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研究文章
植物化學的研究和在體外抗氧化和抗高血糖活性的評價獼猴桃deliciosa(答:Chev。)梁振發& A.R.弗格森(獼猴桃)

Vivek Kumar DhimanVivek Chauhan辛格Shamsher Kanwar

印度喜馬偕爾邦大學生物技術係

*通訊作者:印度喜馬偕爾邦大學生物技術係Shamsher Singh Kanwar電話:+ 91 8219994569;電子郵件:kanwarss2000@yahoo.com

摘要

的水果獼猴桃deliciosa(答:Chev。)C.F. Liang和A.R. Ferguson,獼猴桃也被稱為“中國的神奇水果”和“新西蘭的園藝奇跡”,是一種非常著名的水果,具有良好的生物活性和健康屬性,如健康的皮膚,由抗氧化劑和血清素含量貢獻的更好的睡眠。獼猴桃富含鉀、纖維和抗氧化劑,因此還能維持心血管健康和血壓。抗氧化特性有助於抗衰老和血液清潔活動,而抗高血糖化合物可能導致抗糖尿病的作用。本研究的目的是研究獼猴桃的生化成分,並建立其抗氧化和抗高血糖作用。獼猴桃提取物在兩種溶劑(乙醇和甲醇)中的化學分析表明,存在類固醇,心髒糖苷,萜類,類黃酮和碳水化合物。抗氧化能力是通過對1,1-二苯基-2-三硝基肼(DPPH)自由基的抑製來實現的,而α-澱粉酶抑製試驗是通過對α-澱粉酶米曲黴.獼猴桃的甲醇提取物(獼猴桃deliciosa)對DPPH自由基和α-澱粉酶抑製活性最高(與乙醇提取物相比)。集成電路50計算了獼猴桃甲醇提取物(MKE)和乙醇提取物(EKE)的抑製率(50%)。集成電路50DPPH自由基清除率MKE為4.2±0.073 mg/mL, EKE為3.14±0.153 mg/mL。另一方麵,α澱粉酶測定IC50MKE為1.53±0.158 mg/mL, EKE為2.05±0.639 mg/mL。動力學分析表明,EKE和MKE對α-澱粉酶的抑製表現出競爭模式。在這項研究中,獼猴桃被證明對健康有益,因為在其提取物中發現了抗氧化和抗高血糖的特性。

關鍵字

獼猴桃deliciosaChev.cv。方丈;DPPH;α澱粉酶;集成電路50價值;Phyto-chemical篩選;抗氧化能力;降糖藥


簡介

獼猴桃是一種世界聞名的獼猴桃屬水果(獼猴桃科).它是一種雌雄異株植物,廣泛分布在亞洲。它原產於中國,但大多數品種在中國西南部種植。今天,許多國家都種植獼猴桃,特別是意大利、新西蘭、中國、智利、法國、希臘、日本和美國。獼猴桃含有多種植物成分,屬於類固醇、三萜、黃酮類、醌類、多糖和苯丙素類,如β-穀甾醇、柱頭甾醇、亞洲酸、arjunolic酸、9 ' -順式紫黃素、葉綠素b、葉綠素q、葉黃素環氧化物、吡羅喹啉醌、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、甘露糖和植物抗毒素[1-3]。果實、種子、莖和根天然具有利尿、天然血液稀釋劑、發熱和鎮靜的特性。據報道,它對治療類風濕性關節炎、肝炎、水腫、牙齦炎、膿漏等疾病有益。有研究報道獼猴桃具有免疫調節和抗癌活性[5,6]。在挪威進行的一項研究表明,連續28天每天食用2-3個獼猴桃可以取代阿司匹林治療,並能顯著稀釋血液。因此,它可以幫助降低血栓的風險,並降低血液中的脂肪,這是阻塞[7]的主要原因。

根據許多研究,攝入獼猴桃植物產品可以降低患慢性疾病的風險,這些疾病與具有抗氧化活性的化合物[8]有關。類胡蘿卜素和維生素E通過猝滅單線態氧[9],有助於對抗氧化應激的第一防禦係統。這些抗氧化劑共同作用,減少對生命係統有害的自由基或活性氧。此外,獼猴桃甲醇提取物對脂肪細胞的分化和功能具有調節作用,對預防糖尿病[11]具有重要意義。鑒於獼猴桃的多種藥用價值,本研究對獼猴桃中的植物成分進行了檢測。然而,一些植物成分,如心髒糖苷,在以往的研究中沒有被量化,其抗糖尿病的效力獼猴桃deliciosaChev。而其抑製機製目前尚未得到廣泛的研究。因此,抗氧化和-澱粉酶抑製活性獼猴桃deliciosaChev。通過對水果粗提物的測定,確定其促進健康的性質。

材料和方法
植物材料

的成果獼猴桃deliciosaChev。簡曆。方柱來自獼猴桃園(30°.51.44N;77°.09.32E;1290 amsl), Y. S. Parmar園藝與林業大學(印度)水果科學係,2019年10月。所有樣品都經過適當清洗,並在低溫(0°C溫度)下保存。

化學藥品和試劑

DPPH和α -澱粉酶米曲黴來自美國聖路易斯的Sigma-Aldrich公司,而澱粉可溶性(分析級)來自印度孟買的HiMedia Laboratories ppt . Ltd.。其他化學品和試劑為分析級,所用水為玻璃蒸餾水。

獼猴桃提取物的製備

獼猴桃deliciosaChev。整個獼猴桃用水清洗以去除所有汙染物,然後用70%乙醇清洗表麵。水果稱量後用攪拌機磨成細粒。然後將該漿液(各14 g)分別浸泡在350 ml選定溶劑(70%乙醇和70%甲醇)中,以1:25 (w/v)的比例。所有樣品在黑暗條件下浸泡48 h。兩種泥漿(乙醇獼猴桃提取物:EKE;甲醇獼猴桃提取物:MKE)在30°C恒定振蕩(200 rpm) 48小時。然後,混合物的內容通過棉布過濾,最後通過Whatman 1號濾紙。萃取溶劑在旋轉真空蒸發器中30°C減壓蒸發,直至樣品無溶劑。稱量幹燥後的殘渣,用蒸餾水製原液。 The yield (percentage) was calculated using the following equation:

得率(%)=(萃取液初始重量(g) /濃縮萃取液最終重量(g) × 100。

酒精提取物儲存在冰箱中,用於測定抗氧化活性和植物化學分析。

獼猴桃提取物(EKE和MKE)植物化學初步篩選

植物化學成分答:DeliciosaChev。采用不同的方法測定果酒醇提取物。提取物(EKE和MKE)用少量的2% (w/v)氯化鐵溶液處理。藍黑色的形成表明酚[12]的存在。在水果提取物中加入幾滴莫利施試劑,然後沿著試管壁慢慢加入濃硫酸。紅紫色環表明測試樣品[13]中存在碳水化合物。提取液用1.0 ml氯仿處理,然後沿著試管兩邊滴幾滴濃硫酸。間期呈紅褐色,表明存在萜類[14]。提取物用幾滴乙酸酐處理,搖勻後加入1.0 ml濃硫酸,顏色由紫色變為藍綠色表示存在類固醇[15,16]。提取液用1.0 ml冰醋酸處理,混合均勻,加入幾滴5%乙醇氯化鐵溶液,慢慢搖勻,加入1.0 ml濃硫酸。 An appearance of a brownish ring between the two layers with lower acidic layer turning blue-green upon standing indicated the presence of cardiac glycosides [17,18]. Extracts were treated with 1.0 ml of Wagner’s reagent, mixed well, added 1% (v/v) hydrochloric acid. The reaction mixtures were incubated in hot water bath for 5 minutes. Appearance of precipitate in the reaction mixture indicated the presence of alkaloids [19]. Extracts were also treated with 1.0 ml of 10% (w/v) sodium hydroxide solution. The yellow colouration which appeared later turned colorless upon addition of dilute acid indicated the presence of flavonoids [20].

獼猴桃提取物(EKE和MKE)植物化學成分的定量測定

總黃酮含量測定:總黃酮含量答:DeliciosaChev。用Stankovic MS等開發的比色法測定粗水果提取物[21]。將已知體積(1.0 ml)的提取物(EKE和MKE)添加到10ml容量瓶中,然後加入0.15 ml的5% (w/v)亞硝酸鈉2.5分鍾後,加入2% (w/v)的0.15 ml氯化鋁。6 min後,用1.0 ml的1 M NaOH溶液中和反應混合物,用蒸餾水使總體積達到10 ml,混合均勻,在510 nm處分光光度監測。黃酮含量以每毫克新鮮物質的微克槲皮素當量表示。

類固醇的定量估計:類固醇的總量答:DeliciosaChev。根據Patra A等人[22]報道的方法測定粗水果提取物。每種獼猴桃提取物(1.0 ml, EKE和MKE)被轉移到10ml容積瓶中,然後加入2.0 ml 4N硫酸和2.0 ml 0.5% (w/v)氯化鐵(III)。在反應混合物中加入0.5 mL 0.5% (w/v)的鐵氰酸鉀溶液。將反應混合物在70±2°C的水浴中加熱30分鍾,不斷晃動,並用去離子水稀釋。在780 nm下測量試劑空白的吸收。以環蒿醇為標準,測定獼猴桃提取物中類固醇的含量。總甾體含量以微克每毫克新鮮材料的環蒿醇當量表示。

心髒糖苷定量檢測:總心苷含量答:DeliciosaChev。用Muhammad SA等人開發的比色法測定粗水果提取物。[23]。將8毫升獼猴桃提取物(EKE和MKE)轉移到100毫升的量瓶中,然後加入60毫升去離子水和18毫升12.5% (w/v)醋酸鉛,混合均勻並過濾。然後,將50ml濾液轉移到另一個100ml燒瓶中,加入8ml 47% (w/v)的一磷酸二鈉沉澱多餘的鉛2 +離子。混合好的內容和去離子水完成最後的體積。混合物用同一濾紙過濾兩次,以去除多餘的磷酸鉛。10ml濾液轉移到一個幹淨的Erylen-Meyer燒瓶用10ml Baljet試劑處理。用10ml蒸餾水和10ml Baljet試劑進行空白滴定。讓這種混合物靜置一小時,使顏色完全顯現。在495 nm處用比色法測量顏色強度,公式如下:

苯酚-硫酸法定量測定碳水化合物:酒精中碳水化合物的總量答:DeliciosaChev。采用改進的Nielsen[24]方法測定水果粗提物。在兩組含5% (w/v)苯酚(2.0 ml)的試管中分別加入奇異果提取物2.0 ml、EKE和MKE,混合均勻後,慢慢加入濃硫酸5ml,使其旋動。反應混合物靜置10分鍾,然後在25°C孵育10分鍾。再次旋轉混合物,測量490 nm處的吸光度。用葡萄糖作為參考化合物測定提取物中碳水化合物的總含量,用微克葡萄糖當量表示每毫克新鮮物質。

抗氧化試驗

免費自由基清除活性:DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基肼基)自由基的清除能力答:DeliciosaChev。粗果提取物按Rajurkar NS等[25]方法測定。將DPPH (4 mg/10 ml)原液(100 mM)稀釋至1:10的比例。將等量(0.5 ml)的DPPH原液加入到不同的試管中,然後增加獼猴桃提取物的濃度(10-100 mg/ml)。加入去離子水使最終體積達到1.0 ml,孵育30分鍾。在517 nm (A517)對著紫外可見分光光度計上的試劑空白。自由基清除活性測定為DPPH在測試樣品/化合物存在時吸光度的降低。DPPH自由基清除能力由樣品和空白的吸光度差來估計,用DPPH清除百分比表示。DPPH自由基在減少的過程中,其紫色的變色程度表明了抗氧化劑[26]清除自由基的潛力。反應混合物在37°C的熱水浴中孵育1小時後劇烈旋轉517記錄了反應混合物的含量。由於抗氧化劑通過提供氫氣清除自由基,形成穩定的DPPH分子,顏色由紫色變為黃色,吸光度下降。槲皮素被用作參考分子校準參考輪廓。

獼猴桃提取物的清除率(%)=(C腹肌年代腹肌) / C腹肌×100

C =一個517控製和S=A517測試樣品。

的集成電路50(提取液的濃度導致DPPH自由基減少50%)值用線性回歸分析計算,表明獼猴桃提取液的抗氧化能力。

阿爾法澱粉酶抑製試驗:在體外α -澱粉酶抑製試驗按照McCue PP等[27]方法進行。共200μl答:DeliciosaChev。在試管中取粗水果提取物(20- 100mg/ml),然後加入在20mM磷酸鈉緩衝液(pH 6.9)中製備的α -澱粉酶溶液(0.5mg/ml) 200μl。25℃預孵育15min後,加入200 μl在2mm磷酸鈉緩衝液(pH 6.9)中製備的1% (w/v)澱粉溶液。混合物進一步在25°C孵育10min。在反應混合物中加入500μl二硝基水楊酸(DNS)試劑停止反應,然後將試管置於熱沸水中孵育5min,室溫冷卻。對照品用蒸餾水代替水果提取物,采用上述方法製備。最後用5ml蒸餾水和A稀釋反應混合物540值記錄。α -澱粉酶抑製活性計算為:

的集成電路50(提取物的濃度導致50%的酶活性抑製)值計算使用線性回歸分析,表明獼猴桃提取物的抑製潛力。

集成電路的計算50的集成電路50對每個樣本按以下程序計算:

抑製比(y)與樣品濃度(x)相互作圖。分別繪製回歸線,得到回歸方程(y=mx+c)。在回歸方程中,樣品濃度(x)在y=50處計算。這個計算值被設置為IC50(mg/ml)每個分析樣品的值。

α-澱粉酶抑製方式:答:DeliciosaChev。根據Ali H等[28]的改進方法,采用粗水果提取物(EKE和MKE)進行α-澱粉酶抑製動力學研究。250μl獼猴桃提取物與250μl α -澱粉酶溶液(0.5mg/ml)在20 mM磷酸鹽緩衝液(pH 6.9)中預孵育10min, 25℃,套管。在另一組試管中預培養250 μl α-澱粉酶。在反應混合物中分別加入250μl的澱粉溶液,濃度分別為0.30、0.90、1.50、2.50和5.0mg/ml,啟動反應。反應混合物在25℃孵育10min後,加入500μl DNS煮5min。用分光光度法測定每種情況下還原糖的釋放量540使用麥芽糖標準曲線,並轉換為反應速度如下:

活動(U =更易/分鍾/ mL) =腹肌- B腹肌/性病腹肌- b腹肌×濃縮的。性病/培養時間X n/MW麥芽糖

S=樣品,B=緩衝,Std=標準,Conc。=濃度,n=稀釋因子,MW=分子量

雙倒數圖(1/V°1/[S]),其中V為反應速度,[S]為底物濃度。抑製的類型或模式和動力學參數答:DeliciosaChev。利用Michaelis-Menten動力學分析雙倒數(Lineweaver-Burk)圖來測定水果提取物對α-澱粉酶活性的影響。通過調整Lineweaver-Burk動力學方程曲線計算動力學參數:

1 / V = (K/ V馬克斯) (1/ s) + 1/ v馬克斯

澱粉-瓊脂凝膠擴散試驗:製備了含有0.5%可溶性澱粉和2.5%瓊脂的澱粉瓊脂平板[29]。在平板瓊脂培養基上打5個孔,然後分別加入不同濃度的EKE和MKE(60、80和100 mg/ml)處理α-澱粉酶的反應混合物各30 μl;陽性對照含有磷酸鈉緩衝液(0.5 mg/ml)中的α- α-澱粉酶,陰性對照僅含有緩衝液。平板孵育過夜,在20°C下擴散,然後用碘溶液檢測和測量澱粉水解區。

統計分析

使用Microsoft excel進行統計分析。三次重複測定的結果均以Mean±SE表示。p≤0.05為顯著值。

結果與討論
果實材料的製備和提取物的產量

為了研究溶劑在萃取特定成分時的效率,每種特定生化成分的得率答:DeliciosaChev。測定了果實提取物。的答:DeliciosaChev。果實提取物中EKE (3.47 g)和MKE (1.66 g)的產量分別為24.83和11.8%。Yang H等[30]報道乙醇提取物的產率為7.9%和8.6% (w/w),而溶劑餾分(乙酸乙酯和正丁醇)的產率為4.1和13.0% (w/w)獼猴桃deliciosa而且Actinidiachinensis水果皮,分別。之前的研究評估了不同類型的溶劑對從各種植物部位(如果實、葉子和種子)提取生物活性化合物的影響。有趣的是,在本研究中嚐試的提取程序似乎比早期的調查相當有效。提取殘渣量和得率的變化主要取決於使用毒性小、傳質快、沸點低和防腐作用好的溶劑。此外,影響提取效率的其他關鍵因素是提取液種類、提取溫度和提取時間。

定性分析

主要植物化學的調查:在初步的方法中,獼猴桃deliciosaChev。粗水果提取物被用於各種次生代謝物的初步植物化學篩選,通過報道的化學分析(表1)。對兩種酒精提取物的植物化學分析顯示,類固醇、心髒糖苷、萜類化合物、類黃酮和碳水化合物的存在很好。為了確定獼猴桃的活性成分,已經對獼猴桃進行了多項研究[33-38]。EKE和MKE提取物對大多數植物成分的存在都有陽性結果。

植物化學物質 化學測試 Methanolic提取 Ethanolic提取
類黃酮 氫氧化鈉測試 + +
萜類化合物 Salkowaski測試 ++ +
類固醇 利伯曼今後的
測驗
++ ++
碳水化合物 莫氏利施的測試 ++ ++
心苷 Keller-Killani測試 + +
丹寧酸 氯化鐵測試 - -
生物堿 瓦格納的測試 - -

表1:美味獼猴桃的植物化學定性分析。
+表明存在植物化學物質
++表示植物化學物質的優良存在
-表明缺乏植物化學物質

定量分析

總類黃酮含量:類黃酮是植物次生代謝產物中最重要的一種,具有多種生物活性和抗氧化作用,被認為在製藥、醫藥、營養和化妝品應用中不可或缺。類黃酮的含量答:DeliciosaChev。用亞硝酸鈉與氯化鋁反應生成黃酮-鋁絡合物的方法測定了水果提取物的含量。利用槲皮素分析曲線(10 ~ 100 μg/ml)計算EKE和MKE中總黃酮含量(TFC),以紫外-可見信號為基礎(Y= 0.007x+0.159;R2= 0.982)。的determination of the TFC of EKE and MKE extracts (100 mg/ml), expressed as quercetin equivalents (µg/mg), established flavonoid abundance in methanolic extract (0.37) than that of ethanolic extract (0.28). Fiorentino A, et al. [38] quantified TFC in答:Deliciosa簡曆。海沃德原油提取。他們的分析報告了極性提取物中大量的類黃酮(兒茶素當量;131.7 ~ 108.9 mg/100 g果重),而非極性提取物效果有限或無效果。交通(兒茶酸當量;Mg /100克果實重量)答:kolomikta(69.05),答:arguta(188.43)和答:對(67.63例)用鋁比色法測定獼猴桃提取物按遞減順序排列答:arguta>答:kolomikta>答:對[40]。質譜研究中發現的類黃酮答:Deliciosa水果提取物中提取的11個黃酮分子分別為柚皮素、槲皮素、tricin、黃酮山奈酚和槲皮素的3-O-α- l-鼠李吡喃基衍生物、槲皮素-3-O-β- d -吡喃葡萄糖苷、山奈酚-3-O-β蘆丁苷、蘆丁、表兒茶素、兒茶素和沒食子兒茶素[38]。

總甾類內容:類固醇是膽固醇衍生的親脂性低分子量化合物,用於許多食品添加劑、化妝品和作為各種藥物或藥物配方的成分[41]。植物甾醇答:DeliciosaChev。在濃硫酸的存在下,水果提取物與氯化鐵和鐵氰酸鉀發生反應,產生一種粉紅色的複合物,其強度與存在的類固醇的數量成正比。用環蒿醇分析曲線(4 ~ 28 μg/ml)計算EKE和MKE中總甾體含量(TSC) (100 mg/ml) (Y=0.0029x+0.107;R2= 0.9989)。測定EKE和MKE提取物的TSC (100 mg/ml),以環蒿醇當量(μg/ mg)表示,乙醇提取物的甾體含量(13.50)高於甲醇提取物(12.58)。然而,對獼猴桃果實中總甾體含量的估計研究還很有限。Fiorentino A等人[38]表征了植物甾醇的7種類型答:Deliciosa“海沃德”有機水果提取物被鑒定為豆甾醇,β-穀甾醇,油菜甾醇,豆甾醇-7-en-3β-醇,麥角甾醇,其過氧化物衍生物和5,7,14,22-麥角甾醇-3β-醇通過GCMS分析。這些植物甾醇有助於降低血液膽固醇水平,並作為化學預防劑抑製致癌過程。

心髒總苷含量:心髒糖苷是用於治療心肌梗死、某些心律不齊和各種心髒相關疾病的幾種藥物或藥物之一。獼猴桃富含糖苷,其總心髒糖苷含量以EKE和MKE (100 mg/ ml)[23]估計。甲醇提取物的心苷含量(4.7 μg/mg)高於乙醇提取物(3.7 μg/mg)。然而,以往的研究隻對獼猴桃果實中心髒苷類成分進行了初步的檢測,而沒有對其含量進行檢測。

總碳水化合物含量:碳水化合物有助於大多數食物的甜度、外觀和質地。除此之外,每種食物都有碳水化合物的“指紋”、營養成分、特性和各種其他因素。因此,必須確定碳水化合物的含量。用葡萄糖分析曲線(10 ~ 90 μg/ml)計算EKE和MKE中碳水化合物總含量(TCC) (100 mg/ml),基於UV-Vis信號(Y=0.0047x + 0.438;R2=0.9638)和苯酚-硫酸比色法。濃硫酸將多糖、雙糖和寡糖分解為單糖。戊糖脫水成糠醛,己糖脫水成羥甲基糠醛。這些化合物與苯酚反應時呈現金黃色。EKE和MKE提取物的TCC (100 mg/ml),以葡萄糖當量(μg/ mg)表示,甲醇提取物的甾體含量(0.24)高於乙醇提取物(0.22)。Deters AM等[43]研究了獼猴桃多糖的摩爾組成通過氣相色譜/質譜分析發現了9種不同類型的碳水化合物:鼠李糖,果糖,核糖,阿拉伯糖,木糖,甘露糖,半乳糖,葡萄糖和糖醛酸。

抗氧化(DPPH自由基清除活性)測定

DPPH自由基清除活性是分析特定化合物或植物提取物[44]抗氧化活性的靈敏方法。的決心答:DeliciosaChev。通過測定果實清除DPPH自由基的能力,研究了果實的抗氧化性能。DPPH是一種容易被清除的自由基,當它靠近在a處表現出最大吸收的抗氧化分子時517.清除能力以自由基減少百分比(DPPH•)報告。兩種醇提取物具有相同的劑量反應清除能力和較強的百分比降低。事實上,MKE的清除活性最好(%)(72.16%)。EKE的清除活性為61.16%。DPPH自由基測定結果證實了所有提取物都能大量清除自由基目標物種的事實。觀察到的集成電路50(提取物濃度使DPPH自由基減少50%)值(表2)顯示,甲醇提取物具有最強的抗氧化活性(3.14±0.153 mg/ml),而乙醇提取物(4.2±0.073 mg/ml)。IC越低50值越大,則樣品的抗氧化活性越高。采用ABTS和FRAP法對獼猴桃5個品種果實的抗氧化能力進行了測定,測定結果分別為9.40 ~ 21.36 (ABTS法)和0.87 ~ 9.22 (FRAP法)mmoltrolox/100 g幹重[37]。先前的調查強調,乙醇提取物答:Deliciosa水果比己烷和乙醚提取物更能有效地降低自由基答:Deliciosa水果[38]。

提取 集成電路50(毫克/毫升)
甲醇 3.14±0.153
乙醇 4.2±0.073

表2:集成電路50的價值。果實提取物采用DPPH法測定。
用三次重複試驗的平均值±SEM表示(P≤0.05)。

α澱粉酶抑製試驗

人類胰腺α-澱粉酶(E.C. 3.2.1.1)是消化係統中的一種關鍵酶,負責將澱粉分解成低聚糖的混合物,如α (l-6), α(1-4)低聚糖和麥芽三糖;適合吸收的雙糖如麥芽糖和單糖。抑製α-澱粉酶對治療非胰島素依賴型糖尿病(2型糖尿病)特別有用,因為它會減慢葡萄糖的吸收[46,47]。在目前的工作中,影響ActinidiadeliciosaChev。考察了獼猴桃醇提物對α-澱粉酶催化活性的影響。結果表明,MKE對α-澱粉酶的抑製作用呈劑量依賴性,在終濃度為100 mg/ml時,MKE對α-澱粉酶的抑製作用(85.16%)強於EKE(79.76%)。的集成電路50(表3)MKE(1.53±0.158 mg/ml)顯著低於EKE(2.05±0.639 mg/ml) (p≤0.05)。因此,降低集成電路50表明對酶有較強的抑製作用。在存在兩種不同濃度的EKE和MKE時,通過Lineweaver-Burk圖確定了動力學參數,顯示出酶活性的競爭性抑製(圖1)表明K提取液中無α-澱粉酶的含量為0.722 mg/mL,分別低於MKE和EKE的1.010 mg/mL和0.998 mg/mL。wojdyso A等[37]評估IC50(mg幹果/ ml)的α-澱粉酶值在4.13 ~ 6.62之間。先前的研究表明獼猴桃提取物對α-澱粉酶和自由基清除具有較強的抑製作用,因此具有抗血糖和抗氧化能力[37,47,48]。然而,一項研究發現,兒茶素、槲皮素-3- o -葡萄糖苷、山奈酚-3- o -蘆丁苷和山奈酚-3- o -葡萄糖苷等類黃酮對α-澱粉酶[49]具有較高的抑製活性。目前,研究表明,活性成分答:DeliciosaChev。水果提取物與底物在酶活性部位的結合競爭。獼猴桃提取物對α-澱粉酶活性有較強的抑製作用。這一結果與之前的研究結果一致,即廣泛抑製胰腺α-澱粉酶,導致微生物發酵未消化的碳水化合物,導致結腸不規則。因此,適度的α-澱粉酶抑製是可取的。不同獼猴桃對α-澱粉酶的抑製作用研究較少。然而,獼猴桃的抗高血糖活性強於柚子、橘子、橙子、香蕉、菠蘿、果肉、紅柚子和蘋果[47]。

提取 集成電路50(毫克/毫升)澱粉酶
甲醇 1.53±0.091
乙醇 2.05±0.368

表3:集成電路50美味棘球絛蟲α澱粉酶抑製潛力值。提取物。
用三次重複試驗的平均值±SEM表示(P≤0.05)。

圖1:抑製模式的Lineweaver-Burk圖α澱粉酶作者:EKE和MKE。

澱粉瓊脂試驗

澱粉瓊脂凝膠擴散試驗顯示獼猴桃提取物的抑製作用呈陽性結果(圖2)。獼猴桃的抗糖尿病作用也已被證實。最近的研究表明,早餐吃獼猴桃顯著減緩了葡萄糖釋放到血流[52]。此外,植物化學分析表明獼猴桃含糖量較低,這與以往報道的低血糖指數有利於調節血糖的結論一致[53,54]。

圖2:MKE和EKE處理α -澱粉酶(0.5 mg/mL)後的澱粉瓊脂平板(a)陽性對照(b)陰性對照(c) 60.0 mg/mL (d) 80.0 mg/mL和(e) 100.0 mg/mL。

結論

獼猴桃是一種營養豐富、熱量低的營養密集型食品。它在世界各地作為沙拉、果汁或零食食用。在本研究中,植物化學分析提供了一個思路獼猴桃deliciosaChev。(獼猴桃)。後來,通過建立其抗氧化和抗高血糖的作用,驗證了這種水果的藥用性質。獼猴桃對改善健康的貢獻可能與它的抗氧化能力有關。維生素C、膽堿、玉米黃質和葉黃素是主要的抗氧化劑,有助於清除體內不同代謝過程中產生的自由基。抗高血糖化合物用於治療糖尿病。研究表明獼猴桃提取物具有良好的抗糖尿病潛力。今後的研究應立足於測定其總抗氧化能力、抗氧化劑含量獼猴桃番荔枝果實的基因型及其抗糖尿病作用獼猴桃因為(i)抗氧化劑的濃度在它們的物種和亞種之間差異顯著,(ii)獲取不同獼猴桃的推薦消費和銷售,可以作為豐富的膳食補充劑,也有助於治療糖尿病。

致謝

該研究得到了新德裏科學和工業研究理事會的資助,CSIR-NET初級研究獎學金[File No.09/237(0161)/2017-EMR-1]授予其中一位作者(VC)。作者感謝新德裏CSIR和新德裏DBT對喜馬偕爾邦大學生物技術係持續的財政支持。

的利益衝突

作者聲明,他們之間或與母學院沒有利益衝突。


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條信息

文章類型:研究文章

引用:Dhiman VK, Chauhan V, Kanwar SS(2020)植物化學研究和在體外抗氧化和抗高血糖活性的評價獼猴桃deliciosa(答:Chev。)梁c.f.和A.R.弗格森(獼猴桃)。生物化學分析4(1):dx.doi.org/10.16966/2576-5833.119

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出版的曆史:

  • 收到日期:09年1月,2020年

  • 接受日期:2020年3月25日

  • 發表日期:2020年3月31日