摘要

研究了偏振光對感染致命劑量甲型流感病毒的實驗動物(小鼠)存活的影響。照射PAYLERlight動物(小鼠背部的整個表麵)可以延緩流感感染的發展，增強機體的防禦能力。

關鍵字

甲型流感病毒；偏振光;Proteinase-inhibitors係統;白老鼠

簡介

太陽光束對人的不同疾病的影響優勢自古以來就為人所知。現代光理論並不是新的理論。1903年，丹麥物理學家N.R.芬森被授予諾貝爾生理學和醫學獎，以表彰他在光療法和發現醫學新趨勢方麵的工作。由俄羅斯科學家K.A.Samojlova, k.d.s obolenska, a.v.s volodina等表明，以偏光穿透皮膚的滲透為代價，降低了對血液配方元素的非侵入性照射。他們證明，直接的光修飾，其結果在1- 3%的體積輻照，在循環血液的所有體積的效果推廣。紅細胞膜過氧化作用下降，且單次作用24小時內保持不變。在白細胞中(以犧牲上文所述的膜功能和能量平衡的新生機製為代價)，抗體的產生正在加強，受體(與外來物質有關)和免疫中介功能正在恢複。免疫球蛋白的產生，細胞成分的吞噬活性增強，其功能的持續時間延長。線性偏振光刺激免疫細胞。機體免疫係統的恢複和刺激，抗感染和抗病毒能力提高，局部抗炎作用降低。

眾所周知，在動物和人類的細胞中，不斷地進行各種生化和生理過程。身體的狀態取決於各種重要的能量來源:光、空氣、水、食物和來自環境的正電磁波(陽光)。前提是偏振光(類似陽光)對身體有積極影響，用於各種疾病的治療[1-5]。

目的是研究偏振光對感染致命劑量甲型流感病毒的實驗動物存活率的影響。

材料與方法

流感病毒A/PR/8/34，適用於小白鼠肺組織，經5代傳代。所有的老鼠隻在實驗開始時等待。所有動物一種^聖組感染後第5天死亡。取死亡小鼠肺均質，測定蛋白酶活性和血凝效價。甲型流感病毒感染滴度為7 lg EID50/0.2 ml，血凝素滴度為1:64,Balbc係體重13 ~ 14克(40隻)的小白鼠。A型流感病毒在動物鼻內感染0.05 ml(輕乙醚麻醉下)，稀釋10^－2的感染劑量為20ld₅₀病毒。該劑量在6上引起了100%的動物死亡率^th感染後的第二天。動物被分為4組，每組10隻。1^聖一組動物鼻內感染致命劑量的甲型流感病毒(控製病毒)。

光照射

2^nd一組接受了致死劑量的甲型流感病毒，參數與第一組相同，但正在接受Pilar-light治療。從背部開始對動物的整個表麵進行照射(圖1)。每隻小鼠接受11次照射，每次6分鍾。

圖1:用偏振光照射實驗動物(白鼠)的頭部(1)和背部(2)。

3^{理查德·道金斯}組動物隻接受Pilar-light治療(每隻小鼠11次)。4^th實驗組動物注射稀釋甲型流感病毒的生理鹽水(動物對照)。

蛋白酶活性測定

該方法是基於精氨酸的定性反應，精氨酸由魚精蛋白和組蛋白水解和不可沉澱的20%三氯乙酸形成。

試劑

1. 1%硫酸精蛋白溶液，0.1 M磷酸鹽緩衝液。
2. 20%三氯乙酸。
3. 0.004%羥基喹啉溶液。羥基喹啉100毫克溶解於50毫升乙醇中。用蒸餾水將原料稀釋50倍製成工作溶液。
4. 10% NaOH溶液。
5. 1% NaBrO (1gr Br2帶入100 ml 0°C的0,1 n NaOH溶液)。
6. 40%尿素

統計分析

對照組與試驗組間蛋白酶活性值差異有統計學意義p<0.05。在“Microsoft excel”中采用一般方法對結果進行統計計算。

采用K.I. Veremeyenko[6]、改良的S.V. Vovchuk[7]法測定胰蛋白酶活性。蛋白用O. Lowry[8]測定。采用A.P. Levitsky[9]測定抑製性蛋白酶胰蛋白酶。

在15世紀^th感染後的第二天，所有還活著的動物被麻醉後，剖開肺，取肺血。器官在0.01 M低溫磷酸鹽緩衝液(pH值7.5)中洗滌3次，用剪刀粉碎，用低溫無菌砂漿中磨碎的無菌玻璃，懸浮在磷酸鹽緩衝液中(pH值7.5(1個肺每1毫升)，使用Hith Infenicity超聲處理設備在7模式下用超聲均質，並在10下離心⁴revol /分鍾。離心，Sorval Instruments公司，轉子SS-34 1小時(t+4°C)。

用上清液和血清測定蛋白酶、血凝活性和總蛋白。通過感染9-10天的雞胚，測定感染動物肺部的感染性病毒滴度，用lg eid50 /0,2 ml表達。按常規方法進行血凝反應。

用上清液和血清測定蛋白酶、血凝活性和總蛋白。通過感染9-10天的雞胚，測定感染動物肺部感染病毒滴度，用lg EID表達₅₀/0,2 ml。用常規方法進行血凝反應。

在治療感染致命劑量甲型流感病毒的動物時，使用了偏振、非相幹、多色(Pilar)光，波長為400-2000納米，光能為2.4 J/cm²每天6分鍾一次，一般療程11次。在1^聖感染後的第一天，分別在1和6小時照射小鼠。

結果與討論

研究結果如表1所示。動物死亡率100%^聖對照組(A型流感病毒對照組)觀察5^th感染後一天。在2^nd動物組(A型流感病毒+偏振光處理)中14例^th感染後的第二天，50%的小鼠仍然存活。觀察顯示，感染後2天，動物嗜睡，飲食不良。從4開始^th一天，這些症狀消失了。3^{理查德·道金斯}隻接受偏振光照射的一組動物活躍，全部存活。所有動物4^th對照組動物自己注射生理鹽水，也存活下來。

表1:偏振光感染致死劑量流感病毒a /PR/8/34小鼠的存活
注意:分子——死老鼠;分母——幸存的老鼠。

在(小鼠血清)檢測感染後14天後胰蛋白酶樣蛋白酶活性、蛋白含量及血凝活性時(表2)，我們發現:

№gr。	的名字群體的	小鼠肺蛋白酶活性，單位/ml*	小鼠血清蛋白酶活性，單位/ml*(混合樣品)
1.	甲型流感病毒 (控製)	125.5±49.5*	387
2.	甲型流感病毒+偏振光	182.0±49.25*	80
3.	偏振光 (控製)	192.8±50.93*	267
4.	等滲溶液(對照)	229±53.71*	74

表格2：流感病毒A/PR/8/34感染小鼠偏振光照射後蛋白酶活性的變化(n = 24m±M)
請注意：PA -小鼠肺蛋白酶活性，胰樣蛋白酶活性，單位/ml。1單位活性定義為在1分鍾孵育中形成1微摩爾精氨酸的酶量(p≤0.05)。

在1^聖組動物肺蛋白酶活性明顯受到抑製，較4組降低50%^th對照組- 125.5±49.5和229±53.17 un/ml。

同時小鼠血清中蛋白酶-含量高注意:PA -小鼠肺蛋白酶活性，胰樣蛋白酶活性，單位/ml。1單位活性定義為在1分鍾孵育中形成1微摩爾精氨酸的酶量(p≤0.05)。與4相比^th對照組- 74±6.4 un/ml。3 .在偏振光的影響下^{理查德·道金斯}健康組肺蛋白酶活性略有降低，為192.8±50.93 un/ml^th用偏振光照射感染致死劑量甲型流感病毒的小鼠(2組)，發現小鼠肺部蛋白酶活性與對照組相同(182.0±49.25 un/ml)，小鼠血清蛋白酶含量為229±53.71 un/ml(4組)^{理查德·道金斯}偏振光照射組(192.8±50.93 un/ml)，但顯著高於1^聖未治療組(125.5±49.5 un/ml)。2 .小鼠血清中蛋白酶活性較低^nd和圖4^th成群的動物。

3 .肺和血清中的血凝活性^{理查德·道金斯}和圖4^th動物的種類尚未確定。重要的是，在2^nd一組動物接種甲型流感病毒致死劑量偏振光治療，感染14 d後(整個觀察期)甲型流感病毒滴度為1:2。

由於偏光照射是在甲型流感病毒穿透細胞時進行的，暴露6小時後，當病毒第一次增殖周期並在細胞外空間輸出時，我們假設偏光破壞了細胞中負責甲型流感病毒血凝素(HA)裂解為2個亞基HA1和HA2的酶，它們負責A型流感病毒在細胞中的滲透和增殖[10,11]。

因此，用偏振光照射感染致死劑量流感病毒a /PR/8/34的動物(小鼠背部的整個表麵)，可以延緩病毒流感感染的發展，並且小白鼠恢複了健康。

結論

用偏振光對感染致命劑量甲型流感病毒的白鼠進行治療，可以延緩甲型流感病毒的繁殖速度及其在體內的活性。小滴度測定感染活性和血凝活性。偏振光並沒有摧毀宿主體內的甲型流感病毒，隻是阻礙了它在動物體內的繁殖。在此期間，小鼠恢複為保護性抑製活性，並存活下來。

參考文獻

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條信息

文章類型:研究文章

引用:Divocha VA(2016)偏振光在小鼠感染致命劑量甲型流感病毒防禦中的影響。Autoimmun Infec Dis 3(2): doi http://dx.doi.org/10.16966/2470-1025.121

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出版的曆史:

收到日期:8月30日

接受日期:2016年10月18日

發表日期:2016年10月24日