摘要

目的:本研究的主要目的是評估一種商業化生產的研究產品——一種無毒外用皮膚血清——在擔心皺紋出現的女性中減少皺紋的能力。

患者和方法:21名Fitzpatrick皮膚I-III型女性誌願者報名參加了這項前瞻性、開放標簽、受試者內對照研究，該研究在單一中心的醫生監督下進行。由於新冠肺炎地區封鎖和旅行限製，一些參與者不得不退出研究，13名誌願者完成了研究。在基線初訪以驗證是否符合方案標準後，誌願者接受了基線無創3D皮膚掃描，並接受了無麻痹毒素的皮膚配方血清(No-Tox^®)開始在自己指定的麵部皺紋部位(前額、鼻唇或眶周)進行局部應用，3周後進行第二次皮膚掃描以監測進展，並在6周後進行最後一次掃描。在所有3次訪問中，最後一次在第一次血清應用後6周進行，以評估臨床和儀器治療的療效。

結果:在治療後3周的第一次隨訪中，皺紋出現了臨床和統計上的顯著減少，並且這種效果一直持續到6周和12周的研究結束。臨床上可測量的皺紋嚴重程度的改善也被觀察到。相比之下，未經治療的區域沒有任何改善。使用這些皮膚掃描的3D成像和定量分析，可以確定療效，在3周第一次就診時已經有了明顯的效果，並在6周及之後注意到進一步的改善。誌願者對血清的耐受性非常好，沒有不良反應或皮膚過敏。

結論:本研究結果證實了無毒血清(No-Tox^®)減少皺紋和細紋的出現。研究產品的抗皺活性在三維皮膚成像中得到證實。這項研究的局限性在於參與者數量少，而且參與者僅屬於Fitzpatrick I-III型皮膚類型。然而，研究結果表明，該血清在其他類型的皮膚中也有潛力，並計劃進行進一步的研究。

關鍵字

皺紋;老化;光化性損害;臨床評估;儀器的評估;化妝品

簡介

如果我們把人類的皮膚僅僅看作是一層物理膜，皺紋的產生從根本上來說是因為角化細胞硬化的表皮覆蓋著更柔軟更厚的真皮層[1]。皮膚老化——無論是由紫外線(UV)損傷引起的外在老化，還是由生理因素引起的內在老化——都是以皮膚起皺、失去彈性和粗糙的外觀為特征的。大約80%的皮膚老化是由於陽光的傷害，在新西蘭和澳大利亞，或在美國的陽光地帶，如佛羅裏達和加利福尼亞，這在年輕人中尤其明顯。對女性來說，一個重要的問題是皺紋的出現，在抗衰老藥物和化妝品上花費大量的費用[4]。已經有一些研究評估了不同的減少皺紋的方式。毫無疑問，使用神經毒素麻痹肌肉的侵入性方法可以立即消除動態皺紋，如水平前額紋。研究已經證實注射麻痹毒素如A型肉毒杆菌毒素對肌肉活動引起的動態額頭皺紋的治療效果，其影響可持續16周。另一些人則回顧了注射皮內填充物的效果，如使用膠原基材料和透明質酸的非永久性皮膚填充物，或半永久性填充物，包括聚甲基丙烯酸甲酯、聚l -乳酸和羥基磷灰石鈣微球，或永久性填充物，包括試圖減少皺紋和皺紋的矽膠。非藥物化妝品麵部精華液與洗麵奶和潤膚霜結合使用，也被研究用於光損傷皮膚，可能改善細紋和皺紋的出現[7]。我們的目的是測試這種商業生產的血清含有植物和浮遊生物提取物，多肽，並且不含麻痹毒素，以評估這種皮膚血清快速減少皺紋和皺紋的能力。

No-Tox^®(No-Tox Limited, New Zealand)，是一種局部血清，含有Plukenetia瓦種子提取物、浮遊生物提取物、葡萄糖胺、透明質酸、煙酰胺、銅等混合成分。血清不含任何麻痹性毒素。這種商業化生產的專有混合物中的許多成分都對皮膚有益，並增加彈性蛋白和膠原蛋白的產生。例如Plukenetia瓦油已被證明是一種有效的保濕劑，具有低刺激潛力[8];葡萄糖胺已被證明可以改善皮膚水合作用，減少皺紋，並幫助控製皮膚色素沉著紊亂，無論是局部使用還是口服[9]。幾乎所有的透明質酸護膚產品都能顯著改善皮膚水分和整體彈性值，因此有減少皮膚皺紋的潛力[10]。然而，對於透明質酸，這種關係不是線性的，因此在配方中使用的數量是重要的。例如，像Shar Peis這樣有皺紋的狗患有粘液沉積症——皮膚組織和血液中的透明質酸水平都很高——這是由於HAS2酶的活性(過表達)過量，產生更多的透明質酸[11]。外用製劑中的煙酰胺已被證明能改善皮膚皺紋，減少發黃，提高皮膚彈性[12]。幾項已發表的研究表明，將生育酚(維生素E)局部應用於皮膚可減少曬傷後的紅斑、慢性uvb引起的皮膚損傷和致癌作用[13,14]。在使用免疫組化[15]的研究中，銅和肽複合物被報道可以增加皮膚中的膠原蛋白水平。

該產品被提供給我們的皮膚臨床為基礎的研究實驗室，以獨立評估其性能和效果持續時間，作為一種潛在的皺紋減少局部劑在誌願者女性。這項研究得到了一個獨立的倫理委員會的批準，進行時沒有經濟誘因。研究人員和參與者都沒有因進行這項研究而獲得報酬。該研究的目的隻是評估該產品是否有助於減少皺紋。該產品在美國加利福尼亞州Chatsworth的一家工廠進行商業生產(FDA注冊FEI No. 3006402197)。

對象和方法

該研究計劃為一項前瞻性、開放標簽、受試者內對照、單中心研究，在21名皮膚病學控製的健康女性受試者中進行。該研究的目的是在新西蘭的一個單一地點進行一項為期12周、單一研究、開放標簽的對照試驗，並在開始治療後的0、3、6和12周進行評估。受試者和研究人員對治療血清沒有盲目，因為治療血清是在其商業包裝中提供的。但由於Covid-19，研究的持續時間縮短了，隻有13名參與者參加了6周的研究。兩名參與者在12周時進行了最後一次掃描。

研究對象被要求為女性誌願者，年齡在30-75歲之間，關注麵部皺紋。受試者的平均年齡最終為54歲(41-72歲)，Fitzpatrick皮膚類型為I - III，麵部皮膚早期至晚期受損。除了提供知情同意的能力外，在皮膚類型方麵沒有特殊的排除，受試者可以繼續使用他們正常的美容方案。他們被要求每天晚上在清潔皮膚後使用一次研究血清，並在治療的特定皺紋區域抹上2-4滴血清。一般來說，參與者從自己選擇的三個美容重點區域之一塗抹血清——前額/眉間區、上唇(皮膚唇部和鼻唇部區域)和眼部(魚尾紋或眼下區域)——針對細紋和粗紋(圖1)。

圖1:參與者選擇在他們最關注的皺紋部位——額頭(垂紋)、眼周(魚尾紋或下眼瞼)或上唇紋上使用血清。

這項研究是根據《赫爾辛基宣言》關於人體醫學研究倫理原則的指導方針進行的。所有參與者在閱讀研究文件後，都表示了知情和自願的同意，同意參與研究，並同意發表他們的任何或所有圖像和照片。為履行《赫爾辛基宣言》的各項原則，從邀請之日起至有效參加研究之日，允許超過30天。

臨床評估

拍攝數碼照片，評估受試者的皮膚狀況，包括麵部線條和皺紋，局部塗抹部位的適宜性，以及每次訪問時記錄任何皮膚反應或過敏。臨床(紅斑、幹燥和脫皮)和主觀(灼燒、刺痛、瘙癢或刺痛)的刺激體征和症狀采用4分製(其中0=無，1=輕度，2=中度，3=嚴重)進行評估。

定量測量儀器

皺紋測量可以直接使用臨床評分和儀器，如表麵光度法，或間接使用皮膚皺紋複製技術和嵌入多種皮膚掃描儀的計算機軟件分析。在本研究期間，使用Pear 3D (DermaQuip LLC, Marietta, GA 30062, USA)掃描儀測量皺紋和皺紋變化百分比。

近年來，人們使用各種3D皮膚掃描儀對皺紋和皺紋進行了非侵入性研究。這些掃描儀使用多種光源——標準的白熾燈、紫外光和偏振光。標準閃光燈可以識別斑點、皺紋、皮膚紋理和毛孔，紫外線閃光燈用來分析紫外線損傷和卟啉。交叉偏振閃光燈有助於觀察棕色斑點和紅色區域。

在本研究中使用的Pear 3D係統使用三種光源:普通光源、偏振光源和紫外線光源。自動對焦的分辨率為1500萬自動像素。普通光用於斑點，皺紋，紋理和毛孔分析。紫外線是用來評估表麵下的太陽損傷，以及皮膚上的細菌計數。偏振光用於表麵陽光損傷和分析皮膚上的血管。

研究團隊在皮膚掃描儀的使用和技術方麵經驗豐富。VISIA (Canfield Imaging Systems, NJ, USA)類似於Pear 3D，但增加了RBX技術，對分析棕色和紅色斑點[16]很有用。ANTERA 3D (Miravex Limited)是另一種設備，它包含一個用於圖像采集的相機和相應的皮膚分析軟件。結果來自於獲取的圖像數據的空間和光譜分析，通過不同方向不同波長的led照射皮膚獲得。ANTERA 3D使用計算機分析這些圖像之間的差異，並在2D和3D[16]中重建表麵。為這項研究選擇的Pear 3D係統使用方便，結果在同一個人身上可重複，而且Pear 3D掃描儀聚焦目標區域，在3D中評估皺紋的能力對該研究團隊特別有用。皺紋百分比的變化被表示為皺紋可見性增加或減少的百分比。一般來說，寬度和深度小於1mm的皺紋被定義為細紋或皺紋，寬度和深度大於1mm的皺紋被定義為粗紋[17]。皺紋量的變化實質上是細紋和粗紋變化的平均值。

統計分析

與基線相比，在3周、6周和12周時，對三個選定部位(前額、嘴唇和眼睛區域)的皺紋變化進行了儀器測量。這些數據是由奧克蘭理工大學數學科學和統計係獨立分析的。采用線性回歸模型和非配對t檢驗分析皺紋變化與年齡和治療部位等變量之間的關係，以及治療部位和未治療部位之間皺紋體積的統計差異。結果如圖2和3所示。

結果

最初，這項研究在12周的時間裏有21名參與者，但由於一些與研究無關的問題，最終的人數較低。由於新西蘭政府實施的Covid-19區域封鎖限製，13名參與者隻能在0、3和6周時參加掃描，因此研究時長縮短了6周，因為此時實施了第二次政府封鎖。因此，共對13例至6周的患者和2例至12周的患者進行了定量儀器和數據分析。分析在處理和未處理的部位進行——例如，如果一個人選擇在額頭區域應用研究血清，也會在未處理的部位分析皺紋的平均變化，以提供參與者對照組。一名參與者被排除在最終的分析之外，因為血清被塗在臉上的多個部位，這可能會影響到對照組。

在r中建立了線性回歸模型。零假設是零的p值不顯著，即在治療和未治療的地點之間或按位置分割時，無效為零。

在統計學上，治療和未治療部位的皺紋體積顯著減少(p值:(表1)。當與麵部的特定位置進行比較時，0-3周時，不同區域之間的療效沒有統計學差異，但在3-6周時，注意到有差異——眼瞼和上唇區域的皺紋/皺紋減少比前額更大(圖3)。參與者的年齡似乎在0-3周或3-6周時都沒有影響療效(p值:0.4551)(圖2)。與未治療的區域相比，所有麵部區域都有統計學上的顯著改善。

圖2:所有參與者都注意到皺紋減少，年齡在0-3周或3-6周期間似乎沒有顯著差異。

圖3:在3-6周期間，與前額相比，上唇和下眼瞼/魚尾紋區域顯示出統計上更大的皺紋減少。與未經治療的部位相比，所有部位的皺紋都有統計學上的顯著減少。

	年齡	t0-3	t3-6	t6-12	u0-6	名字的首字母	位置
1	54	6	-11年	NA	3.	小	唇
2	44	5	4	NA	7	MB	額頭
3.	52	6	3	NA	10	JM1	唇
4	52	－1	4	NA	4	西南	額頭
5	62	－1	－2	－2	6	JC	唇
6	52	-22年	-15年	NA	4	JM2係列	唇
7	41	－2	5	4	12	JW	額頭
8	72	-14年	7	NA	12	LW	額頭
9	55	3	-18年	NA	6	KJ	唇
10	62	－10	4	NA	13	DM	額頭
11	55	7	－10	NA	5	亞曆山大-伍爾茲	眼睛區域
12	48	-12年	-17年	NA	4	JT	眼睛區域

表1:0-3周，3-6周，6-12周治療部位，0-6周未治療部位的皺紋體積變化百分比(t=時間)。

功效

研究血清在使產品使用區域的粗皺紋和細紋逐步減少方麵的效果可以由研究者證明(臨床照片(圖4))，進一步由儀器分析(使用Pear 3D掃描儀(圖5))確認，最後由統計結果證實(圖6)。

圖4:臨床照片前後的例子表明細皺紋和粗皺紋減少。

圖5:麵部掃描的代表性圖像顯示，3周後前額皺紋減少;重要的是未經治療的區域沒有任何減少。

圖6:粗紋和細紋在研究期間的百分比變化。

麵部血清顯示在研究期間細紋和皺紋出現的組內顯著改善。定量測量的顯著改善(P≤0.05)，即皺紋深度百分比的減少早在第3周就可見到，在第6周逐漸改善，並在第12周保持不變。粗紋和細紋均有臨床變化，但細紋的變化更為明顯。

到第三周，參與者的掃描顯示可見皺紋平均減少了7%(範圍為1%到22%)。到第6周，麵部掃描顯示，皺紋的減少比第3周進一步減少了8%(範圍為2%到18%)。相比之下，未經處理的區域皺紋會輕微增加，這進一步說明了新西蘭南半球強烈的陽光對照片造成的傷害，尤其是對皮膚白皙的人。暴露在陽光下較多的參與者在未經處理的區域表現出更明顯的惡化。13名參與者中有11人(84.2%)認為他們治療區域的細紋和粗紋明顯減少，到第6周，衰老跡象明顯減少。

耐受性

總的來說，研究血清的耐受性非常好。在研究的任何階段，任何參與者都沒有報告皮膚刺激、紅斑、幹燥、發紅或刺痛，即使是在眼瞼區域使用它的參與者也沒有報告。

結論

研究結果證實，當使用研究血清粗皺和細紋減少顯著的美感改善。研究血清的抗皺活性在3周和6周後逐漸保持，甚至更長時間。這些效果是獲得的，沒有不希望的效果或皮膚反應。統計上顯著的改善出現在臨床和使用定量研究參數早在3周。

受試者滿意度和皮膚耐受性均極好。總之，這項研究表明，這種無毒皮膚血清(NoTox®)在減少皺紋和細紋方麵是有效的。該研究受到樣本量小的限製，盡管在參與者控製臂內，取得的統計結果確實顯示非常顯著的p值。另一個限製是，參與者被限製在Fitzpatrick I-III型皮膚，這不是設計的，而是由於研究期間的可用性，以及當地的主要人口。結果並不表明該血清對其他皮膚類型無效。未來計劃對其他皮膚類型的參與者進行更多正式的臨床試驗，包括皮膚活檢研究(以了解膠原蛋白和彈性蛋白的變化)，以增強本研究的發現

致謝

作者感謝誌願者參與了這項研究。作者特別感謝奧克蘭理工大學數學科學係的Robin Hankin對數據進行了獨立的統計分析。

信息披露

正義與發展黨沒有利益衝突需要宣布。SP是NoTox (NZ) Limited的股東。本研究沒有向任何一方支付或授權任何費用或撥款。AK和SP都是皮膚外科診所的員工。

參考文獻

1. Paul SP(2016)皺紋的認識論:從地質學和解剖學到生理學。國際生物醫學雜誌6:237-239。［Ref。］
2. 張鬆，段娥(2018)對抗皮膚老化:從長凳到床邊之路。細胞移植27:729-738。［Ref。］
3. Friedman O(2005)與麵部衰老相關的變化。麵部整形外科診所北Am 13:371 -380。［Ref。］
4. Kazanci A, Kurus M, Atasever A(2017)老化對皮膚變化的分析。皮膚修複技術23:48-60。［Ref。］
5. Susmita, Kolli NND, Meka S, Chakravarthi SP, Kattimani VS，等(2016)A型肉毒杆菌毒素治療動態額頭皺紋的臨床研究。臨床診斷雜誌10:ZC127-ZC131。［Ref。］
6. Lin ZYW, Shah V, Dhinakar A, Yildirimer L, Cui WG，等(2016)皮膚內填充物微創治療麵部衰老。Plast aesthetic Res 3: 72-82。［Ref。］
7. mccalle - perez F, Stephens TJ, Herndon JH Jr.(2011)一種麵部血清對細紋、皺紋和光損傷皮膚的療效和耐受性。中華皮膚科雜誌4:51-54。［Ref。］
8. Soimee W, Nakyai W, Charoensit P, Grandmottet F, Worasakwutiphong S，等人(2020)評估皂角油的保濕和刺激潛力。美容雜誌19:915-924。［Ref。］
9. 葡萄糖胺:一種對皮膚和其他方麵有好處的成分。美容雜誌5:309-315。［Ref。］
10. Pavicic T, Gauglitz GG, Lersch P, Schwach-Abdellaoui K, Malle B，等。不同分子量的透明質酸乳膏基新配方在抗皺治療中的功效。皮膚病學雜誌10:990-1000。［Ref。］
11. Olsson M, Meadows JRS, Truve K, Pielberg GR, Puppo F, et al.(2011)中國沙佩犬中一種新的不穩定HAS2複製上遊易導致一種品種定義的皮膚表型和周期性發熱綜合征。PLoS Genet 7: e1001332。［Ref。］
12. Bissett DL, Oblong JE, Berge CA(2005)煙酰胺:一種B族維生素，改善老化的麵部皮膚外觀。皮膚科31號:860-865。［Ref。］
13. McVean M, Liebler DC(1999)維生素E化合物和防曬霜預防DNA光損傷:紫外線吸收和細胞吸收的作用。Mol Carcinog 24: 169-176。［Ref。］
14. Schagen SK, Zampeli VA, Makrantonaki E, Zouboulis CC(2012)發現營養和皮膚老化之間的聯係。Dermatoendocrinol 4: 298 - 307。［Ref。］
15. Abdulghani A, Sherr A, Shirin S, Solodkina G, Tapia E，等(1998)含有維生素C、銅結合肽霜和褪黑素的外用麵霜與維A酸對正常皮膚超微結構的影響——一項初步的臨床、組織學和超微結構研究。臨床結果1:136-141。［Ref。］
16. 馮琳明，何偉，呂安琪，C元宇，恒旭等。(2018)兩種皮膚成像分析儀器VISIA的比較^®Canfield vs ANTERA 3D^®從Miravex CS。皮膚修複技術24:3-8。［Ref。］
17. Manriquez JJ, Cataldo K, Vera-Kellet C, Harz-Fresno I(2014)皺紋。1711年。［Ref。］

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條信息

Aritcle類型:研究文章

引用:Knight AM, Paul SP(2021)在誌願者身上評估和測量一種無毒素皮膚局部血清的減皺性能。J臨床美容皮膚素4(4):dx.doi.org/10.16966/2576-2826.159

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出版的曆史:

收到日期:2020年11月30日

接受日期:2020年12月30日,

發表日期:2021年1月11日