摘要

光老化是年齡老化和引發氧化應激的幾種外源性物質結合的結果。它的特征是真皮和表皮的變化，如皺紋，幹燥，下垂，粗糙和色素的變化。其中一些跡象是細胞外基質(ECM)成分受損的結果，這些成分在健康皮膚中代表真皮的結構和功能支持，但在衰老皮膚中減少或功能失調。

這項研究的目的是確定一種新的美容療法的抗衰老效果與分泌的組合Cryptomphalus aspersa(SCA)，維生素C和蛋白多糖。20名白種人和20名亞洲女性受試者都有輕度到中度的光老化，她們每天在臉上使用兩次該產品，持續30天。為評估其抗衰老效果，分別在基線、15天和30天進行臨床評價和儀器測定。評估皮膚的滋潤度、皮膚亮度、皮膚緊致度和彈性以及皺紋深度。

結果顯示，在開始治療15天後，所有這些參數都有顯著改善，在研究期結束時，這些參數保持了改善，在某些情況下，改善有所增加。此外，所有患者均有良好的耐受性。由於這種新型藥妝產品在改善光老化的主要症狀方麵取得了快速的效果，可以作為光老化的強化治療手段。

關鍵字

皮膚的再生;抗衰老的;細胞增殖;真皮再生;維生素C;蛋白聚糖;Cryptomphalus aspersa；光明

簡介

整體衰老是一種體細胞過程，包括生理功能、代謝效率、抗應激能力和適應潛能的逐漸喪失，它表現為內在老化或時間老化。內在老化的皮膚被定義為一種退化過程，由於生理功能和能力(遺傳、體細胞能力和成分)的下降。皮膚是人體與外界環境相互作用的主要器官，人體暴露在不同的物理、化學和機械因素下，可使皮膚惡化，誘發外源性老化，也稱光老化。這是一種獨特的惡化過程，由環境因素引起，如太陽輻射、汙染、有毒產品和生活方式，包括營養和壓力[1]。

光老化是一種顯著的皮膚轉變，臨床表現為皮膚發黃、斑點狀色素沉著、易碎性增加和表皮質地粗糙，而由於真皮層老化結構而出現粗皺紋、下垂和毛細血管擴張。

組織學和超結構研究表明，在衰老過程中，表皮失去了消除損害皮膚完整性的外源性大分子損傷的能力。此外，細胞外基質(ECM)成分積累和降解之間的平衡失衡會引發真皮損傷，包括I型膠原原纖維受損和紊亂，以及異常彈性物質的大量積累[3,4]。因此，由於皮膚的抗拉強度和力學性能依賴於ECM，它的惡化是起皺和下垂的主要原因。尋找安全和非侵入性的治療方法來逆轉皮膚老化跡象仍然具有挑戰性。

通常用作抗衰老活性劑的主要有兩類:抗氧化劑和細胞調節劑。抗氧化劑(維生素、多酚和類黃酮)通過減少組織中活性氧的濃度來減少膠原蛋白的降解。細胞調節因子(類維生素a、多肽和生長因子)直接影響膠原蛋白代謝，影響膠原蛋白生成[6]。一種結合了這兩組活性物質的新產品被開發出來。

新產品的三種主要成分之一，軟體動物的分泌物Cryptomphalus aspersa(SCA)是一種已注冊的活性藥物(IF Cantabria, SA)，具有宣稱的抗衰老作用。Cryptomphalus aspersa是蝸牛科的腹足類動物，其分泌物是通過一種專利程序獲得的，即對蝸牛進行刺激，過濾其分泌物，然後收集並測試其純度和活性。需要強調的是，在這個過程中蝸牛不會受到傷害。

SCA富含糖胺聚糖和生長因子(gf)，通過刺激皮膚的生化、結構和功能過程誘導皮膚再生[7,8]。SCA是一種具有抗氧化活性的成分，可促進成纖維細胞和角質形成細胞的生理、增殖和遷移，改善細胞結構，促進ECM的分泌和組裝[9,10]，從而有助於防止光損傷皮膚的彈性增生。SCA也被證明可以加速傷口愈合[11]。

對SCA效果的臨床評估表明，SCA局部治療逆轉了一些光老化的特征，增加皮膚厚度，減少粗糙和皺紋深度，可能是由於其抗氧化和基質重塑作用[12]。在最近發表的一項研究中(一項多中心、雙盲和隨機研究)，25名患有中重度麵部光損傷的患者在一側接受SCA治療，在對側接受安慰劑治療，療程為12周。結果顯示，12周後有效成分側眼周節律明顯改善(P=0.03)， 8周和12周時質地改善程度高於安慰劑。作者的結論是，每天應用含有SCA的產品被證明是有效的，對改善粗眼周節律和細麵節律[13]有良好的耐磨性。

以獲得一種具有再生特性，增強皮膚光澤和保濕的新型藥妝產品為理念;SCA(真皮再生)與兩種有趣而著名的成分結合在一起:維生素C(亮度)和蛋白多糖(保濕)(Endocare)^®C不含純濃縮油)。

蛋白多糖(pg)是由附著在核心蛋白上的糖胺聚糖和/或寡糖組成的。PGs可與ECM的其他組分相互作用，使ECM趨於穩定，從而促進低分子量溶質[14]的水化作用，提高滲透性。三種主要的pg存在於人的皮膚中:verican, decorin和decorin的分解分解片段，稱為decorunt[15]。UV照射[16]可下調幾種pg的mRNA水平，這可能對真皮基質結構有減弱作用，UV可下調I型前膠原蛋白[17-19]。

維生素C (l -抗壞血酸)對色素沉著[20]有重要作用。它是一種強大的抗氧化劑，因為它有能力清除活性氧(ROS)。這種抗氧化作用防止黑素生成，使維生素C成為抗氧化自由基的防禦劑，也是治療光老化和其他皮膚疾病的有效藥劑。維生素C誘導的亮白和亮白效果也是通過其抗氧化作用[22]或抑製酪氨酸酶活性介導的通過其降低酶促生成的o-醌的能力，從而減少黑色素的合成[23]。它還能最大限度地減少氧化黑色素，使色素沉著從黑色變為古銅色。局部應用維生素C已被證明具有光保護作用和防止一些光化損傷[24-26]。通過阻止紫外線輻射(包括誘發黑色素形成的UVA和UVB)的吸收，也能誘導皮膚提亮[27]。此外，這種維生素是合成另一種抗氧化維生素維生素e所必需的。此外，維生素C能夠抑製負責膠原降解的基質金屬蛋白酶(Matrix-Metalloproteinases, MMPs)，增加MMPs的組織抑製因子(Tissue Inhibitor of TIMPs, Tissue Inhibitor of TIMPs)和膠原I、III的水平，因此能夠改善衰老皮膚的皺紋和萎縮[28,29]。這種新產品含有高濃度穩定的維生素C。

對於這種新型藥妝產品，我們進行了一項臨床研究，目的是基於非侵入性和客觀的評估技術，證明這些組合是否可以改善不同的皮膚老化參數。

材料和方法

研究人群

該研究設計為前瞻性和多中心臨床試驗，誌願者在治療前後作為自己的內部控製。招募了40名誌願者(50%為白種人，50%為亞洲人)。這項研究是由意大利Complife集團完成的，招募了高加索人群;康菲集團中國，招募亞洲人。

參與本研究的受試者在皮膚科醫生的監督下進行篩選和登記，包括年齡在30-45歲之間的健康女性，按照納入和不納入標準。

使用15天和30天後，通過能夠測量皮膚保濕(Corneometer®CM 825 (Courage+Khazaka, electronic GmbH)、彈性(Cutometer)的無創儀器技術評估產品療效^®MPA 580，亮度(色度計®CM-700D(柯尼卡美能達)和皺紋深度(Primos 3D Lite)^®．PRIMOS(快速移相已測量皮膚)。參與研究的受試者通過一份特定的問卷進行自我評估。

入選標準

在這項研究中，隻納入了30至45歲的健康女性受試者。隻有亞裔和白種人被包括在內。白種人受試者的光類型從II到IV不等。隻有那些有輕度到中度光老化臨床體征的患者被收治。不想在接下來的幾個月裏懷孕，使用避孕措施是必要的。此外，所有被招募的受試者都不應伴有疾病，也不應使用其他可能幹擾或影響結果的局部或全身產品。排除對產品成分過敏者。

治療方案

受試者被要求在研究期間不使用其他所有護膚品、化妝品、營養補充劑和藥物，隻添加新的強化治療Endocare^®C純濃縮無油(Cantabria實驗室)。每日局部使用一次安瓿，每天兩次，持續30天。研究產品中主要成分含量的濃度，Endocare^®C無油濃縮液:分泌Cryptomphalus aspersa(SCA): 20%;純維生素C和穩定:15%和蛋白質多糖2%。該測試在秋季和初冬期間進行。

臨床評估

皮膚科研究者和受試者在基線(T0)、15天(T1)和30天(T2)完成了療效、安全性和耐受性評估。

此外，采用非侵入性生物工程技術測量儀器多參數方法^®CM825)，皮膚亮度測量(色度計^®CM-700D)，皮膚彈性和皮膚緊致度測量^®MPA 580)和皺紋深度(Primos 3D Lite^®）.

皮膚保濕(水分指數):使用的設備是角質計^®CM 825 (Courage+Khazaka, electronic GmbH)。

的Corneometer^®方法是根據水的介電常數。Corneometer^®量化皮膚表麵的水分含量。電散射場穿透皮膚的第一層(10-20 μ m)，並決定了介電。它提供了皮膚狀況和類型的數據，以及藥物和化妝品對角質層水分含量的影響。

皮膚亮度(發光值):色度計^®設備采用CM-700D(柯尼卡美能達)。垂直對準的分光光度計非常適合於形狀和彎曲樣品的精確和重複的顏色測量。所測參數為8°光澤度值。

皮膚彈性緊致:Cutometer^®MPA 580是一種無創吸引裝置，測量任何皮膚表麵的垂直變形。它由計算機控製，自動進行計算並存儲結果。在設備中創建一個負壓(450毫巴)，皮膚被拉入探針的孔徑2秒，並在規定的時間(2秒)後再次釋放。在探頭內部，穿透深度由非接觸式光學測量係統決定。在測量過程中，皮膚對負壓的抵抗力和恢複原狀的能力實時以曲線的形式顯示出來。測量皮膚緊致度R0和皮膚彈性R2參數。

皺紋深度:使用的設備為Primos 3D Lite^®．PRIMOS(快速移相已皮膚測量)是一種光學3D在活的有機體內基於數字條紋投影的皮膚測量裝置。它提供了三維地形。該成像係統使用數字微鏡設備(DMD Texas Instruments, Irving, TX)將光線投射到皮膚的特定表麵，並用CCD相機記錄圖像。皮膚表麵微地形構造采用時間相移算法生成三維圖像。

因此，受試者被要求回答一份自我評估問卷的問題。使用產品後發生的任何不良事件都由皮膚科醫生嚴格跟蹤。在這種情況下，皮膚科醫生描述了事件的性質、持續時間和強度。

統計分析

亞洲組、白種人組5個參數(水分指數、輝光值、緊度指數、彈性指數、皺紋深度)在基線、T15、T30之間的結果變量均值比較，分別采用配對樣本t檢驗或非參數Wilcoxon檢驗。計算所有結果指標在這些比較期間的平均差異。當P<0.05時，認為差異顯著。零假設是T0和T15直到T30的均值相等。

結果

40名女性(20名亞洲人和20名白人誌願者)成功完成了這項研究。皮膚科研究者和受試者均未發現耐受性問題。患者無不良事件報告。治療15天和30天後，皮膚潤濕性的改善最大，亞洲和高加索女性的改善率分別為235%和262%(圖1A)。

圖1:(A)皮膚滋潤度顯著改善(水分指數);(B)皮膚亮度(Glow Value)顯著改善;(C)皮膚緊致度顯著改善(R0參數);(D)皮膚彈性(R2參數)在不同時間均有顯著改善:T0為基礎就診，T1為治療後15天，T2為治療後(30天)。各組各時間點發生的變化與基線比較差異有統計學意義(*p≤0.001)。

在治療的前15天，兩組患者的亮度都有明顯改善，在治療一個月後甚至更高。在亞洲和白種婦女中分別檢測到16,2%和13,3%的改善(圖1B)。的Cutometer^®白種人和亞洲受試者的基礎最大皮膚伸長率都有所下降。參數的減小與硬度皮的增大有關。結果顯示，在最初的15天內就取得了顯著的改善，甚至更高，在一個月的治療後也有顯著的改善。在亞洲和白人女性中，觀察到的硬度分別增加了8.1%和9.6%。雖然彈性參數與皮膚恢複到基礎狀態的能力增加有關，但在亞洲和高加索受試者中，彈性參數分別增加了7.4%和8.2%(圖1C和1D)。與基礎水平相比，治療15天後皮膚皺紋明顯減少，治療30天後效果更明顯(圖2)。

圖2:使用Primos 3D Lite測量產品15天和30天後，深度皺紋有明顯改善^®．這些圖片屬於一名白人誌願者。

95%的白種人和100%的亞洲受試者對SCA、維生素C和蛋白多糖組合配製的新型藥妝治療的可接受性表示積極意見。

討論

一些論文通過報道維生素C的恢複活力的效果引起了人們的注意。Fitzpatrick等人。[28]用一種配方維生素C複合物治療了10名患者，該複合物含有10%的抗壞血酸和7%的抗壞血酸四己基癸基，在無水多晶矽凝膠堿的一個麵和非活性多晶矽凝膠堿的另一個麵。在研究之前和第4、8和12周進行了皺紋、色素沉著、炎症和水化的主觀臨床評估。4例患者在12周時對側頰進行了2mm穿孔活檢，並用蘇木精和伊紅染色原位用反義探針對I型膠原蛋白mRNA進行雜交研究。他們發現，在光老化分數下降的情況下，維生素c處理的一側有統計學上的顯著改善。活組織檢查顯示Grenz區膠原蛋白增加，I型膠原蛋白mRNA染色增加。

Crisan等人最近發表了一篇有趣的論文。[30]評估了60名健康女性，分為三個年齡組(20-35歲、35-50歲和>50歲)。每組15例患者使用維生素C溶液治療，每年齡組5例患者作為對照組，使用安慰劑保濕霜治療。在基礎時間、治療後40天和60天用高頻超聲進行評估。經局部維生素C治療後，他們得出結論，蛋白質合成和膠原合成顯著增加，這與超聲檢查顯示的中、高回聲像素增加有關。他們還得出結論，這種改善在40-50歲之間的婦女中更好，在51歲以上的婦女[30]下降。

在目前的研究中，我們顯示了在局部應用維生素C與蛋白多糖和SCAduring僅一個月時，一些皮膚老化跡象的客觀改善。

皮膚的滋潤是非常重要的感知一個健康和有吸引力的皮膚。該參數是達到最大改善的參數。保濕效果能使皮膚更柔軟，外觀更好，給患者帶來舒適的感覺，這對治療依從性至關重要。

我們認為，亮度可以歸因於維生素C的作用。研究表明，維生素C介導的酪氨酸酶活性降低似乎是由抗氧化活性[22]、通過減少酶促生成的鄰醌[23]和抑製酪氨酸酶活性引起的，正如Choi等人最近發表的一篇論文所示。Choi等人在該論文中使用局部維生素C和Western blot分析治療20名患有半臉離子導入的黃褐斑患者。結果表明，維生素C抑製酪氨酸酶的表達，因此是黑色素生成的抑製劑[31]。

多項研究表明，皮膚黏度計所獲得的皮膚粘彈性值，顯示皮膚的生物力學特性，隨著年齡的增長而下降[32-34]。此外，照片老化真皮中I型和III型膠原蛋白水平顯著降低，真皮-表皮連接處的錨定纖維減少(DEJ;真皮乳頭層[35]中富含纖原蛋白的微纖原結構丟失。已知光老化的這些組織學方麵可以通過本研究的局部產品上的三種成分的作用而恢複。皮膚彈性和緊致的改善與皺紋深度的改善是一致的。這三種跡象可以通過紫外線照射後真皮的保存、真皮成分的刺激修複以及這些局部活性成分聯合促進真皮合成的誘導來解釋。

在目前的研究中，亞洲和高加索婦女的緊實度和彈性顯著增加。在治療的頭15天內，改善明顯，並且在一個月的治療後，改善也明顯。這種作用可以通過保護聚糖對膠原蛋白和彈性纖維的刺激，通過維生素C的作用直接刺激I、III型膠原蛋白的合成，抑製細胞外基質的降解，主要是通過SCA對成纖維細胞的刺激作用，增加膠原蛋白和彈性纖維的含量來解釋。

人們的化妝意識不斷提高，對完整的化妝品有了更高的要求。適當的化妝品可以用於單一療法或作為家庭持續護理，這將提高美容技術在診所執行的結果。大量含有不同天然提取物或維生素的局部抗衰老配方已被聲稱具有保護和恢複活力的作用。本研究對40多名患者(20名白人和20名亞洲女性)進行了研究，我們證明了三種成分的組合所獲得的協同效應，增強了每種成分的作用機製，並在治療15天後盡快客觀地改善了光老化的臨床體征。

觀察到的皺紋明顯減少的原因可能是SCA、維生素C和蛋白多糖誘導真皮成分合成，SCA和維生素C抑製真皮降解及其光保護作用。SCA促進成纖維細胞的存活和增殖，下調基質金屬蛋白酶的表達。Brieva等人[36]證明SCA顯著抑製MMP-1和MMP-2的表達，表明MMP表達的限製有助於其再生特性。SCA作為唯一的治療方法進行的臨床研究表明，在治療3個月後，該成分能夠增加皮膚厚度和減少彈性增生，如組織學研究所示，並減少粗糙度和皺紋深度[12,13]。更有甚者，SCA被證實可以改善頸部和胸部的衰老症狀。

結論

總之，本研究提供了證據，證明一種產品由組合Crytomphalus aspersa分泌(SCA)，蛋白多糖和維生素C，能夠誘導臨床可識別的改善麵部皺紋的外觀使用兩周後。30天後，所有分析參數均不斷改善，具有統計學意義。這種改善與光老化的客觀指標如彈性、緊致、光澤度和皮膚滋潤度的改善有關。該研究支持使用這種組合每天兩次，至少一個月，以達到有效的光老化修複，因此，證明了它作為強化治療。

確認

作者感謝Cantabria實驗室(Industrial Farmaceutica Cantabria, SA)在資助臨床試驗和研究產品(Endocare)方麵的部分貢獻^®C proteoglicanos無油/Endocare^®C純濃縮)支持。

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Aritcle類型:研究文章

引用:Vitale M, Perez-Davo A, C Zhihao, Nobile V, Truchuelo MT(2018)聯合分泌隱毛竹、維生素C和蛋白多糖的一種新型強化抗衰老治療的療效評價。J臨床美容皮膚素2(1):dx.doi。org/10.16966/2576 - 2826.123

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出版的曆史:

收到日期:2017年10月23日,

接受日期:2018年1月10

發表日期:2018年1月16日