Fakoya一Olusola AO＊
尼日利亞昂多州阿德昆勒·阿賈辛大學理學院生物化學係*通訊作者:尼日利亞昂多州阿德昆勒阿賈辛大學理學院生物化學係，Olusola AO，電話:8035129957;電子郵件:austinolusola@gmail.com
本研究的目的是評估乙醇提取物可能的腎和肝的保護作用Buchholzia coriacea與n -乙酰半胱氨酸相比，對亞慢性劑量撲熱息痛作用下Wistar大鼠肝髒和腎髒基因表達的影響。將40隻wistar大鼠分為8組，每組5隻。1組僅飼喂正常飼料作為對照組。2 ~ 6組給予14.28 mg/kg體重的撲熱息痛(PM)。6 h後，第3組給予200 mg/kg體重的提取物(E1)，第4組給予400 mg/kg體重的提取物(E2)，第5組和第6組分別給予70和150 mg/kg體重的n -乙酰半胱氨酸。第7組和第8組分別隻飼喂200和400 mg/kg體重的提取物(E1和E2)。這個計劃維持了90天。
動物被獻祭;取肝、腎進行基因表達分析。我們的研究結果顯示，與對照組(組1)相比，科氏布赫菌提取物可下調腎髒中fas配體、kim1、白介素-6和前列腺素的表達Buchholzia coriacea與對照組(組1)相比，肝內提取物可下調GST、GPX-1和CYP1A2的表達Buchholzia coriacea上調肝髒中GST、GPX-1和CYP1A2基因的表達。E1組與PM組比較，GST表達明顯增加(p<0.033)。與對照組比較，PM治療組GPX-1水平降低。然而，與PM治療組和對照組相比，PM+E1治療組的水平有所升高。綜上所述，藿香籽乙醇提取物具有較強的抗氧化和抗炎作用，可減少肝髒和腎髒中的細胞凋亡，解毒有害物質。這些活動可以解釋為腎和肝保護。因此，從Buchholzia coriacea種子可作為治療對乙酰氨基酚中毒的解毒劑。
解毒;基因的表達;腎和王亞南;防治作用;對乙酰氨基酚中毒
對乙酰氨基酚，也被稱為撲熱息痛，是一種用於治療輕度到中度疼痛的藥物。撲熱息痛與阿片類抗疼痛藥物結合使用，還可用於癌症和術後疼痛等嚴重疾病。也可用於治療腰痛;頭痛，牙痛。撲熱息痛沒有明顯的抗炎作用[3]。它有時被用作疼痛和發熱的一線治療，它在多模式鎮痛[4]中發揮著重要作用，被認為具有良好的安全性，除了顯著的過量外，很少有藥物相互作用。它的效果持續2到4小時。建議成人每日最大劑量為3或4克[5]。高劑量可引起肝毒性。
n -乙酰半胱氨酸(NAC)是一種含有氨基酸的硫醇，已在臨床應用30多年，主要作為撲熱息痛過量的解藥[6,7]。NAC是穀胱甘肽(GSH)合成途徑中的前體，NAC潛在的保護功能與預防以GSH減少和/或氧化應激增加為特征的慢性疾病有關，如酒精性肝病[8,7]。作為巰基的來源，NAC支持穀胱甘肽s -轉移酶(GST)的活性，這是一種重要的II期解毒酶。此外，由於NAC與ROS直接相互作用，因此被認為具有促進解毒和清除自由基的作用[9,7]。NAC是一種針對單次高劑量撲熱息痛的保護藥物，很少有證據指導過度暴露、慢性暴露或重複超治療性暴露的風險評估和最佳治療[10,11]。
肝髒是人體的重要器官，在人體中起著至關重要的作用，它由多種細胞組成。它是一個多功能和高度再生的器官。肝髒的主要代謝細胞類型，肝細胞，在藥物過量期間容易受到損害。在急性和慢性階段，肝損傷對健康都有可怕的後果。肝損傷是由藥物不良反應引起的，可導致藥物性肝損傷(Drug - Induced Liver Injury, DILI)。這給患者、臨床醫生、製藥行業和監管當局帶來了重大問題[12]。對乙酰氨基酚過量引起的肝損傷是西方國家急性肝衰竭(Acute Liver Failure, ALF)的首要原因，約占ALF病例總數的一半[13,14]。肝髒中的CYP450酶，特別是CYP2E1、CYP3A4和CYP1A2等亞型，將對乙酰氨基酚代謝為n -乙酰-對苯醌胺(NAPQI)，一種肝毒性代謝物[15]。NAPQI結合細胞蛋白，特別是線粒體蛋白，觸發細胞內信號級聯，最終導致肝壞死[16-18]，揭示2,3,4 '，5-四羥基二苯乙烯-2- o -β- d -葡萄糖苷(TSG)是多花蓼主要活性化合物。該植物具有抗炎、抗衰老、降血脂、降血壓、保護心髒和保護神經等多種藥理作用[19,18]。 Liver mRNA expression of CYP1A2 was increased in mice treated with different doses of TSG (100, 200, 400, 800 mg/kg) for 12 hrs. It was found that TSG exacerbated acetaminophen-induced liver injury at the first time. Furthermore, the study showed that TSG augmented acetaminophen-induced liver injury by increasing the expression and catalytic activation of liver CYP1A2. TSG was seen to increase the expression of CYP1A2 in mice and in human normal liver and thus exacerbates the hepatotoxicity. It was further shown by Xu S, et al. [18] that Aryl Hydrocarbon Receptor (AHR) and Pregnane X Receptor (PXR) are responsible for up- regulating the transcriptional expression and activity of hepatic CYP1A2 in mice. AHR or PXR inhibitors were found to reduce the expression and activity of hepatic CYP1A2 and CYP3A4 in mice. According to Jóźwiak-Bebenista and Nowak [20], acetaminophen is a weak COX-2 inhibitor. A result obtained by Soliman MM, et al. [21] also showed that curcumin modulates the inflammatory response by down-regulating the activity of cyclooxygenase-2 in acute liver injury induced by acetaminophen. In a research conducted by Jurenka JS [22], curcumin modulated the inflammatory response by downregulating the activity of COX-2. This shows that curcumin is an antiinflammatory substance [22,23].
腎元是腎髒的基本結構和功能單位，它過濾血液，以調節廢物的重吸收和排泄，從而產生尿[24]。有毒化學品和藥物可引起腎毒性[25]。大多數藥物的腎毒性作用在已經患有腎損害的患者中更為嚴重。肌酐清除率降低表明腎功能不佳，這在臨床評估患者是否患有早期腎病時可能更有用。
Buchholzia coriacea(奇妙可拉)是一種常綠灌木，屬於卡柏科[26]。它分布在許多熱帶國家，如加納、加蓬、喀麥隆、中非共和國、剛果、安哥拉、尼日利亞等。的乙醇提取物Buchholzia coriacea恩格勒種子在實驗感染的小鼠中顯示出抗錐蟲體活性錐蟲屬brucei(28日,26)。還發現該植物具有抗瘧原蟲[29]、抗菌[30,26]、殺幼蟲[31]、抗瘧原蟲止瀉[32]、鎮痛[33]和驅蟲[34,31]的特性。
Anowi和他的同事[32]之前的研究表明Buchholzia coriacea誘發與降糖藥二甲雙胍協同作用的降糖作用。研究了奇葩可樂葉提取物的化學成分及對致病菌的抑菌活性金黃色葡萄球菌菌株。采用瓊脂孔擴散法，測定其抑菌活性，確定其抑菌範圍和最低抑菌濃度(MIC)[35]。植物化學分析表明Buchholzia coriacea含有植物巴丹寧，碳水化合物，蛋白質，單寧，皂苷，生物堿和類黃酮。乙醇提取物(10-14 mm)和甲醇提取物(13-15 mm)對黃酮的抑製作用不同金黃色葡萄球菌菌株。這表明，提取物的葉子Buchholzia coriacea植物可抑製致病性菌株金黃色葡萄球菌[35]。
最近，有證據表明，人們對藥用植物的使用逐漸恢複了興趣，因為它安全，副作用更小，特別是與合成藥物[36]相比。本研究旨在評價的基因調節作用Buchholzia coriacea以建議劑量給藥三個月，評估亞慢性劑量給藥對肝、腎的影響
聚合酶鏈式反應(PCR)機(Multi-gene optimax)，熱循環機(Multigene optimax，美國)，冰箱，Eppendorf管，幹燥器，台式離心機(Biofuge，德國)，分光光度計(JENWAY，英國)，凝膠電泳機(美國)，微量移液器，光電泳(美國)。
n -乙酰半胱氨酸，溴化乙胺，跟蹤染料，異丙基乙醇，對乙酰氨基酚(GSK對乙酰氨基酚)，主混合物(Biolabs, New England)， RNA裂解試劑盒(裂解溶液)，三硼酸EDTA (Biolabs New England)，瓊脂糖凝膠粉(Cleaver Scientific LTD, England)，引物(Inqada Biotechnical Industries (Pty) LTD，南非)，無核酸酶水(Life Sciences advanced technologies, England)，逆轉錄酶(Biolabs New England)，隨機引物(Biolabs New England)，dNTPs(新英格蘭生物實驗室)。所有使用的化學品和試劑都是高分析等級的。
的種子Buchholzia coriacea都是從翁都州伊卡雷阿科科市的奧佳歐巴市場買的。
種子被鑒定和鑒定的指定憑證編號025為Buchholzia coriacea在尼日利亞Ondo州Akungba Akoko (AAUA)的Adekunle Ajasin大學植物科學和生物技術係發現了一株Engler樹，並將一份樣品存放在該大學的植物標本室。
新鮮的種子b . coriacea都是用水洗的。洗淨的種子被小心地切成薄片。切片的種子在室溫下風幹幾周，然後粉碎。
將500克清潔、風幹和粉碎的植物樣品稱量到提取罐中，並在罐中加入1400毫升分析級乙醇Buchholzia coriacea。對提取混合物進行周期性恒定攪拌，靜置72小時。取上清液，40°C旋轉蒸發器濃縮，冷凍幹燥。提取液被包裝在一個氣密的樣品瓶中，並在冰箱中4°C保存，直到需要時。
40(40)隻正常雄性Wistar大鼠購自伊巴丹大學，奧約州，它們在良好的環境中適應四周。這些動物是按照尼日利亞昂多州阿昆巴阿科科阿德昆勒阿賈辛大學理學院實驗動物資源護理和使用委員會的指導方針進行維護和使用的。
本研究使用40隻雄性Wistar大鼠。動物被隨機分為8組，每組5隻。馴化後，第1組隻飼喂正常飼糧作為對照。2 ~ 6組給予14.28 mg/kg體重的撲熱息痛(PM)。6 h後，第3組給予200 mg/kg體重的提取物(E1)，第4組給予400 mg/kg體重的提取物(E2)，第5組和第6組分別給予70和150 mg/kg體重的n -乙酰半胱氨酸。第7組和第8組分別隻飼喂200和400 mg/ kg體重的提取物(E1和E2)。這個計劃維持了90天。
在90天的治療期結束時，動物被禁食一夜，然後獻祭。腎髒和肝髒組織標本放入含100 μl RNA snap kit試劑的epppendorf管中。將組織均質，上清保存於-4℃冰箱中。
采用半定量聚合酶鏈式反應法測定GST、GPX-1、COX-1、IL-6、KIM-1、前列腺素合成酶、輕微修飾的Fas配體[37]的相對基因表達。
根據製造商的協議，使用TRIzol (Invitrogen)提取組織總RNA。RNA球團重懸於二乙基/焦碳酸鹽處理過的去離子水中。RNA樣品經瓊脂糖凝膠電泳分析，18S和28S rRNA在紫外光下可視化，證實其完整性。分光光度法(NanoDrop, Thermo Scientific 2000c)測定總RNA的純度，然後測定其濃度。1-2 μg RNA在42°C條件下逆轉錄60分鍾後轉化為cDNA。酶失活(95°C, 10分鍾)後，使用基因特異性引物對感興趣的基因擴增cDNA片段35個周期。PCR產物在2%瓊脂糖凝膠上分解，並使用Uvitec凝膠記錄係統(Uvitec ArminTeb，伊朗)進行可視化。基因表達研究采用Uvitec Fire Reader軟件(Cambridge)進行統計分析，比較各組間差異。
肝髒中CYP1A2和COX-2基因的相對表達量，各組與基礎對照組和陰性對照組比較，基因表達量無顯著差異(p≥0.05)，見圖1和圖2。
圖1:的影響Buchholzia coriacea提取物和n -乙酰半胱氨酸對Wistar大鼠肝髒對乙酰氨基酚中毒前(亞慢性)期CYP1A2基因表達的影響。
PM=14.28 mg/kg體重的對乙酰氨基酚，E1=200 mg/kg體重的B coriacea， E2=400 mg/kg體重B coriacea， N1=70 mg/kg體重n -乙酰半胱氨酸，N2=150 mg/kg體重n -乙酰半胱氨酸。
P < 0.05,土耳其事後考驗,* * * P < 0.033, P < 0.002, * * * P < 0.001。
圖2:的影響Buchholzia coriacea提取物和n -乙酰半胱氨酸對Wistar大鼠肝髒對乙酰氨基酚中毒前(亞慢性)期COX-2基因表達的影響。
PM=14.28 mg/kg體重的對乙酰氨基酚，E1=200 mg/kg體重的B coriacea， E2=400 mg/kg體重B coriacea， N1=70 mg/kg體重n -乙酰半胱氨酸，N2=150 mg/kg體重n -乙酰半胱氨酸。
P < 0.05,土耳其事後考驗,* * * P < 0.033, P < 0.002, * * * P < 0.001。
GST基因在肝髒中的相對表達，試驗組給予200 mg/kg體重b . coriacea提取物中GST基因表達顯著上調(p<0.05)。其餘各組與基礎對照組和陰性對照組比較，基因表達水平無顯著差異(p>0.05)，見圖3。
圖3:的影響Buchholzia coriacea提取物和n -乙酰半胱氨酸對Wistar大鼠肝髒對乙酰氨基酚中毒前(亞慢性)期GST基因表達的影響。
PM=14.28 mg/kg體重的對乙酰氨基酚，E1=200 mg/kg體重的B coriacea， E2=400 mg/kg體重B coriacea， N1=70 mg/kg體重n -乙酰半胱氨酸，N2=150 mg/kg體重n -乙酰半胱氨酸。
P < 0.05,土耳其事後考驗,* * * P < 0.033, P < 0.002, * * * P < 0.001。
的影響Buchholzia coriacea提取物和n -乙酰半胱氨酸對亞慢性劑量乙酰氨基酚大鼠肝髒Fasl基因表達的影響如圖4所示。對乙酰氨基酚14.29 mg/kg體重組和對乙酰氨基酚200 mg/kg體重組Fasl基因表達水平下調差異有統計學意義(p<0.002)Buchholzia coriacea與基礎對照組和陰性對照組進行比較。另外，14.29 mg/kg體重的撲熱息痛組與400 mg/kg體重的撲熱息痛組的降壓差異有統計學意義(p<0.033)Buchholzia coriacea僅與基礎組比較。其餘各組Fasl基因表達無明顯差異。
圖4:的影響Buchholzia coriacea提取物和n -乙酰半胱氨酸對Wistar大鼠肝髒對乙酰氨基酚中毒前(亞慢性)期FasL基因表達的影響。
PM=14.28 mg/kg體重的對乙酰氨基酚，E1=200 mg/kg體重的B coriacea， E2=400 mg/kg體重B coriacea， N1=70 mg/kg體重n -乙酰半胱氨酸，N2=150 mg/kg體重n -乙酰半胱氨酸。
P < 0.05,土耳其事後考驗,* * * P < 0.033, P < 0.002, * * * P < 0.001。
如圖5所示，陰性對照組與基礎對照組比較，GPX-1的相對基因表達量顯著下調(p<0.002)。14.28 mg/kg對乙酰氨基酚和400 mg/kg提取物、200和400 mg/kg提取物處理組與基礎對照比較，GPx-1基因水平顯著上調(p<0.002)。與E1組和E2組相比，14.28 mg/kg撲熱息痛組顯著下調(p<0.002)。其餘各組與基礎對照組比較差異無統計學意義(p>0.05)。
圖5:的影響Buchholzia coriacea提取物和n -乙酰半胱氨酸對Wistar大鼠肝髒對乙酰氨基酚中毒前(亞慢性)期GPX-1基因表達的影響。
PM=14.28 mg/kg體重的對乙酰氨基酚，E1=200 mg/kg體重的B coriacea， E2=400 mg/kg體重B coriacea， N1=70 mg/kg體重n -乙酰半胱氨酸，N2=150 mg/kg體重n -乙酰半胱氨酸。
P < 0.05,土耳其事後考驗,* * * P < 0.033, P < 0.002, * * * P < 0.001。
的影響Buchholzia coriacea圖6顯示了提取物與n -乙酰半胱氨酸對腎髒中CYP1A2基因表達的影響。兩組CYP1A2表達與基礎對照組、陰性對照組比較，差異無統計學意義(p>0.05)。
圖6:的影響Buchholzia coriacea提取物和n -乙酰半胱氨酸對Wistar大鼠腎對乙酰氨基酚中毒前(亞慢性)期CYP1A2基因表達的影響。
PM=14.28 mg/kg體重的對乙酰氨基酚，E1=200 mg/kg體重的B coriacea,E2=400 mg/kg體重B coriacea， N1=70 mg/kg體重n -乙酰半胱氨酸，N2=150 mg/kg體重n -乙酰半胱氨酸。
P < 0.05,土耳其事後考驗,* * * P < 0.033, P < 0.002, * * * P < 0.001。
GST基因在腎髒中的相對表達如圖7所示。對照組給予200 mg>kg b.wb . coriacea提取物中GST基因表達顯著上調(p<0.001)。P+E1組和P+E2組與基礎對照組比較，表達水平顯著下調(P <0.002)。其餘各組與基礎對照組和陰性對照組比較，基因表達水平無統計學差異(p>0.05)。
圖7:的影響Buchholzia coriacea提取物和n -乙酰半胱氨酸對Wistar大鼠腎對乙酰氨基酚中毒前(亞慢性)期GST基因表達的影響。
PM=14.28 mg/kg體重的對乙酰氨基酚，E1=200 mg/kg體重的B coriacea， E2=400 mg/kg體重B coriacea， N1=70 mg/kg體重n -乙酰半胱氨酸，N2=150 mg/kg體重n -乙酰半胱氨酸。
P < 0.05,土耳其事後考驗,* * * P < 0.033, P < 0.002, * * * P < 0.001。
的影響Buchholzia coriacea圖8-10所示為對乙酰氨基酚亞慢性劑量治療大鼠腎髒中GPx-1、fas配體和白細胞介素-6基因表達的影響。與基礎對照組和陰性對照組相比，各組基因表達水平無顯著差異(p<0.05)。與基礎對照組相比，PM+E2組表達顯著下調(p<0.002)。
圖8:的影響Buchholzia coriacea提取物和n -乙酰半胱氨酸對Wistar大鼠腎對乙酰氨基酚中毒前(亞慢性)期GPX-1基因表達的影響。
PM=14.28 mg/kg體重的對乙酰氨基酚，E1=200 mg/kg體重的B coriacea， E2=400mg/kg體重B coriacea， N1=70 mg/kg體重n -乙酰半胱氨酸，N2=150 mg/kg體重n -乙酰半胱氨酸。
P < 0.05,土耳其事後考驗,* * * P < 0.033, P < 0.002, * * * P < 0.001。
圖9:的影響Buchholzia coriacea提取物和n -乙酰半胱氨酸對Wistar大鼠腎對乙酰氨基酚中毒前(亞慢性)期FasL基因表達的影響。
PM=14.28 mg/kg體重的對乙酰氨基酚，E1=200 mg/kg體重的B coriacea， E2=400 mg/kg體重B coriacea， N1=70 mg/kg體重n -乙酰半胱氨酸，N2=150 mg/kg體重n -乙酰半胱氨酸。
P < 0.05,土耳其事後考驗,* * * P < 0.033, P < 0.002, * * * P < 0.001。
圖10:的影響Buchholzia coriacea提取物和n -乙酰半胱氨酸對Wistar大鼠腎對乙酰氨基酚中毒前(亞慢性)期IL-6基因表達的影響。
PM=14.28 mg/kg體重的對乙酰氨基酚，E1=200 mg/kg體重的B coriacea， E2=400 mg/kg體重B coriacea， N1=70 mg/kg體重n -乙酰半胱氨酸，N2=150 mg/kg體重n -乙酰半胱氨酸。
P < 0.05,土耳其事後考驗,* * * P < 0.033, P < 0.002, * * * P < 0.001。
的影響Buchholzia coriacea與n -乙酰半胱氨酸相比，提取物對亞慢性劑量乙酰氨基酚治療大鼠腎髒中KIM-1基因表達的影響如圖11所示。與基礎對照組相比，KIM-1基因和PM+E2組表達明顯下調(p<0.002)。E2組kim1基因表達顯著上調(p<0.001)。其餘各組在基因表達上無顯著差異(p>0.05)。
圖11:的影響Buchholzia coriacea提取物和n -乙酰半胱氨酸對Wistar大鼠腎對乙酰氨基酚中毒前(亞慢性)期KM-1基因表達的影響。
PM=14.28 mg/kg體重的對乙酰氨基酚，E1=200 mg/kg體重的B coriacea， E2=400 mg/kg體重B coriacea， N1=70 mg/kg體重n -乙酰半胱氨酸，N2=150 mg/kg體重n -乙酰半胱氨酸。
P < 0.05,土耳其事後考驗,* * * P < 0.033, P < 0.002, * * * P < 0.001。
圖12顯示了的效果Buchholzia coriacea比較n -乙酰半胱氨酸對前列腺素合成酶基因表達的影響。與基礎對照組比較，PM+E2組前列腺素基因表達明顯下調(p<0.002)。其餘各組在基因表達上無顯著差異(p>0.05)。
圖12:的影響Buchholzia coriacea提取物和n -乙酰半胱氨酸對Wistar大鼠腎對乙酰氨基酚中毒前(亞慢性)期Ptgds基因表達的影響
PM=14.28 mg/kg體重的對乙酰氨基酚，E1=200 mg/kg體重的B coriacea， E2=400 mg/kg體重B coriacea， N1=70 mg/kg體重n -乙酰半胱氨酸，N2=150 mg/kg體重n -乙酰半胱氨酸。
P<0.05，土耳其事後檢驗，95.00% CL * P< 0.033， ** P< 0.002， *** P< 0.001。
肝髒是人體的一個主要器官，對人體健康有一係列至關重要的功能。藥物的使用:特別是由合成物質合成的藥物確實對肝髒和腎髒等器官有削弱作用，這些器官的主要功能是代謝外來生物並排泄其代謝廢物[39]。眾所周知，急性、亞急性、亞慢性和慢性劑量的藥物對健康有害，因為它們對這些內髒器官產生不利影響。
對乙酰氨基酚是一種解熱藥物，用於治療頭痛、炎症和作為輔助治療發燒。盡管撲熱息痛用途廣泛，但過量使用已被證實會影響腎髒和肝髒[40]。取而代之的是，可用於治療對乙酰氨基酚毒性的藥物的開發引起了關注，部分原因是其可用性和濫用傾向。
從植物中開發天然藥物已經引起了研究人員和製藥公司的注意。這是因為，與合成的同類物質[41]相比，來自植物的植物化學物質更便宜，保留時間更短，生物利用率更高。的提取b . coriacea傳統上被用來治療某些疾病。近年來，人們對其治療藥物過量中毒的潛力進行了探討。b . coriacea與n -乙酰半胱氨酸作為標準藥物相比，在本研究中已用於治療對乙酰氨基酚毒性。研究了科草提取物和n -乙酰半胱氨酸對肝髒和腎髒部分表達基因的影響，以確定科草提取物在對乙酰氨基酚亞慢性給藥過程中的生化效應。
與對照組相比，僅對乙酰氨基酚治療組的GST基因有少許抑製(圖3)。這種抑製可能是由於n -乙酰-對苯醌亞胺(NAPQI)，一種對乙酰氨基酚的代謝物與穀胱甘肽(GSH)發生反應，因此亞慢性劑量的對乙酰氨基酚可能導致肝細胞GSH的消耗[43,21]。這與Daniel D等人[44]on的報告一致水蚤麥格納(一種在淡水環境中發現的浮遊微甲殼動物)暴露於對乙酰氨基酚21天後。他們的數據顯示GST活動出現了意外的下降。亞洲蛤的GST活性明顯下降，蜆fluminea短期和長期接觸對乙酰氨基酚[45]。Henderson CJ等[46]研究表明，暴露於對乙酰氨基酚後，人和大鼠對乙酰氨基酚代謝的主要GST亞型GST Pi在大鼠肝髒中顯著降低。GSTs可能不是該藥物[44]解毒的主要機製。管理b . coriacea僅(200 mg/kg b. w)可上調GST mRNA表達。這反過來會導致體內穀胱甘肽水平的增加，從而增強細胞保護。亞慢性給藥對乙酰氨基酚和提取物導致GST基因輕微上調。在Somanawat K及其同事[23]的一項研究中，薑黃素通過恢複對乙酰氨基酚過量引起的肝毒性的肝髒GSH，對雄性小鼠的肝損傷具有肝保護性能。薑黃素有抗自由基介導的氧化應激作用。薑黃素被認為是通過增加對乙酰氨基酚引起的肝毒性中GST的mRNA表達來清除自由基和改善抗氧化劑的損耗。因此，乙醇提取物b . coriacea亞慢性劑量對乙酰氨基酚中毒後，可能也具有類似的抗氧化能力，通過增加肝組織中GST的mRNA表達來阻斷GSH的消耗。對乙酰氨基酚和提取物一起給藥顯著降低了GST基因的表達(圖7)。這可能是因為提取物無法逆轉對乙酰氨基酚對GST基因的抑製作用，因此探索了腎髒細胞保護的另一種方法。Franco R等[47]認為，正常腎髒必須上調GST基因的表達，才能解毒有害物質。然而，植物提取物在200 mg/kg體重組腎髒中的作用顯示了GST基因的上調。因此，在此劑量下，柯氏Buchholzia coracea提取物能夠誘導腎髒中用於解毒有害化學物質的GST基因表達的增加。
從我們的研究中得到的結果，乙醇提取物Buchholzia coriacea可能具有抑製肝髒CYP1A2轉錄表達和活性的能力，如圖1和圖6所示。該提取物通過抑製CYP1A2 (PM+E1和PM+E2組)的過度表達，有可能減輕對乙酰氨基酚誘導的毒性。但在本研究中，對乙酰氨基酚並沒有促進CYP1A2 mRNA的表達。這可能是它涉及並可能誘導CYP的其他異構體將對乙酰氨基酚代謝為NAPOI。
從我們的結果可以看出，乙醇提取物b . coriacea與對乙酰氨基酚相比，可能是COX-2 mRNA表達的弱抑製劑(圖2)，因為各治療組之間COX-2的表達無顯著差異。然而，該植物可能具有抗炎活性(PM+E1，圖2)，這可能是該組COX-2基因表達輕微下調的原因。Ogechukwu UB等人[48]證實了牛蒡種子的甲醇提取物含有抗炎活性。在肝硬化或肝炎等肝髒疾病中，COX2基因上調。對乙酰氨基酚治療可誘導COX-2 mRNA表達水平發生一致變化。然而，在嚴重的炎症失控時(如關節炎或其他慢性炎症疾病)，它會導致疼痛和不適。在單獨的提取物組中發現了輕微的(不顯著的)上調CYP1A2基因(E1和E2，圖2)。這可能是一種保護身體免受可能的炎症的嚐試，一種正常的、健康的身體自我愈合的嚐試。
據報道，FasL的可溶性形式在免疫細胞[50]中具有凋亡和促炎活性。在本研究中，與正常對照組相比，單獨給予亞慢性劑量的對乙酰氨基酚會導致Fas配體mRNA表達的輕微增加(圖4和圖9)。這表明亞慢性劑量的對乙酰氨基酚可能會導致腎髒損傷，研究表明Fas與FasL的結合會激活caspase級聯，引發凋亡，這發生在正常細胞老化或細胞損傷[51]的結果。亞慢性劑量的對乙酰氨基酚與提取物共同給藥(PM+E1和PM+E2組，圖4和9)導致Fas配體mRNA表達顯著抑製(p<0.033)，但在其他組中未見顯著差異(圖4和9)。這與Ogechukwu UB等人進行的研究有關。結果表明，甲醇提取液和水提液對b . coriacea具有相當的抗炎活性。這些結果也與Wang Q和合作者[52]關於柚皮苷對凋亡相關基因表達水平的影響的研究一致，柚皮苷治療後腎髒fas配體基因水平明顯降低。因此，在本實驗的基礎上，用提取物處理b . coriacea認為其是通過抑製FasL基因減少肝、腎細胞損傷導致細胞凋亡的良好解毒劑。
管理Buchholzia coriacea對乙酰氨基酚治療前僅提取的提取物引起GPX-1基因(PM+E1, PM+E2, E1和E2;圖5)。因此，該植物顯示了在體內補充和衰減穀胱甘肽抗氧化損耗的潛力。根據Morsy MA等的研究，[53]薑黃素具有降低由四氯化碳引起的CCl4對動物的影響的能力，而且薑黃素還可以降低黃曲黴毒素B[54]引起的肝毒性。薑黃素增加GPX mRNA表達，減弱抗氧化劑損耗，保護肝髒免受對乙酰氨基酚過量誘導的毒性[21]。結果表明，植物體薑黃素對對乙酰氨基酚引起的小鼠急性腎損傷具有較強的保護作用，其保護作用可能與提高抗氧化酶水平和降低對乙酰氨基酚引起的小鼠[55]的脂質過氧化作用有關。然而，對乙酰氨基酚，Buchholzia coriacea提取物和n -乙酰半胱氨酸對大鼠腎髒GPx-1基因表達的影響無顯著性差異(圖8)Buchholzia coriacea被稱為自由基清除物[56]。本研究結果表明，柯氏布赫菌提取物可提高GPx-1 mRNA的表達，減弱抗氧化劑的損耗，保護肝髒免受對乙酰氨基酚引起的毒性，並有效防止對乙酰氨基酚引起的腎毒性。
此前有報道稱，在順鉑[57]引起的大鼠腎損傷中，KIM-1 mRNA的表達明顯被誘導。同樣，在本研究中(圖11)，Buchholzia coriacea能夠抑製對乙酰氨基酚作用引起的大鼠腎損傷誘導的KIM-1 mRNA的表達。我們可以得出結論Buchholzia coriacea可能有效預防對乙酰氨基酚中毒引起的腎病。然而，單獨給藥400 mg/kg (E2，圖11)會引起KIM-1基因的過度表達。這可能意味著更高劑量的Buchholzia coriacea提取物可能沒有毒性或助氧化劑。
對乙酰氨基酚被歸類為溫和鎮痛藥[2]，[58]沒有顯著的抗炎活性。對乙酰氨基酚治療組前列腺素合成酶基因水平較正常對照組略有升高(圖12)。Buchholzia coriacea能夠抑製前列腺素基因mRNA的表達(PM+E2，圖12)。Buchholzia coriacea因此具有抗炎特性(圖12)。在本研究中，n -乙酰半胱氨酸沒有改變正常對照組前列腺素合成酶基因的表達(圖12)。這與Dimari J等人[59]在臨床試驗中的研究一致，該研究表明n -乙酰半胱氨酸補充穀胱甘肽的存儲，清除羥基自由基，並具有抗炎特性，這在Ancha HR及其同事[60]進行的研究中得到證實，NAC治療抑製前列腺素合成酶的表達，以控製tnbs誘導的大鼠結腸炎的值。結果顯示前列腺素合成酶基因表達譜顯示Buchholzia coriacea提取物對病變腎髒有一定的生理作用。的提取b . coriacea可作為天然強抗炎劑和輔助用藥，是治療腎髒損傷的一種很好的修複藥物。這與邢c - y等[61]的研究結果一致，地塞米鬆和維生素D抑製IL-6基因表達，這是其抗炎作用的部分原因。正常腎髒中IL-6基因的表達降低，因為它促進腎髒炎症。研究表明，乙醇提取物b . coriacea葉片被證明具有抗炎潛力，這可能歸因於植物化學成分的單獨或集體作用，如提取物處理的一些組[62]。Buchholzia coriacea提取物已被證明具有較高的抗氧化和抗炎性能[63]。從我們的研究結果來看，對乙酰氨基酚和400 mg/kg的柯氏布赫菌提取物處理組(圖10)的下調可能描述了b . coriacea作為一種有效的抗炎劑。
基於目前的研究，Buchholzia coriacea對撲熱息痛的抗氧化劑和炎症特性的保護能力。Buchholzia coriacea在考慮作為治療對乙酰氨基酚引起的肝腎毒性的有效細胞保護劑進行臨床試驗之前，可以研究其可能的抗遺傳毒性和生物安全性。
我們感謝尼日利亞Ondo州Akungba Akoko的Adekunle Ajasin大學的生物計算和藥物開發中心(CBDD)和生物化學係的所有研究人員，感謝他們在這項研究工作中的支持。
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文章類型:研究文章
引用:Fakoya A, Olusola AO(2020)抗氧化和抗炎潛力的轉錄評價Buchholzia coriacea對乙酰氨基酚誘導的亞慢性腎和肝毒性生物化學分析4(3):dx.doi.org/10.16966/2576-5833.124
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