相似的程度，膽汁(Pts)中ApoA1水平較低(p<0.001)(表1)。另一方麵，在膽囊切除術後顯著降低的患者中，ApoB100水平明顯升高，但沒有達到完全升高的程度，因為NCs和膽汁(Pts)中ApoB100水平較低(p 0.001)(表2)。腹腔鏡膽囊切除術後2 ~ 3個月ApoE明顯降低的患者ApoE明顯升高，但沒有達到完全類似於NCs的程度，膽汁(Pts) ApoE水平較低(p<0.001)(表3)²)檢測結果顯示，與NCs相比，大部分患者的ApoA1較低，ApoB100較高，ApoE較高，這一比例的改善與NCs明顯相似，但在腹腔鏡膽囊切除術後2-3個月未達到完全改善(p<0.001)(表4)。

組比較*	ApoA1 (mg / dl) *
	分			nc
	血清(我0）	膽汁(我0）	血清(20）	血清(我0）
n	55	40	45	40
觀察到的範圍	32.17 - -88.54	10.36 - -22.59	42.47 - -110.60	75.55 - -120.70
平均值±SD	50.89±14.01	19.9±4.18	60.75±16.40	92.02±14.62
標準誤差(SEM)	1.89	0.66	2.44	2.31
cim 95%	47.11 - -54.68	17.85 - -20.52	55.82 - -65.68	87.34 - -96.69
學生的學習任務	t值		df	假定值
NCs-I0(年代)vsPts-I0(年代)	13.87		93	< 0.001
NCs-I0(年代)vsPts-II0(年代)	9.23		83	< 0.001
Pts-I0(年代)vsPts-II0(年代)	-3.24		98	0.002

表1:患者(Pts)和對照組(nc)載脂蛋白A1水平及其學生t檢驗的統計分析

組比較*	ApoB100 (mg / dl) *
	分			nc
	血清(我0）	膽汁(我0）	血清(20）	血清(我0）
n	55	40	45	40
觀察到的範圍	123.50 - -409.10	10.21 - -42.03	110.20 - -219.3	48.52 - -172.00
平均值±SD	202.84±53.42	19.64±8.28	138.34±30.63	104.77±33.57
標準誤差(SEM)	7.2	1.31	4.57	5.31
cim 95%	188.40 - -217.28	16.99 - -22.29	129.1 - -147.5	94.03 - -115.51
學生的學習任務	t值		df	假定值
NCs-I0(年代)vsPts-I0(年代)	-10.22		93	< 0.001
NCs-I0(年代)vsPts-II0(年代)	-4.82		83	< 0.001
Pts-I0(年代)vsPts-II0(年代)	7.19		98	< 0.001

表2:患者(Pts)和對照組(nc)載脂蛋白B100水平及其學生t檢驗統計分析
*n:參與者人數，NCs-I⁰(S):正常對照血清⁰), Pts-I⁰(S):患者血清(I⁰), Pts-I⁰(B):患者膽汁(I⁰), Pts-II⁰(S):患者血清⁰）;p≤0.05:顯著，p >0.05:不顯著。

組比較*	載脂蛋白e (mg / dl) *
	分			nc
	血清(我0）	膽汁(我0）	血清(20）	血清(我0）
n	55	40	45	40
觀察到的範圍	55.48 - -112.30	23.37 - -40.12	39.88 - -94.76	28.19 - -57.54
平均值±SD	69.97±13.50	28.22±6.59	57.13±17.38	35.66±6.80
標準誤差(SEM)	1.82	1.04	2.59	1.08
cim 95%	66.32 - -73.62	26.12 - -30.33	51.91 - -62.35	33.48 - -37.83
學生的學習任務	t值		df	假定值
NCs-I0(年代)vsPts-I0(年代)	-14.75		93	< 0.001
NCs-I0(年代)vsPts-II0(年代)	-7.33		83	< 0.001
Pts-I0(年代)vsPts-II0(年代)	4.16		98	< 0.001

表3:患者(Pts)和對照組(nc)載脂蛋白E水平及其學生t檢驗的統計學分析
*n:參與者人數，NCs-I⁰(S):正常對照血清⁰), Pts-I⁰(S):患者血清(I⁰), Pts-I⁰(B):患者膽汁(I⁰), Pts-II⁰(S):患者血清⁰）;p≤0.05:顯著，p >0.05:不顯著。

Apolipo -蛋白質	患者(Pts)和正常對照組(nc)
	NCs-I0	Serum-I0	總計	NCs-I0	Serum-II0	總計	Serum-I0(分)	Serum-II0(分)	總計
ApoA1 (mg / dl)
< 62.78	1	42	43	1	18	19	42	18	60
≥62.78	39	13	52	39	27	66	13	27	40
總計	40	55	95	40	45	85	55	45	One hundred.
卡方(χ2)測試	χ2=51.0, df=1, p <0.001			χ2=17.16, df=1, p<0.001			χ2=13.64, df=1, p <0.001
ApoB100 (mg / dl)
≤171.91	36	14	50	36	36	72	14	36	50
> 171.91	4	41	45	4	9	13	41	9	50
總計	40	55	95	40	45	85	55	45	One hundred.
卡方(χ2)測試	χ2=37.70, df=1, p <0.001			χ2=1.63, df=1, p=0.201			χ22=29.45, df=1, p <0.001
載脂蛋白e (mg / dl)
≤49.26	38	1	39	38	17	55	1	17	18
> 49.26	2	54	56	2	28	30.	54	28	82
總計	40	55	95	40	45	85	55	45	One hundred.
卡方(χ2)測試	χ2=83.09, df=1, p <0.001			χ2=30.36, df=1, p <0.001			χ2=29.22, df=1, p <0.001

表4:腹腔鏡膽囊切除術前後血清載脂蛋白異常患者的比例及統計學分析(χ²)測試。
*n:參與者人數，NCs-I⁰(S):正常對照血清⁰), Pts-I⁰(S):患者血清(I⁰) Pts-II⁰(S):患者血清⁰）;p≤0.05:顯著，p >0.05:不顯著。
ApoA1 (NCs) (Mean-2SD)=92.02-29.24=62.78;
ApoB100 (NCs) (Mean+2SD)=104.77+67.14=171.91;
ApoE (NCs) (Mean+2SD)=35.66+13.60=49.26。

討論

載脂蛋白與冠心病相關，許多研究表明載脂蛋白與心肌梗死有關[3-5,18-20]。據報道，膽結石與血脂異常、冠心病和中風之間存在多種聯係[21-24]。我們對孟加拉國膽石症患者血清中ApoA1(表1)和ApoB100(表2)水平的研究結果與Sarac等報道的相似。這些結果與以往其他研究一致，顯示膽石症患者血清中ApoA1較低，而ApoB100水平較高[25,26]。這些發現可能有助於了解GD的病理生理學。瘦素是一種由脂肪產生的激素，被證明可以調節結腸近端腸抑製和興奮神經元的活性，它似乎在胃腸運動中具有規律性的功能[8,27]。Sarac等進一步表明，ApoA1水平呈負相關，而ApoB100水平與瘦素[8]呈正相關。我們發現GD患者中載脂蛋白e水平與載脂蛋白100的趨勢相似，即血清I中載脂蛋白e升高⁰之後血清- ii水平下降⁰差異顯著，但沒有達到nc的全部程度(p<0.001)(表3)。

ApoE是膽固醇和脂蛋白代謝的關鍵調節蛋白之一[1,27]。ApoE有三種常見的異構體E2、E3和E4，分別由E2、E3和E4等位基因編碼，位於19q13染色體區域的一個位點上。這些等位基因定義了六種載脂蛋白E表型:E2/2、2/3、2/4、3/3、4/4和4/4。載脂蛋白E4與多種疾病有關，如冠心病和阿爾茨海默病[28-30]。在不同人群中，E2等位基因與低血清總膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇濃度相關，而E4等位基因與高血清總膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇濃度相關，並與膽固醇和膽汁酸的腸肝代謝改變相關。據報道，E2等位基因的受試者膽結石中膽固醇含量往往較低，而E4等位基因的受試者膽結石中膽固醇含量較高，提示ApoE2是一種對GD具有保護作用的遺傳因素，而ApoE4亞型可能是[28]膽石症的危險因素。我們觀察到血清ApoE水平升高可能意味著GD的保護性或易感性/危險因素作用。為了解決這一重要問題，需要對GD患者進行ApoE多態性的研究。近年來，抗氧化防禦係統也被認為與GD的流行有關，並被認為在GD的病理生理學中發揮作用[31-35]。其中，較高的循環維生素E和維生素C水平可能對GD有保護作用，這一研究領域需要在縱向研究中進一步研究[34,35]。

我們的發現是重要和有趣的，因為在腹腔鏡膽囊切除術2-3個月後，很大一部分患者的血清水平在GD中發生了改變，並逆轉為NCs，但沒有完全改變(p<0.001)(表4)。這種情況的原因需要一些仔細的、相關的和邏輯的解釋。近年來，GD被認為是一種代謝性疾病，Mendez-Sanchez等人報道了GD與代謝綜合征之間的密切關係[8-10,23]。他們報告說，瘦素功能障礙和胰島素抵抗可能是導致膽囊運動減弱的原因，而膽囊運動減弱又可能導致膽固醇結石的形成。根據這些報告，我們現在正在評估脂質譜與ApoA1、脂質譜與ApoB100、脂質譜與ApoE、Lp(a)與ApoA1、Lp(a)與ApoB100和Lp(a)與ApoE之間關係的結果。

綜上所述，膽石症GD對ApoA1、ApoB100和ApoE狀態有深遠的影響，提示其在本病的發病機製中具有一定的因果作用。進一步研究瘦素和載脂蛋白水平及其相關性，並研究孟加拉國GD患者的代謝綜合征，在我們未來的研究努力中證實這些發現是很重要的。

確認

作者感謝醫學技術專家TK Datta先生的實驗室分析，SMN Ali先生的計算機組成和AHM Salman先生的統計分析。作者衷心感謝孟加拉國共和國科技部(MOST)、孟加拉國Dhaka-1000政府(項目編號240,MEDI 'S集團編號6,2016-2017)對該研究項目的財政支持。

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條信息

文章類型:研究文章

引用:Jhuma KA, Giasuddin ASM, Choudhury MAM, Haq AMM(2018)腹腔鏡膽囊切除術對孟加拉國膽石症患者載脂蛋白(ApoA1, ApoB100, ApoE)狀態的影響。臨床檢驗醫學3(1):dx.doi.org/10.16966/2578-9578.121

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出版的曆史:

收到日期:2018年9月03日

接受日期:2018年10月29日

發表日期:2018年11月05日