摘要

本研究研究了亞致死濃度的敵敵威對非洲鯰魚肝髒標記酶(天冬氨酸轉氨酶、丙氨酸轉氨酶和堿性磷酸酶)、酸性磷酸酶(ACP)、血清總蛋白(STP)、膽紅素、尿素和肌酐的影響。claria gariepinus)在實驗室條件下亞急性期的幼鼠。共有90隻幼鳥claria gariepinus分別飼養體重為200.15±0.09g和體長為26.00±0.00cm的3個試驗組，每組30尾，每組10尾。1、2組分別給予敵敵畏21、43mg/l劑量，3組作為對照，試驗期15 d。分別於第1、5、10和15天進行分析。從結果來看，試驗第1天的生化指標均無顯著變化，其餘試驗日的肝酶、ACP和膽紅素水平均顯著高於對照組(p<0.05)。與對照組相比，試驗組尿素水平升高不顯著，肌酐和血清總蛋白(STP)水平降低不顯著。通過分析和觀察，我們得出結論，給非洲鯰魚注射亞致死濃度的敵敵畏會對肝髒造成一定的損傷，從而影響肝髒酶的水平，ACP水平的升高是致癌性的標誌。

關鍵字

敵敵畏;非洲鯰魚;claria gariepinus；酸性磷酸酶;ALT;AST;蛋白質;膽紅素;高山;生化參數;肝;酶

簡介

工業、采礦和農業生產過程中的汙染物和有毒物質會進入水環境。這可能會對水生生物產生不利影響。農藥是其中的一種汙染物，它對水生環境中的動物包括魚類[1]造成了極大的傷害。這些農藥通過直接施用、噴漂、徑流、淋濾、工廠排放和汙水等多種途徑大量進入水生生態係統，對不同的非目標水生生物產生負麵健康影響[2,3]。敵敵畏(2,2-二氯乙烯基二甲基磷酸;DDVP)是一種有機磷殺蟲劑，廣泛用於農業和控製公共衛生中的家庭害蟲，以及保護儲存的產品不受昆蟲侵害。它也被用作狗、豬和馬的抗寄生蟲藥，作為一種殺肉劑;殺死蒼蠅幼蟲的藥劑[4]。它們通過幹擾膽堿酯酶的活性來發揮作用，膽堿酯酶是人類和昆蟲神經係統正常運作所必需的一種酶。接觸敵敵畏等有機磷酸鹽可能是致命的，並導致呼吸衰竭死亡[5]。

Nwamba HO等人最近就敵敵畏對魚類各方麵影響所做的工作，[6]。他們報告了敵敵畏對非洲鯰魚的影響，並指出了應激反應的有力證據，其特征是過度活躍的遊泳和隨後的不穩定的抽動，直到死亡。在另一份報告中，發現敵敵畏會誘導氧化應激，可能會使幼鯰魚的抗氧化係統不堪承受，特別是在長期接觸高濃度敵敵畏時。敵敵畏對禽鳥肝髒的影響也有報道。魚類是食物鏈中重要的一環，農藥對魚類的汙染會導致水生係統的不平衡，因此研究該農藥對魚類的生化影響是十分必要的。魚是人類和動物飲食的一部分，是蛋白質的重要來源。非洲鯰魚是非洲國家當地人常見的美味佳肴。一般來說，魚類受到除害劑的嚴重影響，主要影響它們的重要器官，如腎髒和肝髒。腎髒在維持機體內部環境方麵起著重要作用。它調節細胞外液的體積和組成，包括酸堿平衡。 The toxic chemicals target the kidney and disrupt its functions causing temporary or permanent derangement of homeostasis [8]. The liver is involved in digestion, absorption and procession of food. It also plays a vital role in detoxification of chemicals, drug metabolism and secretion of bile into the intestines. When these toxic chemicals get to the liver, they can overwhelm it and impair its function which can shut down the system leading to death. In this study, the effects of exposure of sub-lethal dose of dichlorvos on African catfish were examined by finding out the changes in the biochemical indices and activities of marker enzymes.

材料和方法

采購實驗魚及適應環境

共有90隻幼鳥claria gariepinus(非洲鯰魚)取自位於尼日利亞紐黑文埃努古的CJ農業漁場。它們被運到Heidin的漁業單位，尼日利亞埃努古的埃梅內。平均體重為200.15±0.09g，平均體長為26.00±0.00cm。在實驗室條件下馴化兩周後，在半靜態係統中進行試驗。它們每天被喂以3%體重的市售Coppens魚粉。每天更換水溫(24°C, pH為7.5)以去除糞便物質和其他廢物。實驗開始前48小時停止飼喂，整個實驗期間不飼喂。

測試殺蟲劑

農藥;敵敵畏是從尼日利亞埃努古Ogbete市場的一個商業銷售點采購的。

實驗設計:該研究為期15天。這些魚被保存在一個裝有10升淡水的容器中，在實驗室中，水溫和pH值分別為24°C和7.50。分2、3組，每組30尾，每組3個重複，每個重複10尾。1組為對照組，不進行治療。第2組和第3組分別用濃度為21和43mg/l的敵敵畏處理。每個濃度重複三次。試驗開始前48h停止飼養。每組每隔5天(第1、5、10、15天)隨機采集3隻活躍性幼魚，處死後用2ml注射器從尾靜脈抽血進行生化分析。

生化試驗

天冬氨酸轉氨酶(AST)和丙氨酸轉氨酶(ALT)按照Reitman S和Frankel S[9]方法測定，堿性磷酸酶(ALP)按照Randox診斷試劑盒中概述的Babson AL等、[10]方法測定。酸性磷酸酶(ACP)活性、尿素、肌酐和血清總蛋白水平根據Tietz NM等方法和Randox試劑盒中概述的[11]測定。采用總膽紅素[12]和直接膽紅素[12]的Jendrassik-Grof分析方法測定總膽紅素。

統計分析

數據分析采用SPSS version 7統計包進行。采用單因素方差分析(ANOVA)確定組間結果的統計學意義。平均值之間差異顯著(P<0.05)。

結果

敵敵畏農藥對鯰魚第1天的平均效果與對照比較見表1。敵敵畏暴露後第1天的生化指標無顯著變化(p<0.05)。

參數	21 mg / l	43 mg / l	控製
AST	48.00±1.00	42.33±0.58	44.00±1.00
高山	60.33±2.52	60.00±1.00	61.00±1.00
ALT	30.67±3.06	30.00±1.00	33.00±2.00
機場核心計劃	81.33±2.08	86.33±1.53	81.00±1.00
STP	4.33±0.02	4.19±0.01	6.28±0.01
膽紅素	0.66±0.02	0.56±0.015	0.54±0.01
CREATINENE	4.29±0.02	4.43±0.02	4.34±0.01
尿素	68.33±0.58	65.33±2.08	62.67±0.58

表1:敵敵畏農藥對鯰魚的平均藥效(claria gariepinus)。

敵敵畏農藥對鯰魚的平均藥效(claria gariepinus)第5天與對照的比較見表2。與對照組相比，試驗組(21和43mg/l)肝髒酶、ACP和膽紅素水平顯著升高(p<0.05)，尿素水平不顯著升高。STP和肌酐水平無顯著降低。

參數	21 mg / l	43 mg / l	控製
AST	77.67±1.53一個	75.00±5.00一個	40.33±2.51b
高山	97.67±1.53一個	94.33±5.03一個	71.33±3.21b
ALT	51.33±1.53一個	54.67±1.53一個	30.00±1.00b
機場核心計劃	90.67±2.08一個	77.33±2.08b	61.33±1.53c
STP	5.56±0.02一個	5.20±0.02一個	7.02±0.02一個
膽紅素	0.63±0.02一個	0.84±0.02b	0.24±0.01c
肌酸酐	5.36±0.02一個	5.21±0.02一個	5.67±0.01一個
尿素	61.67±1.53一個	56.67±1.53一個	52.67±1.16一個

表2:敵敵畏農藥對鯰魚的平均藥效(claria gariepinus)第5天。
同一行用相同字母標記的值無顯著差異(p<0.05)。

敵敵畏農藥對鯰魚的平均藥效(claria gariepinus)第10天與對照的比較見表3。與對照組相比，試驗組肝髒酶和ACP水平顯著升高(p<0.05)，膽紅素和尿素水平不顯著升高。肌酸酐水平無顯著降低(p<0.05)。

參數	21 mg / l	43 mg / l	控製
AST	64.33±1.53一個	68.00±1.00一個	40.33±1.52b
高山	82.00±1.00一個	82.00±1.00一個	63.67±1.00b
ALT	46.33±1.53一個	44.00±1.00一個	30.33±1.53b
機場核心計劃	91.00±1.00一個	94.33±2.00一個	64.00±1.00b
STP	5.19±0.01一個	5.23±0.58一個	6.30±0.01一個
膽紅素	0.48±0.01一個	0.58±0.01一個	0.42±0.01一個
肌酸酐	4.57±0.01一個	4.53±0.02一個	5.28±0.02一個
尿素	63.67±0.58一個	57.66±0.58一個	60.33±0.58一個

表3:敵敵畏農藥對鯰魚的平均藥效(claria gariepinus)第10天。
同一行用相同字母標記的值無顯著差異(p<0.05)。

敵敵畏農藥對鯰魚的平均藥效(claria gariepinus)，第15天與對照的比較見表4。與對照組相比，試驗組AST、ALP和ACP水平顯著升高(p<0.05)， ALT水平不顯著升高。STP、膽紅素、肌酐和尿素水平降低不顯著(p<0.05)，但在濃度為21mg/l時STP顯著升高。

參數	21 mg / l	43 mg / l	控製
AST	62.00±1.00一個	60.00±2.00一個	38.00±1.00b
高山	74.33±0.58一個	71.00±1.00一個	61.00±1.00b
ALT	32.33±0.58一個	30.33±1.53一個	28.00±2.00一個
機場核心計劃	74.00±1.00一個	70.00±1.00一個	60.00±2.00b
STP	14.21±0.02一個	4.15±0.02b	5.36±0.02b
膽紅素	0.41±0.01一個	0.52±0.01一個	0.58±0.01一個
CREATINENE	5.35±0.02一個	5.30±0.01一個	6.92±0.01一個
尿素	52.33±0.58一個	49.00±1.00一個	54.00±1.00一個

表4:敵敵畏農藥對鯰魚幼魚第15天的平均藥效。
同一行用相同字母標記的值無顯著差異(p<0.05)。

討論

為了維持水生生物，進而保護人類免受因食用受汙染的水產品而對健康造成的危害，必須調查與使用農藥有關的毒性，特別是對魚類等非目標生物的毒性。根據世衛組織[13]報告，敵敵畏對魚類的毒性為劇毒，LC50在0.1-1 mg/L範圍內;中毒性，LC50在1- 10mg/L範圍內;少數報告顯示LC50在10-100 mg/L範圍內為輕微毒性。幾位研究人員研究了敵敵畏對不同魚類的急性毒性作用。Shepard[14]報告96-h lc50值在0.004-11.6 mg/Lof敵敵畏魚體內。Nwamba HO等，[6]也報告了17.21mg/L魚類中96個hLC50，置信下限和置信上限分別為15.78-18.19mg /L

生物化學參數通常被用作魚類對內源性或外源性變化的亞致死反應的指標。本研究以21mg/l和43mg/l濃度的敵敵畏對非洲鯰魚部分生化指標的亞致死毒性作用為研究對象，以1、5、10、15天為間隔，為期15天進行分析。據報道，敵敵畏對生物的毒性取決於性別、濃度、發育階段和接觸期。在試驗的第1天，與對照相比，兩種濃度的肝酶值沒有顯著變化，如表1所示。肝酶(ALT、AST和ALP)是肝功能和肝功能完整性的標誌酶[16,17]。肝細胞損傷時，肝酶釋放到血液中，從而提高酶活性[18,19]。肝酶的升高也與許多組織的細胞壞死有關，特別是肝[20]。結果顯示，暴露敵敵畏後第1天轉氨酶活性無顯著變化(p<0.05)。這說明敵敵畏對肝髒沒有立即造成壞死作用。然而，與對照組相比，穀丙轉氨酶在第5天和第10天的兩種濃度下的肝酶活性均有顯著增加，但在第15天則最低。

這表明對肝組織的損傷依賴於暴露時間的持續時間，第15天觀察到的ALT的不顯著變化可能是由於一些受損組織隨著時間的推移重新生長的結果。因此，敵敵畏對魚類肝髒的毒性作用取決於接觸時間的長短，不一定與表1-4所觀察到的劑量有關。值得注意的是，在整個實驗時間內，ALP水平的上升幅度大於其他肝酶水平。堿性磷酸酶(ALP)是一種膜結合酶，其升高表明肝內膽汁淤積。與正常對照組相比，實驗天數的膽紅素水平也隨之升高。這表明敵敵畏誘導肝內膽汁淤積，從而導致黃疸在實驗組獨立於劑量。

酸性磷酸酶是一種溶酶體酶，可水解ph值為酸性的磷酸鹽。它們存在於許多組織中，如血小板、肺、肝和腎[21]。酸性磷酸酶是前列腺癌[22]的腫瘤標誌物。血清酸性磷酸酶水平的升高被認為是前列腺癌[23]轉移的標誌。在本研究中，第1天和第15天ACP水平無顯著升高(p<0.05)。但與正常組相比，第5和第10天顯著升高(p<0.05)，且與劑量無關。觀察到的ACP活性的升高表明，敵敵畏可使人在食用受汙染的魚後易患前列腺癌。

血清總蛋白是測定血清中蛋白質總量的一種生化檢測方法。它比較了白蛋白和球蛋白的數量，球蛋白是在血液液體部分發現的兩類蛋白質[24]。蛋白質是組織和細胞的基本組成部分。它們是生長和發展所需要的。它們也構成了器官的結構部分;構成荷爾蒙和酶。總蛋白水平的變化可歸因於各種條件，這些條件可能導致蛋白質的異常高產，幹擾白蛋白或球蛋白的生產，或增加蛋白質的損失或分解。毒性引起的血清總蛋白水平下降可能是大量肝壞死和慢性肝硬化的結果，嚴重破壞肝細胞。從分析結果來看，血清總蛋白(STP)水平在第1、5和10天的兩種濃度下均不顯著降低(p<0.05)，但在第15天21mg/l時顯著升高(p<0.05)，如表4所示。這表明長時間接觸敵敵畏會幹擾蛋白質合成或導致蛋白質損失通過對腎髒和肝髒也有負麵影響。這一觀察結果也可能意味著，血清總蛋白的變化取決於持續時間，而不一定與暴露劑量有關。

血尿素增加表明腎損害。血尿素升高最常見的原因是腎功能不佳，盡管血清肌酐水平是腎功能更具體的衡量指標。腎髒尿素排泄受損可能是由於暫時的條件，如脫水或休克，也可能是由於腎髒本身的急性或慢性疾病。的接觸c . gariepinus兩種不同劑量的敵敵畏對尿素和肌酐水平無顯著影響。與對照組相比，在第1、5和10天，尿素和肌酐在21mg/l時的升高可能是由於脫水等暫時性條件，可能與胰腺細胞受損無關。肌酐是肌肉肌酐的代謝物，血清中的肌酐量據說與人體的肌肉質量[25]成正比。肌酐的含量是恒定的，因此升高的水平表明腎功能下降，因為它很容易被腎髒排出體外。從研究中可以看出，與對照組相比，在整個實驗期間肌酐水平並沒有增加，而是出現了不顯著的下降。這表明暴露c . garirpinus敵敵畏對肌酐水平無明顯影響。

結論

水生生物受到環境汙染的威脅，特別是農業活動造成的環境汙染。本研究中敵敵畏的亞致死劑量證明了殺蟲劑的毒性對魚類等非目標動物是有害的。本研究表明，將魚類暴露在敵敵畏的亞致死劑量下會引起各種生物化學變化，這些變化對魚類的生存是致命的。必須小心保護這些水生生物。

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條信息

文章類型:研究文章

引用:亞致死劑量敵敵畏對非洲鯰魚生化參數的影響。生物化學分析專業5(1):dx.doi.org/10.16966/2576-5833.125

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出版的曆史:

收到日期:2021年4月15日,

接受日期:2021年4月30日,

發表日期:2021年5月07