摘要

目的:比較雅培新PCT免疫分析方法與Biomerieux Vidas和Roche Elecsys建立的PCT方法。

方法:使用Architect和Vidas方法分析之前用Elecsys PCT測定法檢測的78個冷凍樣品，並使用回歸分析、Bland-Altman差異圖和0.1、0.25和0.5 ug/L三個臨床診斷PCT水平截斷點的一致性分析進行比較。

結果:Architect PCT檢測與Vidas (R=0.954)和Elecsys(R=0.972)檢測相關性良好。在三個臨床相關臨界值下，兩種參考方法的診斷符合率為93.6% ~ 94.8%，0.25 ug/L為91.0 ~ 93.6%，0.5 ug/L為98.7 ~ 100%。

結論:我們的研究結果表明，新的Architect BRAHMS PCT分析方法與Vidas和Elecsys PCT方法比較具有良好的相關性。Architect PCT測定法適用於臨床診斷用PCT測定。

關鍵字

原降鈣素;建築師PCT;免疫測定;膿毒症

簡介

降鈣素原(PCT)是降鈣素的前體，是一種用於細菌感染和敗血症診斷的生物標誌物。PCT的水平在感染後顯著增加，在康複後顯著降低，這一點已經得到證實。臨床PCT水平測量在過去10年獲得了全世界的接受[1]。PCT是一種功能蛋白，由114 ~ 116個氨基酸組成。它是一種具有多種功能的免疫調節劑，與其他已知的炎症活性分子組(如細胞因子、白細胞表麵標記物、急性期蛋白或臨床可檢測的炎症體征)不同。PCT具有特殊的功能，機體對其水平的調節非常嚴格，它是細菌誘導的全身炎症反應[2]存在的一個特別好的指標。

以全身炎症反應為特征的細菌感染可誘導PCT，導致其水平升高。健康人血清或血漿中可溶性PCT濃度一般低於0.1 ug/L，而當濃度超過0.5 ug/L時，應考慮發生敗血症或全身炎症反應[2,3]。

在最初的BRAHMS光度免疫分析法(LIA)[4]發展出第一個BRAHMS PCT Kryptor方法後，Biomerieux和Roche等多家診斷公司與BRAHMS合作，在各自的平台上通過不同的技術開發自動PCT檢測方法[5,6]。最近，雅培在Architect平台上開發了一種新的自動定量BRAHMS PCT檢測方法。在本研究中，我們將這種新開發的PCT檢測方法與Biomerieux Vidas和Roche Elecsys的血清樣品PCT檢測方法的分析性能進行了比較。

材料和方法

研究樣本

2017年2月至7月，香港威爾斯親王醫院化學病理科共收到78例PCT常規檢測標本，首次使用Elecsys PCT免疫分析法進行分析。常規檢測後，血清標本等份保存於20℃，待進一步分析。

研究設計

為了進行對比研究，等分物在室溫下解凍，充分混合，然後由Vidas和Architect在同一天進行PCT測量。將Architect PCT分析方法的分析性能與Vidas和Elecsys PCT分析方法的結果進行比較。

PCT免疫分析測量的描述

Architect PCT檢測是一種兩步免疫分析方法，用於在自動化Architect係統分析儀上使用化學發光微粒子免疫分析(CMIA)技術定量測定血清和血漿中的PCT。樣品中的PCT與抗PCT包被的微顆粒結合。洗滌後，加入抗pct吖啶標記的共軛物，形成反應混合物。在另一個洗滌循環之後，預觸發和觸發溶液被添加到反應混合物中。由此產生的化學發光反應被測量為相對光單位(rlu)。樣品中PCT的含量與Architect係統光學檢測到的rlu有直接關係。測定法的校準需要6個校準器一式兩份。該方法的樣本量為150 uL，測量間隔為0.02 ~ 100 ug/L，最高檢測限(LoD)為0.00 ug/L，最高定量限(LoQ)為0.01 ug/L。在本研究中，Architect PCT檢測在i1000分析儀上運行。

對比PCT免疫分析采用酶聯熒光法(ELFA)在mini Vidas分析儀上運行Vidas PCT檢測，采用電化學發光免疫法(ECLIA)在Cobase601分析儀上運行Elecsys PCT檢測。根據生產廠家提供的信息，Vidas和Elecsys PCT檢測方法的檢出限(LoD)分別為0.03 ug/L和≤0.02 ug/L，功能靈敏度(LoQ)分別為0.05 ug/L和0.06 ug/L。

質量控製

根據製造商的說明，對所有三種測定方法進行校準，並對質量控製材料進行分析。受管製物料的檢測結果均在有關製造商的限量範圍內。

精度研究

在Architect i1000分析儀上分析3個水平對照，在5個不同的天，每次5個重複進行PCT測定，以估計分析內和分析間的不精密度。該研究遵循臨床和實驗室標準協會(CLSI)指南EP15 A3[7]。

統計分析

采用線性回歸分析、Spearman相關係數和Bland-Altman差異圖比較不同測量方法[8]，以kappa統計量[9]計算在0.1、0.25、0.5 ug/L三個臨床診斷截斷點的一致性。統計學意義水平設定為p<0.05。使用MedCalc 15.0版本(MedCalc Software, Ostend, Belgium)進行統計分析。

結果

在0.05 ~ 24 ug/L範圍內，將Architect PCT測定法與Elecsys和Vidas PCT測定法進行比較，觀察到良好的相關性。Architect與Elecsys之間的線性回歸係數(R)為0.972(圖1,y=0.014+0.962 2x)， Architect與Vidas之間的線性回歸係數(R)為0.954(圖2,y=0.024+0.773x)。

圖1:Architect PCT和Elecsys PCT的線性回歸

圖2:Architect PCT和Vidas PCT的線性回歸

Bland-Altman圖分析結果如圖3和圖4所示。Architect和Elecsys之間的平均偏差為-0.1 ug/L, 95%的一致性上限為-1.2 ~ 1.0 ug/L(圖3)。Architect和Vidas之間的平均偏差為-0.5 ug/L, 95%的一致性上限為-3.5 ~ 2.5ug/L(圖4)。

圖3:Architect PCT與Elecsys PCT的絕對差Bland-Altman圖(ug/L)，實線為平均偏差;虛線表示在95%置信區間內一致性的上、下水平

圖4:Architect PCT與Vidas PCT的Bland-Altman圖(ug/L)的絕對差值，實線為平均偏差;虛線表示在95%置信區間內一致性的上、下水平

在0.1、0.25和0.5ug/L的臨床相關臨界值(表1)下，與Vidas和Elecsys PCT測定法進行比較，評估Architect PCT測定法的診斷性能。結果表明，在0.1、0.25和0.5ug/L的三個相關診斷閾值下，Architect PCT測定法表現出與兩種參考方法相當的性能。在0.1 ug/L、0.25 ug/L和0.5 ug/L閾值下，Architect和Vidas的診斷一致性分別為93.6% (κ 0.84)、93.6% (κ 0.82)和98.7% (κ 0.97)。在0.25 ug/L和0.5 ug/L條件下，Architect和Elecsys的一致性最好，分別為93.6% (κ， 0.87)和100% (κ， 1)。

降鈣素原切斷量(微克/升)	Elecsys	維達
0．1	93.6%;κ,0.76 (95% ci 0.56 -0.96)	94.8%;κ,0.84 (95% ci 0.68 -0.99)
０．２５	93.6%;κ,0.87 (95% ci 0.766 -0.98)	91.0%;κ,0.82 (95% ci 0.69 -0.495)
0．5	100.0%;κ,1 (95% ci 1.00 -1.00)	98.7%;κ,0.97 (95% ci 0.92 -1.00)

表1:在三個不同的診斷閾值下，Architect PCT法與Elecsys和Vidas PCT法的kappa符合率和值比較

精度研究

表2列出了研究結果的摘要。三種PCT濃度水平對照的平均檢測內和檢測間不精密度分別為3.49%和1.25%

水平	N	Intra-assay		Inter-assay
		的意思是	簡曆(%)	的意思是	簡曆(%)
l	25	0.20	3.16%	0.20	1.13%
米	25	1.96	1.68%	1.96	0.90%
H	25	68.41	5.62%	68.41	1.73%
		平均	3.49%	平均	1.25%

表2:Architect PCT分析的精度數據

討論

降鈣素原是細菌感染診斷和預後的有用檢查，通常與血培養或痰培養等其他檢查一起，用於診斷敗血症或細菌性呼吸道感染[10,11,2]。此外，監測PCT濃度可為抗生素治療提供指導，並可在不影響患者預後的情況下減少抗生素的使用。這對重症監護病房的危重病人尤為重要。

在本研究中，評估了新的自動化Abbott Architect PCT分析方法的性能。並與Vidas和Elecsys PCT兩種參考方法進行比較。三種測定方法的測量間隔不同，Architect從0.02到100 ug/L, Vidas從0.05到200 ug/L, Elecsys從0.02到100 ug/L。Architect與Elecsys的總體偏差為-0.1 ug/L, Vidas為-0.5 ug/L。在0.05 ~ 24 ug/L之間，Architect和Elecsys的差異分布不顯著。在PCT濃度低於10 ug/L時，Architect和Vidas的差異不大，而高於10 ug/L時則觀察到負偏性。然而，根據目前的診斷界限，這一微小的差異並不會對細菌感染的診斷產生實質性的影響。

我們的比較結果表明，在0.1、0.25和0.5 ug/L的不同相關診斷閾值下，不同的試劑和技術表現出相似的性能。特別是，在0.5 ug/L的診斷臨界值上，一致性非常好，這反映了發展為嚴重全身感染的中度風險。這類患者應在臨床上密切監測，並在6-24小時內重新評估PCT水平，然而，我們在本研究中發現，采用不同方法測量的PCT水平存在顯著偏差。因此，PCT測量不應與其他監測方法互換使用。

在選擇PCT檢測方法的實驗室時，檢測成本是需要考慮的重要因素之一。Architect PCT分析的校準需要在30天的校準頻率內重複運行6個校準器。當實驗室運行的樣品量很低時，這可能會產生額外的試劑校準成本。

本研究存在一定的局限性，Architect PCT分析法的分析範圍(0.02 -100 ug/L)沒有得到充分評價，樣品僅覆蓋0.05 - 24 ug/L，大部分低於5 ug/L。在本研究中，我們發現PCT低於25 ug/L具有良好的相關性，然而，高降鈣素原(>100 ug/L)的患者被認為是預後不良的獨立預測因素，包括膿毒症、重症監護室中伴有呼吸和循環功能不全的創傷。因此，應考慮對降鈣素原水平過高的患者進行進一步評估。此外，由於可用試劑數量有限，本研究未對Architect PCT檢測的敏感性、特異性和線性度進行評估。

結論

我們的研究結果表明，新的Abbott Architect PCT分析與Vidas和Elecsys PCT方法的比較相關性良好。然而，不同方法之間的不同偏差表明，縱向患者監測應該最好使用相同的免疫測定法。總之，Abbott Architect PCT檢測方法適用於臨床常規診斷中用於PCT測量。

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條信息

文章類型:研究文章

引用:梁ecm，侯慈，賴瑞敏。(2017)一種新的自動化Abbott Architect降鈣素原測定方法與Biomerieux Vidas和Roche Elecsys方法的比較。中華臨床檢驗醫學2(2):doi http://dx.doi.org/10.16966/2572-9578.117

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出版的曆史:

收到日期:2017年8月11日

接受日期:2017年9月25日

發表日期:2017年9月29日